ProductDescription
Vitronectinisa478aminoacidprotein(1-19aa=signaldomain)thatbelongstoamemberofthepexinfamily.Vitronectinisanabundantglycoproteinfoundinserumandtheextracellularmatrix.ItpromotescelladhesionandspreADIng,inhibitsthemembrane-damagingeffectoftheterminalcytolyticcomplementpathway,andbindstoseveralserpinserineproteaseinhibitors.Itisasecretedproteinandexistsineitherasinglechainformoraclipped,twochainformheldtogetherbyadisulfidebond.Vitronectinhasbeenspeculatedtobeinvolvedinhemostasisandtumormalignancy.
RecentpublicationsindicatedthatcoatedrecombinanthumanvitronectinproteinalonebenefitsiPScellgenerationwhencombinedwithE8culturemedium.Theproducthasalsobeenshowntobeanexcellentcoatingmatrixmaterialfor11R-taggedrecombinantTFintracellulardeliveryforproteinderivediPSprotocolwithextremelylowlevelsofnon-specificinteraction.RecombinanthumanVitronectingene(20-398aaFragment)wasconstructedwithcodonoptimizationandexpressedinnon-fusionproteinforminE.coliasinclusionbodies.Thefinalproductwasrefoldedusingaunique“temperatureshiftinclusionbodyrefolding”technologyandchromatographicallypurified.
Vitronectinisidealforcoatingofsurfaces.Theoptimalconcentrationforcellattachmentandculturemaydifferforvariouscelltypes.Vitronectinhasbeenusedatafinalcoatingconcentrationaslowas50ng/cm2onplasticware.Further,coatingthisrecombinantproteinat5–10µg/well(6wellplateineitherNutriStemorE8mediumcanbeusedforhumaniPScellgenerationinvitro.Itisprovidedinuser-friendlypackagingforuseandstorage.Vitronectinissterilefilteredandissuppliedasareadytousesolutionafterthawingandconcentrationadjustment.
| Parameter,Testing,andMethod | RecombinantVitronectin#5121 |
| Quantity | 0.5mg |
| Volume | 1mL |
| Concentration | 0.5mg/mL |
| Purity-SDSPAGEElectrophoresis | >90% |
| Formulation | 20mMpH8Tris-HCLbufferwithproprietaryformulationofNaCl,KCl,EDTA,Arginine,DTTandGlycerol |
| Form | Solution |
| Source | Recombinant-E.Coli |
| StorageTemperature | -20°Cor-70°Cforlongtermstorage |
| ShelfLife | Minimumof6monthsfromdateofreceipt |
| SterilizationMethod | Filtration |
| CellAttachmentAssay | Passes |
| AccessionNumber | NP_000692 |
DirectionsforUse
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CoatingProcedure:
Usetheserecommendationsasguidelinestodeterminetheoptimalcoatingconditionsforyourculturesystem.
- ThawVitronectinanddilutetodesiredconcentrationusingserum-freemediumorPBS.Thefinalsolutionshouldbesufficientlydilutesothatthevolumeaddedcoversthesurfaceevenly.
- Addappropriateamountofdilutedmaterialtoculturesurface.
- Incubateatroomtemperaturefor1-2hours.
- Aspirateremainingmaterial.
- RinseplatescarefullywithdH2O–avoidscratchingbottomsurfaceofplates.
- Platesarereadyforuse.Theymayalsobestoredat2-8°Cdamporairdriedifsterilityismaintained.
ProductApplications
CoatingrecombinanthumanVTNproteinforESoriPScellculturecanbeeasilyperformedasfollowing:
1.Add1mlPBSbuffertoasinglewellof6wellplate,andmixwellwith10ugrecombinantVTN(20ulsolution,0.5mg/mlofVTNstockingsolution).
2.Placecultureplateat4°Cforovernight.
3.PlatesarereadyforroutineESculture.(RemovecoatingPBSbufferbeforecellculture).
ProductReferences
VitronectinReferences:
Wiley,LukeA.,etal."Usingpatient-specificinducedpluripotentstemcellsandwild-typemicetodevelopageneaugmentation-basedstrategytotreatCLN3-associatedretinaldegeneration."Humangenetherapy27.10(2016):835-846.
