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2021-09-05
威斯腾生物在发布的shotgun混合蛋白(Western-blot实验服务、蛋白纯化、多肽合成、单克隆抗体制备、多克隆抗体制备、蛋白双向电泳实验服务、质谱分析、原核蛋白表达、真核蛋白表达、iTRAQ定量蛋白质组学、SILAC蛋白组学等) 威斯腾生物,让科研更简单!供应信息,浏览与shotgun混合蛋白(Western-blot实验服务、蛋白纯化、多肽合成、单克隆抗体制备、多克隆抗体制备、蛋白双向电泳实验服务、质谱分析、原核蛋白表达、真核蛋白表达、iTRAQ定量蛋白质组学、SILAC蛋白组学等) 查看更多
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2018-12-26
1) Prepare a C-18 reverse phase prep-sep cartridge by washing with:a) 10 ml of methanolb) 20 ml of chloroform-methanol (2:1)c) 10 ml of methanold) 10 ml of met 查看更多
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2017-09-27
武汉巴菲尔生物技术服务有限公司在发布的RFWD3多克隆抗体供应信息,浏览与RFWD3多克隆抗体相关的产品或在搜索更多与RFWD3多克隆抗体相关的内容。 查看更多
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2021-08-15
南京钟鼎生物技术有限公司在发布的多克隆抗体制备服务供应信息,浏览与多克隆抗体制备服务相关的产品或在搜索更多与多克隆抗体制备服务相关的内容。 查看更多
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上海武昊生物科技有限公司在发布的巨噬细胞炎性蛋白5(MIP5)多克隆抗体(人的一抗)/武昊生物/wuhaobio供应信息,浏览与巨噬细胞炎性蛋白5(MIP5)多克隆抗体(人的一抗)/武昊生物/wuhaobio相关的产品或在搜索更多与巨噬细胞炎性蛋白5(MIP5)多克隆抗体(人的一抗)/武昊生物/wuhaobio相关的内容。 查看更多
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2017-10-04
青岛中科爱博生物科技有限公司在发布的中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白多克隆抗体供应信息,浏览与中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白多克隆抗体相关的产品或在搜索更多与中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白多克隆抗体相关的内容。 查看更多
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2017-09-18
武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司在发布的JDP2多克隆抗体供应信息,浏览与JDP2多克隆抗体相关的产品或在搜索更多与JDP2多克隆抗体相关的内容。 查看更多
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2021-09-10
服务名称:抗体制备 查看更多
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2017-09-27
上海泽叶生物科技有限公司在发布的血管性血友病因子(vWF)多克隆抗体供应信息,浏览与血管性血友病因子(vWF)多克隆抗体相关的产品或在搜索更多与血管性血友病因子(vWF)多克隆抗体相关的内容。 查看更多
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2017-07-07
北京博尔西科技有限公司在发布的生产供应原料:兔抗羊IgG(多克隆抗体)供应信息,浏览与生产供应原料:兔抗羊IgG(多克隆抗体)相关的产品或在搜索更多与生产供应原料:兔抗羊IgG(多克隆抗体)相关的内容。 查看更多
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2017-07-28
抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monclone antibody)。由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除... 查看更多
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2021-08-04
制备抗体的传统方法是用纯制的抗原多次接种于适当的成年健康动物,则激其产生免疫应答,血清中含有大量特异性抗体,又称抗血清或免疫血清。可以直接取用,也可将血清抗体提纯为精致免疫球蛋白。但是天然抗原含有多种互不相同的抗原决定簇,因此血清抗体是具不同特异性的多克隆抗体混合物... 查看更多
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请帮我分析一下这个琼脂糖凝胶电泳图!可加悬赏! 123
life_is_life2021-08-03
关于兔子多克隆抗体制备,有些问题请教各位老师 实验动物 ...123
自然卷91872021-07-25
蛋白表达纯化及抗体制备求推荐公司 生物科学 学术...123
sss_7372021-07-22
Bioss~博奥森~
国内哪家抗体定制公司好? 123
2021-08-07
多克隆抗体存在于免疫动物的血清中,可通过直接分离血清获得。金开瑞的多克隆抗体制备平台,以抗体平台为核心建立了一系列技术平台和动物养殖基地,可以提供包括兔、小鼠、大鼠、豚鼠等多个系统的多克隆抗体 制备,供您自由选择属于您的需求!
