
Product Name | SensoLyte ® Rh110 Cathepsin K Assay Kit *Fluorimetric* |
Size | 1 kit |
Catalog # | AS-72152 |
US$ | $526 |
Cathepsins are a class of globular lysosomal proteases playing a vital role in mammalian cellular turnover. They degrade polypeptides and are distinguished by their substrate specificities. Cathepsin K is the lysosomal cysteine protease involved in bone remodeling and resorption. It has potential as a drug target in autoimmune diseases and osteoporosis. The SensoLyte® Rh110 Cathepsin K Assay Kit provides a convenient assay for high throughput screening of enzyme inhibitors or for continuous assay of enzyme activity utilizing a fluorogenic peptide. Upon enzyme cleavage, the peptide releases the Rh110 fluorophore with bright green fluorescence that can be detected at Ex/Em=496/520 nm. The kit contains: Rh110 based fluorogenic substrate (Ex/Em=490/520 nm upon cleavage) Assay buffer Procathepsin K Activation buffer Inhibitor Fluorescence reference standard for calibration A detailed protocol Kit size: 100 assays (96-well plate) | |
Detailed Information | ![]() ![]() |
Storage | -20°C |
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我要做的两个目的蛋白,分子量一个是140的,另一个是36,内参用的GAPDH。这几天刚刚要做小鼠组织的蛋白,就把新提取的组织蛋白和之前做过的细胞蛋白一起上了,细胞和组织的各上了3个孔。
电泳转膜孵育等条件都是以前做成熟的
之后显影,细胞蛋白的,两个目的和内参都出得挺好;但是小鼠的组织蛋白只有分子量140的那个显出条带了,36的那个显出来的像一片水渍一样,斑片状的黑,内参有时也这样、有时干脆什么都不显。不知道这是什么原因...按说细胞同样的蛋白做出来,WB的各个步骤应该不会有太大问题的。
有点怀疑蛋白提取的不好,我提组织蛋白的的操作是在冰上进行的,裂解液也加有PMSF,用BCA法测得的蛋白浓度大概也有3~5mg/ml。
在这里求助各位高手~望给我指点一下~不胜感激啊!
去垢剂作为添加剂生长蛋白质晶体是一项很有用的技术。非离子和两性离子结晶剂在膜蛋白结晶中已经得到很好应用,目前已经变成常规的实验手段。去垢剂在一些可溶蛋白中也起到了一定的作用,提高了晶体的质量和结果的可重复性 ,促进了单晶的生长, 但具体的影响机制尚不明确。其可能原因是去垢剂的引入使结晶液滴中的蛋白分子更具有亲水性,使溶液中同质蛋白质分子增加。向左转|向右转
如要膜蛋白保持原来的结构应采用:非离子型去垢剂.
表面活性剂:通常由一个极性头和一个非极性尾组成,用于去除难溶于水的污渍
漂白剂:通常含次氯酸盐成分,原理为其氧化性
稀盐酸:用于去除碱性的污渍,如马桶中的结块
碳酸钠溶液:用于去除油渍,其原理为酯在碱溶液中水解,参见皂化反应

