Details
ChickenswereimmunizedwithActinpurifiedfromrabbitmuscle.Afterrepeatedinjections,immuneeggswerecollected,andtheIgYfractionswerepurifiedfromtheyolks.TheseIgYfractionswerethenaffinity-purifiedusingapeptidecolumn.Thefinalproductcontains50%glycerol(v/v),purifiedanti-ActinIgYfraction(10mg/ml)spikedwith25µg/mlofaffinitypurifiedanti-ActinIgY,andthenfilter-sterilized.
Volume:100µL(ACT-1010)or400µL(ACT-1040)
Concentration:10mg/mL
Clonality:Polyclonal
HostSpecies:Chicken
SpeciesReactivity:Human,Mouse,Rat
Applications:WB
AntibodyRegistryID(RRID):AB_2313504
PhysicalState:Liquid
Buffer:Sodiumphosphate(10mM,pH7.2)bufferedisotonicsaline(0.9%,w/v),glycerol(50%,v/v),withsodiumazide(0.02%,w/v)asananti-microbialagent.
ValidationandApplicationNotes
MolecularWeight:42kDa
QualityControl
Thisanti-ActinIgYpreparationwasanalyzedbyWesternBlotanalysis(atadilutionof1:2000)usingHRP-labeledgoatanti-chickenIgY(1:5000dilution,AvesLabsCat.#H-1004)asthesecondaryreagent.
Storage
Storeat-20˚Cinthedark.Undertheseconditions,theantibodiesshouldhaveashelflifeofatleast12months(providedtheyremainsterile).Donotfreezeantibodiesat-80˚C,unlessyouwanttostorethemforlongerperiodsoftime.Notethateachtimeanantibodypreparationisfrozenabouthalfitsbindingactivityislost.
NOTE
AvesLabsproductsareintendedforuseasresearchlaboratoryreagents.Theyarenotintendedforuseasdiagnosticortherapeuticreagentsinhumans.
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AvesLabs是一家成立于上世纪九十年代，专注于高亲和性鸡源抗体的研发和准备，生物医药和生命科学行业全球*的鸡多克隆抗体(IgY)及定制抗体/多肽/免疫试剂的专业公司。AvesLabs在鸡源神经系统标志蛋白/抗体研究领域拥有独特优势，不仅品种多样，质量优良，而且适用于人/大小鼠等多个物种的神经系统研究，包括神经元/胶质细胞/雪旺细胞的各亚细胞结构免疫双标/免疫共沉淀研究。公司独有的技术及优质抗体产品有助于全球科研人员更为便捷的解决学术研究及应用研发课题。除了丰富的产品线外，AvesLabs还为客户提供优质的抗体定制服务，您只需要提供需要研究的重组蛋白或合成多肽，我们即可为您生产优质的鸡源多克隆抗体。
神经元标志蛋白抗体该系列产品主要用于神经元细胞的各亚细胞结构研究，可与现有的小鼠/兔抗体进行免疫双标，反应性包括人、小鼠等多个哺乳类动物。在保证抗体特异性的前提下，部分产品可分为抗不同的氨基酸片段。该系列产品包括抗APP3/APP345/APP4/APP5/ABN/TUJ/CAT/DCX/ER1/ER2/ER3/ER5/GAD/GAP43/MAP/NET/NUN/NSE/NFH/NFL/NFM/PER/PRN/PAP/STG/TAU/TYH的抗体。除单独的抗体提供，我们还可同时提供1/3种任意抗体组合及相应二抗的试剂盒，以更优惠的价格及便捷性以满足研究人员的不同需要。
胶质细胞及雪旺细胞标志蛋白抗体该系列产品主要用于胶质细胞及雪旺细胞的各亚细胞结构的研究，可与可与现有的小鼠/兔抗体进行免疫双标，反应性包括人、大鼠等多个哺乳类动物。在保证抗体特异性的前提下，部分产品可分为抗不同的氨基酸片段。该系列产品包括抗COR/GFAP/MAC/MBP/NES/PZO/PLP/VIM抗体。同样，除单独的抗体提供，我们还可同时提供1/3种任意抗体组合及相应二抗的试剂盒，以更优惠的价格及便捷性以满足研究人员的不同需要。
二抗该系列产品特点在于鸡IgY分子与哺乳动物IgG分子截然不同，因此由之制备的二抗不与来源于兔、小鼠或其他哺乳动物的一抗产生交叉反应，特别适用于组织学的免疫双标检测。该系列源于羊的二抗可交联荧光基团/HRP/生物素/琼脂糖，可广泛用于WB，免疫组化/免疫细胞化学及免疫共沉淀研究。
