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BORRELIA GARINII ANTIGEN

Borrelia garinii antigen has been manufactured for use in the detection of antibodies against B. garinii for immunoassay development or other applications.

PRODUCT DETAILS – BORRELIA GARINII ANTIGEN

  • Borrelia garinii antigen (strain CIP 103362), inactivated by detergent treatment.
  • Harvested bacteria are washed and detergent solubilized to produce a cytoplasmic extract enriched with lipoproteins and outer surface proteins (OSPs).
  • The antigen is presented in phosphate buffered saline containing 1 % n-octyl-β-D-glucopyranoside.
  • QC serum panel (multiple negative, borderline and positive sera) within defined reactivity range in Borrelia burgdorferi IgG and IgM ELISA.
  • For immunoassay development or other applications.

BACKGROUND

Lyme disease is a multisystem disorder caused by three species of the tick-borne spirochete Borrelia burgdorferi sensu lato; namely Borrelia burgdorferi sensu stricto (United States and Europe), Borrelia garinii and Borrelia afzelii (Europe). The disease was first recognized in Lyme, Connecticut, United States in 1975, and Borrelia burgdorferi was described as the causative organism in 1982. However, the clinical manifestations of the disorder were previously described by Afzelius in Europe in the early 1900’s (Zouyan & Coburn, 2017).

Borrelia are loosely coiled, spiral, microaerophilic bacteria with 3 to 10 loose coils arranged in a helical shape. The cells are 10 to 30 µm long and 0.2 to 0.5 µm wide and contain at least seven periplasmic flagella that are responsible for the organism’s motility (Wormser,, 2012). Borrelia burgdorferi sensu lato (or B. burgdorferi in the general sense) consists of 14 closely related genospecies. However, the human infection is caused primarily by three genospecies. In the United States, B. burgdorferi sensu stricto (B. burgdorferi in the strict sense), is the sole cause of the disease, whereas Borrelia afzelii and Borrelia garinii are the primary causes in Europe and Asia (Steere, 2015). Each of these genospecies is associated with different enzootic lifecycles and clinical manifestations. Borrelia afzelii is mostly associated with skin manifestations, whereas B. garinii is considered to be the most neurotropic and B. burgdorferi s.s. the most arthritogenic. These genospecies are associated with different vertebrate host species. Borrelia afzelii is associated with rodents, whereas B. garinii is associated with birds (van Duijvendijk et al., 2015).

REFERENCES

  • Steere, AC. Lyme disease, in Rheumatology (Sixth Edition), 2015.
  • van Duijvendijk, G., Sprong, H. & Takken, W. (2015). Multi-trophic interactions driving the transmission cycle of Borrelia afzelii between Ixodes ricinus and rodents: a review. Parasites Vectors 8, 643.
  • Wormser, GP. Lyme Disease, in Goldman’s Cecil Medicine (Twenty Fourth Edition), 2012.
  • Zouyan L & Coburn J. Lyme Disease, in International Encyclopedia of Public Health (Second Edition), 2017.