Wiley,LukeA.,etal."Generationofxeno‐free,cGMP‐compliantpatient‐specificiPSCsfromskinbiopsy."CurrentprotocolsinstemcellBIOLOGy42.1(2017):4A-12.
Dwyer,SheilaFigel,LingqiuGao,andIrwinH.Gelman."Identificationofnovelfocaladhesionkinasesubstrates:RoleforFAKinNFκBsignaling."Internationaljournalofbiologicalsciences11.4(2015):404.
Wiley,LukeA.,etal."cGMPproductionofpatient-specificiPSCsandphotoreceptorprecursorcellstotreatretinaldegenerativeblindness."Scientificreports6(2016):30742.
Kittur,Harsha,etal."ProbingCellAdhesionProfileswithaMicroscaleAdhesiveChoiceAssay."Biophysicaljournal113.8(2017):1858-1867.
Dwyer,SheilaFigel,andIrwinH.Gelman."Cross-phosphorylationandinteractionbetweenSrc/FAKandMAPKAP5/PRAKinearlyfocaladhesionscontrolscellmotility."Journalofcancerbiology&research2.1(2014).
Worthington,KristanS.,etal."Two-photonpolymerizationforproductionofhumaniPSC-derivedretinalcellgrafts."ActaBiomaterialia55(2017):385-395.
ProductCertificateofAnalysis
SafetyandDocumentation
SafetyDataSheet
CertificateofOrigin
ProductDisclaimer
ThisproductisforR&Duseonlyandisnotintendedforhumanorotheruses.PleaseconsulttheMaterialSafetyDataSheetforinformationregardinghazardsandsafehandlingpractices.
美国AdvancedBioMatrix（简称ABM） www.advancedbiomatrix.comAdvancedBioMatrix（简称ABM）是美国一家著名的生物公司，获得了AllerganInc的授权(Allergan用25年时间不断完善胶原蛋白相关的产品的生产工艺)，将Allergan的专业和技术用于蛋白生产与检测，致力于为组织工程、细胞分析及细胞增殖等研究领域提供优质稳定的产品。AdvancedBioMatrix不断丰富已有产品线，目前可为三维细胞培养提供各种胶原蛋白、纤连蛋白、玻连蛋白、水性凝胶、不同粘度与分子量的透明质酸以及低代成纤维细胞等。在美国全部产品授权Sigma销售。AdvancedBioMatrix是组织培养，细胞分析和细胞增殖三维（3D）应用的生命科学领域的领导者。我们的产品被公认为纯度，功能性和一致性的标准。我们在生产，分离，纯化，冷冻干燥，细胞培养和蛋白质测试，粘附肽，附着因子，底物刚性和其他3D矩阵产品方面拥有丰富的专业知识。我们的专业技术和知识正在被用来确保我们的产品质量最高，批次之间一致且易于为我们的研究客户使用。
美国AdvancedBioMatrix是3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者。AdvancedBioMatrix在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3Dmatrix 产品开发方面有着丰富的经验。AdvancedBioMatrix的研发经验和专业知识确保其产品可达到最佳质量，并保证产品之间一致性，方便研究客户使用。以下为AdvancedBioMatrix3DMatrices 产品竞争优势：1. 提供高纯度和成分确定的胞外基质；2. 超过1000余篇文献引用PureCol产品，品质非常均一；3. 在3D培养基领域可提供最全面的产品线；4. 唯一可提供特异性刚性有机硅基板的公司（CytoSoft）;5. 唯一可提供可溶性丝纤蛋白的供应商（可运用于多种3D培养）；6. 如果客户首次接触3D胶原凝胶，AdvancedBioMatrix还是唯一的预制胶原蛋白(PureColEZGel)供应商；