mmunoprecipitationReagents(IP)该系列产品中 HA-PrecipHen® 由鸡anti-HAepitopetag抗体共价结合到琼脂糖粒而成，适用于利用HAepitope-tagged蛋白的immunoprecipitation(IP),chromatinimmunoprecipitation(ChIP)以及蛋白纯化研究。而IgY-PrecipHen®由羊抗鸡的IgY抗体共价结合到琼脂糖粒上而成，适用于鸡源抗体与目标蛋白之间的immunoprecipitation(IP),chromatinimmunoprecipitation(ChIP)以及蛋白纯化研究。
对高度保守的哺乳动物基因产物有更高的描述由于鸡与哺乳动物的距离至少有1亿年之久，它们倾向于将哺乳动物的任何基因产物视为外来物，并产生强烈的免疫反应。简单双疣状鸡IgYs可以与小鼠和兔抗体一起使用，没有交叉反应的危险。针对鸡igy的二级抗体不会与哺乳动物igg发生交叉反应。友好型我们从鸡蛋中纯化抗体，而不是血清。与此相反，在兔实验中，通过抑制动物，进行耳出血或心脏穿刺来获得血清。这只是一种更人道的产生抗体的方法。成本效益和更持久的我们的鸡用抗体是>90%IgY，在4度完美呈现5年以上保质期。相比之下，多数公司提供的rabbitserum(兔乳)在4˚C (完美呈现)(以周至月为单位)的货架期非常有限，而且一旦冷冻，一些生物活性会丧失。将兔抗体纯化至相应纯度的成本。蛋白质a纯化)是非常昂贵的。几乎无限量我们从每只母鸡那里收集了大约18个“免疫鸡蛋”，但是只使用了6个“免疫鸡蛋”来准备你的IgY准备。然后我们把剩下的12个“免疫鸡蛋”储存在冰箱里，以备将来你需要更多的抗体。此外，我们可以继续为母鸡提供住宿(另收费)，以备您需要我们进行额外的注射。鸡IgY的茎部没有“Fc结构域”这提供了几个优势比兔igg:它减少了在诊断应用中出现假阳性的可能性，因为是哺乳动物的Fc域结合“类风湿因子”或其他自然产生的抗Fc抗体。不激活哺乳动物补体系统，允许鸡IgYs在体内应用。不与哺乳动物Fc受体结合，避免与表达此类受体的细胞(如巨噬细胞和树突状细胞)发生非特异性结合。
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1取组织
（1） 灌注固定：暴露心脏,将注射针头插入左心室,剪开右心耳,快速灌注PBS,待右心耳处流出澄清液体,换4%多聚甲醛灌注到大鼠四肢强直为止,快速取脑和肾。
（2） 固定：将组织置于4%多聚甲醛中固定15小时
（3） 脱水：将组织放入30% 蔗糖溶液中直至下沉
（4） 切片：脑组织冰冻切片20微米，37度烘干2h以上；
（5）将切片放置－80度保存，随用随取。
2免疫单标记
（1）做抗原修复（0.4g柠檬酸、3g柠檬酸钠、1000ml水配制成溶液，放到水浴箱中90~94℃保存15min）,冷却后， 用1*PBS反复洗标本10min，吸去PBS，同时向标本加渗透液（配0.4%trition液，然后将BSA加入到配好的trition液中，配成1％浓度）100ul，常温下湿盒反应1h。
（2） 吸去渗透液，同时向标本加block液（5％封闭用正常山羊血清）100ul，常温下湿盒反应5h。
（3） 吸去block液，同时向标本加入1：50稀释的羊抗鼠一抗100ul，37度湿盒反应过夜。
（4）吸去一抗，并回收，用1*PBS洗液反复洗15min。
（5）快速从冰箱中取出驴抗羊的二抗，并立即用锡纸包裹，注入到一个新的以锡纸包裹的tube管中并用PBS以1：200稀释。
（6）进入暗室，吸去PBS，同时加入二抗100ul，37度湿盒反应2h,封片。
（7）放置到荧光显微镜下观察。
其次，察看次目的蛋白的存在形式，有没有多聚体形式及变构形式；
最后，查看多家抗体公司的DATA，看看别人的WB做出来的条带的位置。
根据你说的，特异识别多个组织中的同样大小的条带，我觉得很可能就是你的目的蛋白。
不过多克隆抗体因为有多个结合位点，事实上的特异性并不如单克隆抗体，所以一般Western blot都尽量要求使用单克隆抗体。以保证实验结果准确可靠
1.单克隆抗体的优点：
（1）杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断的生产高特异性、高均一性的抗体.
（2）可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体.
（3）由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等.
（4）由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗.
2.单克隆抗体的局限性：
(1）单克隆抗体固定的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围.由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反应,所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成.
(2)单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体.
(3）制备技术复杂,而且费时费工,所以单克隆抗体的价格也较高.
制备抗体都需要进行纯化处理
清冷冻干燥后保存。
