Properties:
| RelatedCategories | Amberglassvials,Analytical/Chromatography,MostPopularVialProducts,PrecleanedSamplingVials,Silanized&PrecleanedVials, |
| material | PTFE/siliconesepta(Thickness:0.125") |
| amberglassvial | |
| whitepolypropylenecap | |
| feature | closuretypescrewtopvial |
| closuretypewhitepolypropyleneholecap | |
| packaging | pkgof72 ea |
| O.D.×H | 29 mm×82 mm |
Description:
Generaldescription
EachofthevialsiscleanedaccordingtoUSEPAProtocolB:Thecleaningprocedureisasfollows:
1.Washcontainersinhotwaterusinglaboratorygradenon-phosphatedetergent.
2.Rinsethreetimeswithcopiousamountsoftapwatertoremovedetergent.
3.RinsethreetimeswithASTMTypeIorganic-freewater.
4.Oven-drycontainers.
5.Allowcontainerstocooltoroomtemperatureinanenclosedcontaminant-freeenvironment.
6.Capthecontainers.
Afterbeingcleanedthesevialsareassembledwiththefollowingmaterials:Type1borosilicateglass,PTFE/siliconesepta,andapolypropylenecap.Thevialsareavailableineitherclearoramberglass.Allofthevialsarepackagedwithanopentopcapandatan/whitePTFE/siliconesepta.
The40mLEPAvialsaresuppliedwithaCertificateofAnalysisandapackageoflabelstousetoidentifythecontentsofyoursample.ThepackageofvialsisshrinkwrappedaftercleaningtomakesurethatthevialsarrivetoyouascleanaspossIBLe.
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如常用于缓冲的Tris、HEPES、MPOS等等,去垢剂如NP40,Tween-20,TritonX100,CHAPS,脱氧胆酸钠,SDS等等,
大家能说说这些试剂的使用区别吗(最好讲讲某些情况下使用一些会优于另一些的例子)
有时候某些裂解液含10%左右甘油,又是为何?
平时我们用习惯了一些配方,可能有时候不太清楚为何有些是可替代的,有些是不可替代的,借此机会想听听大家的见解?
如要膜蛋白保持原来的结构应采用:非离子型去垢剂.
B.阴离子去垢剂 常见的有十二烷基硫酸钠和十二烷基璜酸钠。前者可促进核蛋白的溶解,将核酸释放出来,并对核酸酶有一定抑制作用,常用于核酸的提取。
C.阳离子去垢剂 如洁尔灭、新洁尔灭、CTAB、CPC、ZEPH、克菌定、消毒净(TMPB)、杜灭芬等,消毒灭菌类居多。
D.天然表面活性剂 又称为生物表面活性剂,包括种类较为广泛,如各种树胶(阿拉伯胶、杏胶、桃胶、果胶)、明胶、皂甙、卵磷脂、豆磷脂、琼脂、海藻酸钠、酪蛋白、胆甾醇、胆酸类、多糖类(如环糊精)等。
E.两性表面活性剂 在碱性水溶液中呈阴离子表面活性剂的性质,起泡性好,去污力也强;在酸性溶液中则呈现阳离子表面活性剂特征,其杀菌性很强。向左转|向右转
我要做的两个目的蛋白,分子量一个是140的,另一个是36,内参用的GAPDH。这几天刚刚要做小鼠组织的蛋白,就把新提取的组织蛋白和之前做过的细胞蛋白一起上了,细胞和组织的各上了3个孔。
电泳转膜孵育等条件都是以前做成熟的
之后显影,细胞蛋白的,两个目的和内参都出得挺好;但是小鼠的组织蛋白只有分子量140的那个显出条带了,36的那个显出来的像一片水渍一样,斑片状的黑,内参有时也这样、有时干脆什么都不显。不知道这是什么原因...按说细胞同样的蛋白做出来,WB的各个步骤应该不会有太大问题的。
有点怀疑蛋白提取的不好,我提组织蛋白的的操作是在冰上进行的,裂解液也加有PMSF,用BCA法测得的蛋白浓度大概也有3~5mg/ml。
在这里求助各位高手~望给我指点一下~不胜感激啊!

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