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2016-01-18
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)可以:(1)测定两种目标蛋白质是否在体内结合;(2)确定一种特定蛋白质的新的作用搭档;(3)分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。实验步骤:一、试剂准备 1. 预冷 PBS,RIPA Buffer,细胞刮子(用保鲜膜包好后,埋冰下),离心机。2. 用预冷的 PBS 洗涤细胞两次,最后一次吸干 PBS.3. 加入预冷的 RIPA Buffer(1 ml/107 个细胞、10 cm 培养皿或 查看更多>
上海杰美基因医药科技有限公司在发布的琼脂糖凝胶法蛋白质西方杂交免疫印迹ECL化学发光检测试剂盒供应信息,浏览与琼脂糖凝胶法蛋白质西方杂交免疫印迹ECL化学发光检测试剂盒相关的产品或在搜索更多与琼脂糖凝胶法蛋白质西方杂交免疫印迹ECL化学发光检测试剂盒相关的内容。 查看更多>
本试剂盒采用独特的缓冲液系统,溶胶后转入吸附柱直接离心即可专一性吸附DNA,去除其它杂质。可从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段。 可回收20bp-40kb大小的片段,回收率可高达85以上。是最快速高效的选择。... 查看更多>
Product Size: 100 g Melting Point: Standard Melting Point Separation Range: 100 bp to >30 kb Validated Application: Gel Electrophoresis Regulatory Statement: For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. Shipping Condition: Room T 查看更多>
吸附柱式琼脂糖胶DNA回收试剂盒... 查看更多>
Sephacryl S-1000 层析是一个可供选择的将质粒 DNA 与小分子核酸(DNA 和 RNA ) 分离的方法。这一方法由波士顿麻省总医院的 F.DeNoto 和 H.Goodman 首先采用,后来由 Gomez-Marquez 等总结成论文发表于 1987 年。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。 查看更多>
低熔点琼脂糖是经过化学修饰的琼脂糖,具有更高的筛过特性,更透明。是理想的DNA和RNA电泳产品,也适合组织培养细胞的克隆和病毒空斑分析。多糖链上引入羟乙基、甲氧基等基团后的琼脂糖。由于其能在30℃左右成胶,约65℃熔化,熔化温度低于大多数双链DNA熔点。利用低熔点琼脂糖的这种性质可以... 查看更多>
性状:含20%的乙醇,底部为乳白色胶体。凝胶要反复使用的话要用纯净水将酒精洗下来,装到层析柱里就可以用了 用途:生化研究。适合于分离蛋白及多糖、肽类分子量的测定 保存:2~8℃ 查看更多>
琼脂糖凝胶回收DNA时考虑的关键参数从琼脂糖凝胶中回收DNA,是一种简单不过的常规实验操作。但是由于胶回收的质量和数量直接影响后继的一系列实验——比如酶切连接、转化筛选、测序或者PCR扩增、标记乃至显微注射等等,所以这一步的操作也显得非常重要。胶回收的几个关键参数:胶回收的质量直接影响后继实验的成功与否。要想做好胶回收,无论是自己亲力亲为还是借助目前五花八门的胶回收试剂,最基本的评定标准无外乎这么几个:1.回收产... 查看更多>
Form: Powder Product Size: 100 g Melting Point: Low Melting Point Separation Range: >1,000 bp Gel Compatibility: Agarose Gels Validated Application: Plaque Assays, Gel Electrophoresis Green Features: Sustainable packaging Regulatory Statem 查看更多>
Agarose(西班牙琼脂糖)是一种电泳级别纯度很高的产品,Biowest作为著名的琼脂糖品牌,具有极佳的产品性价比,在同行中有着非常高的知名度,在同类产品中占据着最高的市场份额,是琼脂糖中的权威品牌。西班牙琼脂糖(Biowest Agarose)不仅适用于蛋白电泳也可以用于其它核酸分析电泳。生兴生物供应的西班牙琼脂糖(Biowest Agarose),100%原装进口。Biowest Agarose相关参数:Gel Strength ... 查看更多>
DYCP-31DN琼脂糖水平电泳槽是由北京泽兰西科技有限公司代理或销售的六一品牌的仪器,产品来源于北京。北京泽兰西科技有限公司是中国最权威的DYCP-31DN琼脂糖水平电泳槽销售服务商之一,在北京等地方销售DYCP-31DN琼脂糖水平电泳槽已经多年。同时,生物在线为您提供众多企业DYCP-31DN琼脂糖水平电泳槽仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的DYCP-31DN琼脂糖水平电泳槽产品 查看更多>
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琼脂糖凝胶电泳时胶中dna发出荧光是因为琼脂糖凝胶中添加了溴化乙锭(EB)。
溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,可用Polaroid 底片或带CCD 成像头的凝胶成像处理系统拍摄。
区别是:
biowest agarose 指的是西班牙琼脂糖。
agarose指的是琼脂糖。
琼脂和琼脂糖不光中文叫法有点区别,它们的英文名字也是不同的。先来说说琼脂,它的英文名为agar。这个词来源于马来语的agar-agar,意思是胶状物。而琼脂糖的英文名为agarose,天然琼脂agar由琼脂糖(agarose)和琼脂果胶(agaropectin)组成。
琼脂糖是线性的多聚物,基本结构是1,3连结的β-D-半乳呋喃糖和1,4连结的3,6-脱水α-L-半乳呋喃糖。琼脂果胶是由许多更小的分子组成的异质混合物。它们的结构相似,但带硫酸根和羧基组分,凝胶能力差。
琼脂糖(Agarose)的特性详细介绍可以登录生物帮看看, http://www.bio1000.com/news/cp/ 生物产品,生物学新技术,生物研发,生物产业,生命科学创新产品。
作为盐,它可以液化凝胶。凝胶都是氢键盐键等次级键交联成的,会被离液序列高的盐破坏掉,加盐酸胍也能起到这个作用,不一定是碘化钠。
其实加入碘化钠最主要的作用是高离序盐,让DNA和它结合以后和柱子里的凝胶充分充分地,结合起来!!
洗涤那步很重要,如果洗不干净高离序盐,会抑制酶切,有些酶很敏感的。
琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解,温度下降到35-40℃时形成良好的半固体状的凝胶,这是它具有多种用途的主要特征和基础。琼脂糖凝胶性能通常用凝胶强度表示。强度越高,凝胶性能越好。质量较好的琼脂糖强度通常在1200克/cm2以上(1%胶浓度)。琼脂糖的凝胶性是由存在的氢键所致,凡是能破坏氢键的因素都能导致凝胶性的破坏。琼脂糖具有亲水性,并几乎完全不存在带电基团,对敏感的生物大分子极少引起变性和吸附,是理想的惰性载体。在琼脂糖制备过程中需要把琼脂果胶尽量去除,否则琼脂糖有可能存在极微量硫酸根和丙酮酸取代电离基团,就会造成电内渗(EEO),电内渗对质点的移动产生影响。质量较好的琼脂糖硫酸根含量比较低,通常在0.2%以下,电内渗比较小,通常在0.13以下。这也就是琼脂糖比琼脂贵那么多的原因了。
1937年荒木第一次从琼脂中分离出琼脂糖,但直到1961年Hjertin首先发现了琼脂糖优异的使用性能后才引起了越来越多的关注,并开始工业生产。琼脂糖广泛应用于临床化验、生化分析和生物大分子物质的分离等领域。
应该是交联度吧。对不同分子量得蛋白质进行凝胶色谱柱时,要选择不同的交联度。固定化细胞,根据细胞大小也要选择。

