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Ursabioscience/Protein A Purified Anti-Native GFP Polyclonal Antibody - 1 mg
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  • wangyi671 1328799060
    应用pCMV-Myc携带目的蛋白做转染后,进行单克隆筛选,得到单克隆后扩增,做WB。应用Myc   显示更多
    应用pCMV-Myc携带目的蛋白做转染后,进行单克隆筛选,得到单克隆后扩增,做WB。应用Myc标签抗体,标出的条带分子量是否应该和我的目的条带分子量一致呢??   收起
  • 杜哥4Pp 1628186402
    免疫组化是化学显色不是发光
    免疫荧光是通过抗体上标记的荧光基团发光
  • 条件:Western10%分离胶,蛋白抗体1:500,FlagMouse1:1000,目的蛋白N端带Flag标签。
    求助...   显示更多
    条件:Western10%分离胶,蛋白抗体1:500,FlagMouse1:1000,目的蛋白N端带Flag标签。
    求助:为什么用蛋白抗体仅出来一条带,而用Flag抗体则出来两条带?
    谢谢大家啊
    图一:蛋白抗体

    图二Flag抗体
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  • 本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。如何根据蛋白的活性部位选择相应的抗体进行免疫荧光实验?
    Flag标签系统是已被公认的用于表达、纯化以及检测融合蛋白的表达系统,广泛应用于Westernblotting、免疫细胞组化、免疫共沉淀、流式细胞术、蛋白纯化以及蛋白相互作用、蛋白分离...   显示更多
    本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。如何根据蛋白的活性部位选择相应的抗体进行免疫荧光实验?
    Flag标签系统是已被公认的用于表达、纯化以及检测融合蛋白的表达系统,广泛应用于Westernblotting、免疫细胞组化、免疫共沉淀、流式细胞术、蛋白纯化以及蛋白相互作用、蛋白分离等多个研究领域。Flag标签是一个与重组蛋白相融合的由8个亲水氨基酸(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)组成的多肽片断。FLAG标签只有8个氨基酸组成,因此它不会占据其他表位与结合域,避免导致融合蛋白的功能、分泌性以及转运发生改变。由于它的亲水性特点,FLAG标签倾向于定位在融合蛋白表面,因此更易与抗体结合以及被肠激酶酶解。
    由于Flag标签可位于蛋白质的C端或N端,这一系统已用于各种细胞类型,包括细菌、酵母和哺乳细胞。由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。EarthOx的Anti-FlagTagMonoclonalAntibody可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测Flag融合表达蛋白等。比如在免疫荧光IF的实验里,同时配合EarthOx的Dylight549荧光二抗,使用该抗体可以准确的定位出Flag融合表达蛋白在细胞内的位置(如图红色显示部分)。另外,做融合表达分析前,通过免疫共沉淀技术获得Flag融合表达蛋白也是非常重要的一步,因此选择一个合适的、可用于免疫共沉淀(Immunoprecipitation,IP)Flag标签抗体也是很必要的。EarthOx的Anti-FlagTagMonoclonalAntibody不仅能应用于细胞内定位的IF实验,同样还能应用于IP实验。1:200甚至更高的IP实验稀释比率,也说明了该抗体本身的具有很高的效价,同时,因为是单克隆抗体,因此特异性也很高。高效价所对应的高稀释比率也意味着超高性价比。   收起
  • 口袋护林员61 1627322405
    (一)辣根过氧化物酶标抗体制备技术编辑本段辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)广泛分布于植物中,因辣根中含量最高而得名,由无色酶蛋白和深棕色铁卟啉(辅基)构成一种糖蛋白(含糖18%)。
    此酶溶于水和50%饱和度以下的硫酸铵溶液。
  • c-myc是一个比较大的蛋白。而标签抗体一般采用一个典型的氨基酸片段免疫动物后获得的抗体。
    义翘神州的标签抗体(myc)采用的免疫原是A synthetic Myc tag peptide conjugated to KLH 。参看下图的验证结果。
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    c-myc是一个比较大的蛋白。而标签抗体一般采用一个典型的氨基酸片段免疫动物后获得的抗体。
    义翘神州的标签抗体(myc)采用的免疫原是A synthetic Myc tag peptide conjugated to KLH 。参看下图的验证结果。
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  • 蜜兜 1628100001
    楼主新手,最近在做一个蛋白的抗体,表达了目的蛋白的GST融合蛋白送去免疫兔子,现在收到了返回的抗体,想用His标签的融合蛋白对...   显示更多
    楼主新手,最近在做一个蛋白的抗体,表达了目的蛋白的GST融合蛋白送去免疫兔子,现在收到了返回的抗体,想用His标签的融合蛋白对抗体进行纯化,我只知道Ni柱纯化His标签蛋白的方法,最终是要用咪唑洗下融合蛋白,但是现在想把His标签与Ni柱之间的结合固定,从而纯化洗脱抗体,但是不知道His标签与Ni柱固定的的方法...!!!老板发飙了,小女子**大神指点啊55555   收起
  • 用目的蛋白的单抗就能检测到,请问你是怎么解决这个问题的呢?
  • 想做个蛋白的定位,可是没有好抗体,就想做个转基因小鼠,在基因后面加一个标签。但是之前没有相关经验,不知道哪一种tag更好...   显示更多

    想做个蛋白的定位,可是没有好抗体,就想做个转基因小鼠,在基因后面加一个标签。但是之前没有相关经验,不知道哪一种tag更好呢,更适合在小鼠里表达呢?因为我蛋白比较小,加GFP那么大的话可能会影响表达。比较小的tag例如HA,Flag还有His等,不知道哪个更适合一些?求大神们给些经验。

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  • jerrywang74 1628445603

    小弟我最近在做Western,目的蛋白是一个加了6×His和Flag标签的融合蛋白,不过...   显示更多

    小弟我最近在做Western,目的蛋白是一个加了6×His和Flag标签的融合蛋白,不过实验室还存有Anti-His抗体(并不是Anti-6×His抗体),就拿这个抗体跑了WB,但是内参什么的都很好,目的条带出不来,不知道是不是与一抗有关。

    另外质粒转染细胞应该也没问题,设的阳性对照pGFP转染的荧光量很高(转染效率在90%左右),所以理论上讲蛋白表达和提取没有问题。

    在这里先谢过!

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  • 我用慢病毒过表达一个目的蛋白,分子量为37~38kd,病毒载体带了flag标签,我用flag   显示更多

    我用慢病毒过表达一个目的蛋白,分子量为37~38kd,病毒载体带了flag标签,我用flag抗体应该检测多少分子量范围?是37~38还是说明书里72kd左右?我的flag标签抗体说明书如下:

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