ORDERINGINFORMATION
CatalogNo.:43007
Format:100ulat1.0mg/mlinPBS(withoutMg2+andCa2+),pH7.4,150mMNaCl,0.02%sodiumazideand50%glycerol.Affinity-purifiedonphosphopeptide;non-phosphopeptide-reactiveantibodieswereremovedbychromatographyonnon-phosphorylatedpeptide.
BACKGROUND
GSK3actsasamultifunctionaldownstreamswitchthatdeterminestheoutputofnumeroussignalingpathways.TherearetwomammalianGSK-3isoformsencodedbydistinctgenes,GSK3alphaandGSK3beta,whicharestructurallysimilar,butfunctionallynon-identical.GSK3αisinhibitedbyphosphorylationatS21byAktandotherkinases.DysregulatedGSK3hasbeenimplicatedinseveraldiseasesincludingtypeIIdiabetes,Alzheimersdisease,andcancer.
SPECIFICATIONSUMMARY
Antigen:Peptidesequencethatincludesphosphorylationsiteofserine21(T-S-S(p)-F-A)derivedfromhumanGSK3αandconjugatedtoKLH.
Accessionno.:P49840,NP_063937.2
HostSpecies:Rabbit
Specificity:Thisantibodydetectsendogenoushuman,mouse,andratGSK3αonlywhenphosphorylatedatserine21anddoesnotdetectGSK3βphosphorylatedatSer9.
APPLICATIONS
Westernblotting:useatdilutionof1:500-1:1,000.Abandof~51kDaisdetected.
Immunohistochemistry:useatdilutionof1:50-1:100.
DetectionofGSK3α(Phospho-Ser21)in293cellextractsuntreatedortreatedwithserum.
Thesearerecommendedworkingdilutions.Endusershoulddetermineoptimaldilutionsfortheirapplications.
DetectionofGSK3α(phospho-Ser21)inparaffin-embeddedhumanbreastcarcinomatissue.
DILUTIONINSTRUCTIONS
DiluteinPBSormediumthatisidenticaltothatusedintheassaysystem.
STORAGEANDSTABILITY
Thisantibodyisstableforatleastone(1)yearat-20oC.Canbestoredat4oCforshort-term.
Forinvitroinvestigationaluseonly.Notintendedfortherapeuticordiagnosticapplications.
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阴性对照(Isotype Control):非特异荧光的强弱取决于抗体浓度、单克隆荧光抗体特异性和纯度,应与试验管抗体相对应。在多色分析时,同型对照应与其它抗体同时使用,以避免补偿造成的误差
血小板体外活化试验:使用正常人活化标本作为阳性质控;使用正常人未活化标本作为阴性质控
血小板自身抗体检测:使用含有已知血小板抗体的血清与血小板孵育,作为阳性质控;使用不含血小板抗体的血清与血小板孵育,作为阴性质控
血小板表面抗原缺失:如巨血小板症血小板表面CD42a/CD42b缺失,血小板无力症血小板表面gpIIb/IIIa,即CD41/CD61缺失或异常。使用正常人标本做阳性对照,抗体的同型对照做阴性对照
二抗
抗体组合
免疫组化
免疫沉淀
ELISA
ELISPOT
流式
同型对照
酪胺信号放大
免疫对照/血清/阻断/封闭
Western Blot免疫印迹
免疫缓冲剂/固定/透化
细胞/组织裂解物
细胞核裂解物
细胞裂解物
组织抽提物
转染细胞裂解物
CBA蛋白定量
链霉亲和素
抗体纯化
选用和特异性抗体同种亚型的,同样荧光素标记的抗体,采用同样的染色步骤染同样浓度的细胞。然后上机检测。如果细胞有非特异性的结合,那同型对照的荧光强度可能会比未染色的阴性对照要高一些。
同型对照只用于那种阳性和阴性之间没有明确分解的情况。如果阳性细胞群非常清楚,是不需要同型对照的。另外,在多色同染的情况下,也不采用同型对照,而是采用FMO(fluorensence minus one)对照。
另外,对于同型对照的使用,也有很多反对意见。就算是同型抗体,也可能会有不同的亲和力,并不一定就能真实反应非特异性的结合。
请问:同型对照应该怎么设?
不买专门的IgG2Bisotypecontrol,而用其他的抗体,
比如mouseanti-humanCD117,Igclass也是IgG2B,可以吗?
英 ['aɪsətaɪp]美 ['aɪsəˌtaɪp]
n. 同型动物(或植物),图形文字,象征性图像;同位型;同模;同号模式