大家好,本人是实验新手一枚,目前在学做琼脂糖电泳,我是提取基因组DNA,然后以500ngDNA为模板,按照以下反应体系PCR:Q5高保真热启动2Xmastermix12.5UL;上下游引物终浓度0.5uM,DNA模板500ng,加水补支总体积25ul,反应程序,98℃30s,98℃5S,62℃10s,72℃20s,35或者40个循环,72℃2min,4℃保存,PCR产物取5UL行2%琼脂糖电泳,EB染色,50ul琼脂糖胶加入10mg/mlEB染液5ul,但是结果几乎看不到条带,但是Marker很清晰。最后我把PCR产物用分光光度计测量浓度,发现浓度在400-600ng/ul之间,260/280接近1.80,我想知道我哪里做错了,才导致看不到条带呢?请园子里的老师指教,在此,我首先感谢大家了!

什么是琼脂糖,由什么构成
琼脂糖凝胶电泳是常用的分离和检测方法,琼脂是最常用的载体支持物,核酸分子具有电荷效应和分子筛效应,利用此特性可达到分离检测的目的。
一、琼脂糖凝胶的特点
天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(agarose,约占80%)及琼脂胶(agaropectin)组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷,而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖,由于这些基团带有电荷,在电场作用下能产生较强的电渗现象,加之硫酸根可与某些蛋白质作用而影响电泳速度及分离效果。因此,目前多用琼脂糖为电泳支持物进行平板电泳,其优点如下。
1. 琼脂糖凝胶电泳操作简单,电泳速度快,样品不需事先处理就可以进行电泳。
2. 琼脂糖凝胶结构均匀,含水量大(约占98%~99%),近似自由电泳,样品扩散较自由电流,对样品吸附极微,因此电泳图谱清晰,分辨率高,重复性好。
3. 琼脂糖透明无紫外吸收,电泳过程和结果可直接用紫外光灯检测及定量测定。
4. 电泳后区带易染色,样品极易洗脱,便于定量测定。制成干膜可长期保存。
目前,常用琼脂糖作为电泳支持物,分离蛋白质和同工酶。将琼脂糖电泳与免疫化学相结合,发展成免疫电泳技术,能鉴别其他方法不能鉴别的复杂体系,由于建立了超微量技术,0.1ug蛋白质就可检出。
琼脂糖凝胶电泳也常用于分离、鉴定核酸,如DNA鉴定,DNA限制性内切核酸酶图谱制作等。由于这种方法操作方便,设备简单,需样品量少,分辨能力高,已成为基因工程研究中常用实验方法之一。
二、DNA的琼脂糖凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳对核酸的分离作用主要是依据它们的相对分子量质量及分子构型,同时与凝胶的浓度也有密切关系。
1、核酸分子大小与琼脂糖浓度的关系
① DNA分子的大小 在凝胶中,DNA片段迁移距离(迁移率)与碱基对的对数成反比,因此通过已知大小的标准物移动的距离与未知片段的移动距离时行比较,便可测出未知片段的大小。但是当DNA分子大小超过20kb时,普通琼脂糖凝胶就很难将它们分开。此时电泳的迁移率不再依赖于分子大小,因此,就用琼脂糖凝胶电泳分离DNA时,分子大小不宜超过此值。
② 琼脂脂糖的浓度 如下表所示,不同大小的DNA需要用不同浓度的琼脂糖凝胶进行电泳分离。
表 琼脂糖浓度与DNA分离范围琼脂糖浓度/%0.30.60.70.91.21.52.0线状DNA大小/kb60-520-110-0.87-0.56-0.44-0.23-0.1
2、核酸构型与琼脂糖凝胶电泳分离的关系
