
Product Name | SensoLyte ® AMC Caspase Profiling Kit *Fluorimetric* |
Size | 1 kit |
Catalog # | AS-71120 |
US$ | $698 |
Caspases play important roles in apoptosis and cell signaling. They are also identified as drug-screening targets. AMC-based substrates yield blue fluorescence upon protease cleavage (Ex/Em=354 nm/442 nm). They are widely used to monitor caspase activity. The SensoLyte® Caspase Profiling Kit contains a series of AMC-based peptide substrates as fluorogenic indicators for assaying caspase protease activities. The kit contains a well-designed plate in which a series of AMC-based caspase substrates are coated with both positive and negative controls. It provides the best solution for profiling caspases or caspase inhibitors. The kit contains: A 96-well plate coated with a series of AMC-based caspase substrates along with various controls* Cell lysis buffer Assay buffer AMC (fluorescence reference standard for calibration) A detailed protocol *384-well plate format is available on custom basis. Kit Size: 2 plates | |
Detailed Information | ![]() ![]() |
Storage | -20°C |
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我要做的两个目的蛋白,分子量一个是140的,另一个是36,内参用的GAPDH。这几天刚刚要做小鼠组织的蛋白,就把新提取的组织蛋白和之前做过的细胞蛋白一起上了,细胞和组织的各上了3个孔。
电泳转膜孵育等条件都是以前做成熟的
之后显影,细胞蛋白的,两个目的和内参都出得挺好;但是小鼠的组织蛋白只有分子量140的那个显出条带了,36的那个显出来的像一片水渍一样,斑片状的黑,内参有时也这样、有时干脆什么都不显。不知道这是什么原因...按说细胞同样的蛋白做出来,WB的各个步骤应该不会有太大问题的。
有点怀疑蛋白提取的不好,我提组织蛋白的的操作是在冰上进行的,裂解液也加有PMSF,用BCA法测得的蛋白浓度大概也有3~5mg/ml。
在这里求助各位高手~望给我指点一下~不胜感激啊!
去垢剂作为添加剂生长蛋白质晶体是一项很有用的技术。非离子和两性离子结晶剂在膜蛋白结晶中已经得到很好应用,目前已经变成常规的实验手段。去垢剂在一些可溶蛋白中也起到了一定的作用,提高了晶体的质量和结果的可重复性 ,促进了单晶的生长, 但具体的影响机制尚不明确。其可能原因是去垢剂的引入使结晶液滴中的蛋白分子更具有亲水性,使溶液中同质蛋白质分子增加。向左转|向右转
如要膜蛋白保持原来的结构应采用:非离子型去垢剂.
表面活性剂:通常由一个极性头和一个非极性尾组成,用于去除难溶于水的污渍
漂白剂:通常含次氯酸盐成分,原理为其氧化性
稀盐酸:用于去除碱性的污渍,如马桶中的结块
碳酸钠溶液:用于去除油渍,其原理为酯在碱溶液中水解,参见皂化反应

