- 产品名称Anti-V5 tag, Mouse monoclonal
- 克隆号KT90
- 抗体亚型Mouse IgG2a
- 标记类型None
- 应用WB
- 抗体类型Primary antibodies,Anit-tag antibodies
- 宿主Mouse
- 抗原A fusion protein containing V5
- 形式Liquid
- 浓度1 mg/ml in PBS containing 0.09% sodium azide as a preservative
- 提纯方法Antibody is purified from culture supernatant by a Protein A column
- 克隆形式Monoclonal
- 存放说明Store at +4°C for 1 month, aliquot and store at -20 °C or -80°C for long term. Avoid repeated freeze/thaw cycles
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单克隆抗体是利用了瘤细胞的无限增殖,利用了淋巴细胞能产生单一抗体的特征。记忆细胞是不能产生抗体的,需要抗原刺激才能增殖、分化为浆细胞,浆细胞才能产生抗体。
(1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。
(2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体。
(3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等。
(4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。
2.单克隆抗体的局限性
(1)单克隆抗体固有的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围。由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反应,所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成。
(2)单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体。
(3)制备技术复杂,而且费时费工,所以单克隆抗体的价格也较高。向左转|向右转
鼠源性抗体应用于人体会产生抗鼠抗体反应(HAMA )等,妨碍其在临床上的应用,所以要制备人鼠杂交和完全人源化的抗体,减少抗体中的鼠源成分,尽量保留原有抗体的特异性.
单克隆抗体这项新技术从根本上解决了在抗体制备中长期存在的特异性和可重复性问题,可用于探讨: ①蛋白质的精细结构;②淋巴细胞亚群的表面新抗原;③组织相容性抗原;④激素和药物的放射免疫(或酶免疫)分析;⑤肿瘤的定位和分类;⑥纯化微生物和寄生虫抗原;⑦免疫治疗和与药物结合的免疫-化学疗法 (“导弹”疗法,利用单克隆抗体与靶细胞特异性结合,将药物带至病灶部位.。
因此,单克隆抗体可直接用于人类疾病的诊断、预防、治疗以及免疫机制的研究,为人类恶性肿瘤的免疫诊断与免疫治疗开辟了广阔前景。
大家好,最近在做单抗,里面有些问题一直想不通,我想请大神帮忙一下,想问一下饲养细胞加少了是大概多少,我一直6周龄的balb/C,刚拿回来就取饲养细胞了,然后取了3毫升,注射到60毫升的HAT中铺了六块板子,这个量多么,么有细胞计数,至今细胞计数不是很会,去想问你们第二天去看板子是时候,底下会有雾一样的细胞么,细胞多的地方你们的液体上清会有点变色么,要一点不变色的是好的,还是细胞上清稍微变色是正常的呢谢谢大神指导
最近我想筛选一个针对膜蛋白的单克隆抗体,这个抗体的参考文献中提到的一种筛选方法是用DNA质粒直接免疫小鼠,然后再脾融合筛选出来的。这里有几个问题想向大家请教一下:
1.DNA效果比蛋白差很远,但是膜蛋白的抗体有可能是针对空间构象的,能起效的抗体位点很少,所以要在免疫阶段保证抗体多样性和特异性。看参考文献的剂量都是25ug或者50ug这种比较低的剂量,免疫次数2-3次,最后在融合前用细胞加免一次。而我设计的实验组是100ug剂量,免疫了4-5次,我这样是不是筛不出来特异性的抗体了?
2.DNA筛到的阳性抗体,可能亲和力低,如果不想筛到IgM的抗体,DNA免疫从什么时候开始由IgM转换成IgG的?抗体多样性在免疫的什么阶段比较高?
求助:看了许多文献,对于免疫小鼠的抗原剂量以及方法各不相同,所以发帖问问大家制备单抗的详细过程,谢谢大家
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