抗体的制备—多克隆抗体123
弗兰爱贝尔2452017-11-04
一、多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤:
1、制备抗原。
2、选择实验动物。
3、动物免疫。
4、试取血进行测试,看看是否成功免疫。
5、如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。
二、抗体分类
抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monoclone antibody)。由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外,同样一类抗原决定簇,也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。多克隆抗体是由异源抗原(大分子抗原、半抗原偶联物)刺激机体产生免疫反应,有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。多克隆抗体由于其可识别多个抗原表位、可引起沉淀反应,制备时间短,成本低的原因广泛应用于研究和诊断方面。
三、免疫方法
可以采用以下各种方法之一进行免疫。
(1)淋巴结注射法:①在兔的两后足跖部皮下(或皮内)注射活卡介苗 50mg(每侧约0.30ml) 。7~10 天后,兔跖及腘肌淋巴结肿大;②于肿大的两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml);③必要时,14 天后,重复步骤②一次;④再过 7 天后,于两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的 IgG 乳化抗原0.50ml(含IgG5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml) ;⑤5~7天后,耳静脉采血。测定血清效价。
(2)皮下多点注射法:①家兔两侧掌(跖内各注射含有完全佐剂抗原 0.10ml(IgG 含量5mg/ml) ;②7~10 天后,脊柱两侧多点(颈、胸、腰椎各两点、共 6 点)皮下注射含不完全佐剂5的抗原,每点 0.50ml;③7~10 天后,脊柱两侧重复注射一次;④7~10 天后试血。不合格者重复步骤③。
(3)多途径联合注射法:①两侧掌(跖)内侧皮下注射含完全佐剂抗原 0.50ml(IgG 量为 5mg/ml) ;②14 天后,多点皮下注射含有不完全佐剂抗原;③7 天后,耳静脉注射不含佐剂的抗原 2ml;④测定血清抗体效价,不合格者重复步骤③,并适当递增 IgG 量。
1、制备抗原。
2、选择实验动物。
3、动物免疫。
4、试取血进行测试,看看是否成功免疫。
5、如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。
二、抗体分类
抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monoclone antibody)。由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外,同样一类抗原决定簇,也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。多克隆抗体是由异源抗原(大分子抗原、半抗原偶联物)刺激机体产生免疫反应,有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。多克隆抗体由于其可识别多个抗原表位、可引起沉淀反应,制备时间短,成本低的原因广泛应用于研究和诊断方面。
三、免疫方法
可以采用以下各种方法之一进行免疫。
(1)淋巴结注射法:①在兔的两后足跖部皮下(或皮内)注射活卡介苗 50mg(每侧约0.30ml) 。7~10 天后,兔跖及腘肌淋巴结肿大;②于肿大的两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml);③必要时,14 天后,重复步骤②一次;④再过 7 天后,于两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的 IgG 乳化抗原0.50ml(含IgG5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml) ;⑤5~7天后,耳静脉采血。测定血清效价。
(2)皮下多点注射法:①家兔两侧掌(跖内各注射含有完全佐剂抗原 0.10ml(IgG 含量5mg/ml) ;②7~10 天后,脊柱两侧多点(颈、胸、腰椎各两点、共 6 点)皮下注射含不完全佐剂5的抗原,每点 0.50ml;③7~10 天后,脊柱两侧重复注射一次;④7~10 天后试血。不合格者重复步骤③。
(3)多途径联合注射法:①两侧掌(跖)内侧皮下注射含完全佐剂抗原 0.50ml(IgG 量为 5mg/ml) ;②14 天后,多点皮下注射含有不完全佐剂抗原;③7 天后,耳静脉注射不含佐剂的抗原 2ml;④测定血清抗体效价,不合格者重复步骤③,并适当递增 IgG 量。
【求助】IHC一抗选择单克隆抗体好还是多克隆抗体好? 免疫学讨论...123
