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제품특징
□ 제품설명
Taq DNA polymerase (TaKaRa Taq, TaKaRa Ex Taq,TaKaRa LA Taq, SpeedSTAR HS 등)은 합성 산물의 3"말단에dA를 부가하는 성질을 가지고 있어, 이러한 효소를 이용해 증폭된 PCR산물은 TA cloning에 이용할 수 있다. 본 제품은 PCR산물의 간편한 클로닝을 위해서 설계된 벡터로, EcoR V사이트로 절단된 각3"말단에dT가 부가되어 있어, Taq DNA polymerase계열의 효소로 증폭된 PCR산물과 직접 ligation할 수 있다. 또, T-Vector pMD20은 MCS site 상류에SP6 promoter 서열을 가지고 있어, SP6 RNA polymerase를 이용해 클로닝 유전자에 상보적인 single strand RNA의 합성도 가능하다.T-Vector pMD19 (Simple)는 pUC19을 기본으로 설계되어 있지만, pUC19 MCS site가 모두 제거되어 있어 클로닝 후 PCR산물상의 제한 효소 사이트를 이용하는 경우에 유용하다.
□ 품질 검정
본 제품과 control insert를 DNA Ligation Kit Ver. 2.1로 ligation 한 후 E. coli JM109 Competent Cells에 형질 전환했을 경우,> 1×105 cfu/㎍의 콜로니를 얻을 수 있고 그 중 90%이상이 백색 콜로니였고, 백색 콜로니의 90%이상이 목적 insert를 포함하고 있는 것을 colony PCR로 확인하였다.
□ 내용
T-Vector pMD20 또는 T-Vector pMD19 (Simple) (50 ng/μl) | 20 μl |
Control Insert(50 ng/μl)*1 | 10 μl |
*1 3" 말단에dA overhang을 가지는 약500 bp의DNA fragment
□ 보존 -20℃
□ pMD20 vector, pMD19 (Simple) vector의 구조
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你用BSA封闭没什么意思,可以换一种,比如明胶,酪蛋白等。
将HRP标记BSA稀释成一定的梯度。
(2)6 X His tag 序列:CAT CAT CAC CAT CAC CAT
(3)GST标签序列:
1ATGTCCCCTATACTAGGTTATTGGAAAATTAAGGGCCTTGTGC
301 AACCCACTCGACTTCTTTTGGAATATCTTGAAGAAAAATATGAAGAGCAT
351 TTGTATGAGCGCGATGAAGGTGATAAATGGCGAAACAAAAAGTTTGAATT
401 GGGTTTGGAGTTTCCCAATCTTCCTTATTATATTGATGGTGATGTTAAAT
451 TAACACAGTCTATGGCCATCATACGTTATATAGCTGACAAGCACAACATG
501 TTGGGTGGTTGTCCAAAAGAGCGTGCAGAGATTTCAATGCTTGAAGGAGC
551 GGTTTTGGATATTAGATACGGTGTTTCGAGAATTGCATATAGTAAAGACT
601 TTGAAACTCTCAAAGTTGATTTTCTTAGCAAGCTACCTGAAATGCTGAAA
651 ATGTTCGAAGATCGTTTATGTCATAAAACATATTTAAATGGTGATCATGT
701 AACCCATCCTGACTTCATGTTGTATGACGCTCTTGATGTTGTTTTATACA
751 TGGACCCAATGTGCCTGGATGCGTTCCCAAAATTAGTTTGTTTTAAAAAA
801 CGTATTGAAGCTATCCCACAAATTGATAAGTACTTGAAATCCAGCAAGTA
851 TATAGCATGGCCTTTGCAGGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTGGTGGCGACC
901 ATCCTCCAAAATCGGATCTGGTTCCGCGTGGATCCCCGGAATTCCCGGGT
951 CGACTCGAGCGGCCGCATCGTGACTGA
百度上的,,,,,搬运
Flag标签系统是已被公认的用于表达、纯化以及检测融合蛋白的表达系统,广泛应用于Westernblotting、免疫细胞组化、免疫共沉淀、流式细胞术、蛋白纯化以及蛋白相互作用、蛋白分离等多个研究领域。Flag标签是一个与重组蛋白相融合的由8个亲水氨基酸(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)组成的多肽片断。FLAG标签只有8个氨基酸组成,因此它不会占据其他表位与结合域,避免导致融合蛋白的功能、分泌性以及转运发生改变。由于它的亲水性特点,FLAG标签倾向于定位在融合蛋白表面,因此更易与抗体结合以及被肠激酶酶解。
由于Flag标签可位于蛋白质的C端或N端,这一系统已用于各种细胞类型,包括细菌、酵母和哺乳细胞。由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。EarthOx的Anti-FlagTagMonoclonalAntibody可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测Flag融合表达蛋白等。比如在免疫荧光IF的实验里,同时配合EarthOx的Dylight549荧光二抗,使用该抗体可以准确的定位出Flag融合表达蛋白在细胞内的位置(如图红色显示部分)。另外,做融合表达分析前,通过免疫共沉淀技术获得Flag融合表达蛋白也是非常重要的一步,因此选择一个合适的、可用于免疫共沉淀(Immunoprecipitation,IP)Flag标签抗体也是很必要的。EarthOx的Anti-FlagTagMonoclonalAntibody不仅能应用于细胞内定位的IF实验,同样还能应用于IP实验。1:200甚至更高的IP实验稀释比率,也说明了该抗体本身的具有很高的效价,同时,因为是单克隆抗体,因此特异性也很高。高效价所对应的高稀释比率也意味着超高性价比。
抗体指机体的免疫系统在抗原刺激下,由B淋巴细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白.
载体,你说的是那种载体?生命科学载体有2种,一种是分布于膜上的载体蛋白,和物质运输有关.另一种是基因工程里面的携带外源DNA的一段DNA片段,例如质粒、噬菌体和动植物病毒.
所以,抗体全部是蛋白质,载体部分是蛋白质.