不同构型DNA的移动速度次序为:供价闭环DNA(covalently closed circular,cccDNA)>直线DNA>开环的双链环状DNA。当琼脂糖浓度太高时,环状DNA(一般为球形)不能进入胶中,相对迁移率为0(Rm=0),而同等大小的直线双链DNA(刚性棒状)则可以长轴方向前进(Rm>0),由此可见,这三种构型的相对迁移率主要取决于凝胶浓度,但同时,也受到电流强度、缓冲液离子强度等的影响。
3、电泳方法
① 凝胶类型
用于分离核酸的琼脂糖凝胶电泳可分为垂直型及水平型(平板型)。水平型电泳时,凝胶板完全浸泡在电极缓冲液下1-2mm,故又称为潜水式。目前更多用的是后者,因为它制胶和加样比较方便,电泳槽简单,易于制作,又可以根据需要制备不同规格的凝胶板,节约凝胶,因而较受欢迎。
② 缓冲液系统
缺少离子时,电流太小,DNA迁移慢;相反,高离子强度的缓冲液由于电流太大会大量产热,严重时,会造成胶熔化和DNA的变性。
常用的电泳缓冲液有EDTA(pH8.0)和Tris-乙酸(TEA),Tris-硼酸(TBE)或Tris-磷酸(TPE)等,浓度约为50mmol/L(pH7.5~7.8)。电泳缓冲液一般都配制成浓的贮备液,临用时稀释到所需倍数。
TAE缓冲能力较低,后两者有足够高的缓冲能力,因此更常用。TBE浓溶液长期贮存会出现沉淀,为避免此缺点,室温下贮存5×溶液,用时稀释10倍0.5×工作溶液即能提供足够缓冲能力。
③ 凝胶的制备
以稀释的电极缓冲液为溶剂,用沸水浴或微波炉配制一定浓度的溶胶,灌入水平胶框或垂直胶膜,插入梳子,自然冷却。
④ 样品配制与加样
DNA样品用适量Tris-EDTA缓冲液溶解,缓冲液内含有0.25%溴酚蓝或其他指示染料,含有10%-15%蔗糖或5%~10%甘油,以增加其比重,使样品集中。为避免蔗糖或甘油可能使电泳结果产生U形条带,可改用2.5%Ficoll(聚蔗糖)代替蔗糖或甘油。
⑤ 电泳
琼脂糖凝胶分离大分子DNA实验条件的研究结果表明,在低浓度、低电压下,分离效果较好。在低电压条件下,线性DNA分子的电泳迁移率与所用的电压呈正比。但是,在电场强度增加时,较大的DNA片段迁移率的增加相对较小。因此随着电压的增高,电泳分辨率反而下降,为了获得电泳分离DNA片段的最大分辨率,电场强度不宜高于5V/cm。
电泳系统的温度对于DNA在琼脂糖凝胶中的电泳行为没有显著的影响。通常在室温下进行电泳,只有当凝胶浓度低于0.5%时,为增加凝胶硬度,可在4℃进行电泳。
⑥ 染色和拍照
常用荧光染料溴乙锭(EB)染色,在紫外光下观察DNA条带,用紫外分析仪拍照,或用凝胶成像系统输出照片,并进行有关的数据分析。
注意事项:电泳中所使用的染料EB是致癌物质,一定要小心,避免其接触皮肤等,进行电泳操作的时候一定要带手套,手套要及时更换,现在也除了一些EB的替代物,如Goldview等。

手提的斑马鱼RNA再反转录得到CDNA作为模板进行primestar,p的是斑马鱼的全长,但是全长p出来总是带有拖带的情况,有一个情况较好的图是这样的(mark左边的那一条)

我就用这个pcr的产物作为模板又做了一次,结果如下

求大神赐教!!!




准备干净的配胶板和电泳槽
注意DNA酶污染的仪器可能会降解DNA,造成条带信号弱、模糊甚至缺失的现象。 电泳洗脱法
低熔点琼脂糖凝胶电泳挖块法
冻融回收法
玻璃奶回收法
柱回收法 将电泳槽用ddH2O反复清洗干净,倒入新鲜配制的灭菌电泳缓冲液;
根据点样量制备合适厚度的琼脂糖凝胶板;
切胶时尽可能切掉不含DNA片段的凝胶;
要尽量减少DNA在紫外下的照射时间以减少对DNA的损伤;
熔胶要完全。向左转|向右转
琼脂糖珠培养123
yinj8412021-08-02
有没有人听说过用琼脂糖珠技术做肿瘤细胞迁移实验?
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