hotxinxin2021-08-04
请问各位,做免疫组化用单克隆抗体好,还是多克隆抗体好。这两个有什么区别,顺便,大家帮我看看我的免疫荧光实验步骤有没有什么太大的问题。谢谢各位。
1取组织
(1) 灌注固定:暴露心脏,将注射针头插入左心室,剪开右心耳,快速灌注PBS,待右心耳处流出澄清液体,换4%多聚甲醛灌注到大鼠四肢强直为止,快速取脑和肾。
(2) 固定:将组织置于4%多聚甲醛中固定15小时
(3) 脱水:将组织放入30% 蔗糖溶液中直至下沉
(4) 切片:脑组织冰冻切片20微米,37度烘干2h以上;
(5)将切片放置-80度保存,随用随取。
2免疫单标记
(1)做抗原修复(0.4g柠檬酸、3g柠檬酸钠、1000ml水配制成溶液,放到水浴箱中90~94℃保存15min),冷却后, 用1*PBS反复洗标本10min,吸去PBS,同时向标本加渗透液(配0.4%trition液,然后将BSA加入到配好的trition液中,配成1%浓度)100ul,常温下湿盒反应1h。
(2) 吸去渗透液,同时向标本加block液(5%封闭用正常山羊血清)100ul,常温下湿盒反应5h。
(3) 吸去block液,同时向标本加入1:50稀释的羊抗鼠一抗100ul,37度湿盒反应过夜。
(4)吸去一抗,并回收,用1*PBS洗液反复洗15min。
(5)快速从冰箱中取出驴抗羊的二抗,并立即用锡纸包裹,注入到一个新的以锡纸包裹的tube管中并用PBS以1:200稀释。
(6)进入暗室,吸去PBS,同时加入二抗100ul,37度湿盒反应2h,封片。
(7)放置到荧光显微镜下观察。
1取组织
(1) 灌注固定:暴露心脏,将注射针头插入左心室,剪开右心耳,快速灌注PBS,待右心耳处流出澄清液体,换4%多聚甲醛灌注到大鼠四肢强直为止,快速取脑和肾。
(2) 固定:将组织置于4%多聚甲醛中固定15小时
(3) 脱水:将组织放入30% 蔗糖溶液中直至下沉
(4) 切片:脑组织冰冻切片20微米,37度烘干2h以上;
(5)将切片放置-80度保存,随用随取。
2免疫单标记
(1)做抗原修复(0.4g柠檬酸、3g柠檬酸钠、1000ml水配制成溶液,放到水浴箱中90~94℃保存15min),冷却后, 用1*PBS反复洗标本10min,吸去PBS,同时向标本加渗透液(配0.4%trition液,然后将BSA加入到配好的trition液中,配成1%浓度)100ul,常温下湿盒反应1h。
(2) 吸去渗透液,同时向标本加block液(5%封闭用正常山羊血清)100ul,常温下湿盒反应5h。
(3) 吸去block液,同时向标本加入1:50稀释的羊抗鼠一抗100ul,37度湿盒反应过夜。
(4)吸去一抗,并回收,用1*PBS洗液反复洗15min。
(5)快速从冰箱中取出驴抗羊的二抗,并立即用锡纸包裹,注入到一个新的以锡纸包裹的tube管中并用PBS以1:200稀释。
(6)进入暗室,吸去PBS,同时加入二抗100ul,37度湿盒反应2h,封片。
(7)放置到荧光显微镜下观察。
多克隆抗体制备流程 免疫学讨论版论坛123
摉栣鵸轊疩r2021-08-14
一般选用鼠或兔来做,如果你的免疫原分子量够大的话,就直接免疫,如果是小分子的话,可以连上BSA等的一些蛋白再免疫,五免后取血检测血清中抗体含量
多克隆抗体 123
闹胖詹4952021-08-12
首先,要确定多抗的目的蛋白的分子量,40kda是重组蛋白的分子量,那目的蛋白多大呢?
其次,察看次目的蛋白的存在形式,有没有多聚体形式及变构形式;
最后,查看多家抗体公司的DATA,看看别人的WB做出来的条带的位置。
根据你说的,特异识别多个组织中的同样大小的条带,我觉得很可能就是你的目的蛋白。
其次,察看次目的蛋白的存在形式,有没有多聚体形式及变构形式;
最后,查看多家抗体公司的DATA,看看别人的WB做出来的条带的位置。
根据你说的,特异识别多个组织中的同样大小的条带,我觉得很可能就是你的目的蛋白。
【求助】请教各位大神,我做的免疫组化,荧光和WB的标本来源是大鼠...123
xlf198905182021-08-06
注射破伤风抗毒素(一种动物血清蛋白)是抗原还是抗体?123
ysys2021-07-30
兔单克隆抗体 123
最后一次HVVLE2021-08-05
单抗制备难度大,使用时候容易受到目标蛋白降解的影响。
多抗,稀释度更大,特异性相对较差,容易出现多条带。
兔的单克隆抗体和鼠的单克隆抗体在使用上不会有什么区别。
用来很多抗体,许多时候觉得单抗多抗也未必是理论上那样的。单抗做不好的也有,多抗条带唯一且清晰的也有。
而且很多蛋白的抗体未必有那么多的选择。
多抗,稀释度更大,特异性相对较差,容易出现多条带。
兔的单克隆抗体和鼠的单克隆抗体在使用上不会有什么区别。
用来很多抗体,许多时候觉得单抗多抗也未必是理论上那样的。单抗做不好的也有,多抗条带唯一且清晰的也有。
而且很多蛋白的抗体未必有那么多的选择。
单克隆和多克隆的区别?__123
夙子XQ1812021-07-23
从化学结构上来看多克隆抗体都是极其不均一,呈高度异质性.
单克隆抗体结构相似且均一,有高度特异性
单克隆抗体结构相似且均一,有高度特异性


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