实验性暴发性肝衰竭中肿瘤坏死因子α与肝细胞凋亡的关系《中国...
采用美国Radnoti公司Langendorff离体心脏灌流系统，观察离体心脏功能变化，可排除其它组织器官、循环代谢产物的干扰。实验步骤：A.配制37℃K-H液（1.25CaCl2，130NaCl，5.4KCl，11葡萄糖，0.5MgCl2，0.5NaH2PO4及25NaHCO3），向K-H液中通入95％O2-5%CO2气体，缓冲液PH值为7.4，并取部分K-H液放入冰箱中，使其温度降到4℃。B.清洁Langendorff管路，每次使用前先用1000ml蒸馏水冲洗，打开水浴循环，再用K-H液将整个管路系统进行冲洗。C.鲁米钠腹腔注射麻醉动物（100mg/kg），并向肝静脉注射100IU肝素，颈动脉放血处死动物，同时快速分离心脏，放入4℃K-H液中挤净血液并称重。D.将心脏迅速固定在Langendorff灌流系统中，通过主动脉以85cmH2O压力逆行灌注，通过肺静脉插入导管至左心房。E.心脏复跳后，将一个球囊插入心脏左心室，球囊和压力换能器相连，在电脑上记录左室内压，调整左室舒张内压（LVEDP）在4～10mmHg之间。待心脏左室收缩压（LVESP）稳定后且大于80mmHg，心率大于200次/分，可继续实验，并记录心电图（ECG）、主动脉流量（AF）、冠脉流量（CF）、左室收缩末压（LVESP）等指标。F.缺血再灌注方案：关闭灌流液，停灌心脏45min后，打开灌流液进行复灌90min（复灌起始15min通过肺静脉给予一定的压力辅助），同时记录相关指标。G.实验结束后，用蒸馏水冲洗整个管路系统，防止K-H液残留在管路中。
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发布于 ： 2018-12-26
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