一抗，二抗如何选择？

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一抗，二抗如何选择？

2018-01-18

问题描述：

假如我猪的一个抗病基因，克隆后转入鸡的成纤维细胞中表达，请问用Westernblot检测的时候，用什么为一抗，什么为二抗？是怎么选择的呢？假如我再换个鼠的细胞，抗体是不是应该变了呢？

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robinlocean

用户

虽然是鸡的细胞，但根据中心法则知道，蛋白质的序列信息来自于基因，而你要看的这个基因是猪的序列，所以蛋白质也是猪的序列，因此要使用抗猪的一抗，譬如鼠抗猪，或兔抗猪等等，而二抗则要根据一抗进行选择，一抗用了鼠抗，那么尔康就要用抗鼠的，譬如羊抗鼠；一抗用了兔抗，二抗就要用抗兔的，譬如羊抗兔，而二抗一般都有商品化的试剂，都是IgG，结合的是一抗的Fc段，在购买时必须看清楚是secondary antibody. 你明白了么？

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