以下产品为AdvancedBioMatrix全球畅销品：1.PureCol 牛源I型胶原蛋白 3mg/ml#5005-100ML2.Nutragen牛源I型胶原蛋白 6mg/ml#5010-50ML3.FibriCol 牛源I型胶原蛋白 10mg/ml#5133-20ML4.VitroCol 人源I型胶原蛋白 #5007-20ML5. 弹性蛋白原 #5052-1MG6.ECMSelectArraykitUltra-36#5170-1EA7.CytoSoft（刚性可变的基底，AdvancedBioMatrix最新添加产品5190-7EA）8. 人III型胶原蛋白 #5021-10MG9. 人IV型胶原蛋白 #5022-5MG10.SilkFibroin溶液 #5154-20ML11.Fibronectin#5080-5MG12.Vitronectin#5051-0.1MG
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1. 金开瑞的与传统的蛋白表达系统相比，省略了耗时耗力的质粒转化、细胞培养、收集、破碎和离心等, 极大地提高了工作效率；
2. 反应体系小，能同时平行合成多种不同的蛋白质；
3. 反应周期短，能满足高通量配体筛选和蛋白质组学的科研要求；
4. 开放的反应体系，便于改变各项反应条件，有利于调控基因的转录，蛋白质的合成和翻译后修饰，避免包涵体的形成；
5. 稳定的反应体系，可以偶联其它工艺，形成自动化、程序化、规模化生产，加快重组蛋白的纯化、功能表征和后续的结构解析；
6. 无细胞结构限制，可用于生产对宿主有毒害作用的外源蛋白，避免蛋白表达对宿主细胞的致死作用；
7. 添加非天然氨基酸或同位素标记氨基酸，表达特殊蛋白。
8.对于多次跨膜或由于疏水性强导致的普通细胞系表达困难的项目有显著改善。
人类医学发展到今天,对某些疑难疾病还是不能彻底根治,如遗传疾病，器官坏死，和糖尿病等。这些疾病仅靠药物治疗只能减缓症状，而器官移植又受捐赠器官有限和免疫排斥等因素的限制而不能推广。干细胞是唯一有可能攻克这些疾病的治疗手段。但长期以来，获取多能干细胞(pluripotentstemcell)的主要来源为人的胚胎。这引起道德和宗教的争议，进而在美国等国家受到法律限制。另外，用异己的胚胎干细胞发展的治疗手段将来还是会遇到免疫排斥的问题。
2006年，日本科学家ShinyaYamanaka领导的实验室第一次证明，通过以反转录病毒为载体转基因表达四个转录因子，可以将小鼠或人的体细胞转变为与胚胎干细胞拥有相似分化和繁殖能力的细胞，命名为诱导性干细胞（iPS）。这一成果具有划时代的意义：1）干细胞的产生可以不再需要破坏胚胎，避免了道德，宗教和法律上的限制；2）不同疾病的诱导性干细胞可衍生出不同类型的疾病模型，为基础研究和药物筛选提供了强大的武器；3）理论上，各种疑难疾病可以通过病人自己的体细胞转变为干细胞，再分化为各种类型的细胞，组织，甚至器官，经过或不经过体外加工后，放回病人体内，治愈疾病。
在本论文中，研究人员成功地用四个转录因子的蛋白完成了由体细胞到诱导性干细胞的转变过程。自始至终，细胞的遗传信息没有受到任何影响。蛋白诱导性干细胞的重大意义包括：1）安全性：转化过程没有使用病毒，没有使用基因，没有任何改变细胞遗传信息的风险；2）普及性：蛋白诱导方法远比基因诱导方法简单易行。这样一来，iPS技术不再被几个资深实验室所垄断。大部分实验室都可以重复蛋白方法而获得iPS。也就是说，蛋白诱导方法大大降低了iPS领域的"门坎"。3）可行性：由于该方法的简单易行，重复性强，它可以被扩大化，产业化，进而被商业化。蛋白诱导干细胞方法将大大降低利用干细胞对病人"量身定做"的治疗手段的成本，使得这一商业模式成为可能。
如果说，ShinyaYamanaka博士的成果第一次使人类看到了一个梦想，那么这篇论文的发表标志着我们从梦想向现实跨出了关键的一大步。
CellStemCell,23April2009doi:10.1016/j.stem.2009.04.005
GenerationofInducedPluripotentStemCellsUsingRecombinantProteins
HongyanZhou1,ShiliWu4,7,JinYoungJoo5,7,SaiyongZhu1,DongWookHan5,TongxiangLin1,SuniaTrauger2,3,GeofferyBien4,SusanYao4,YongZhu4,GarySiuzdak2,3,HansR.Sch?ler5,LingxunDuan6andShengDing1,,
1DepartmentofChemistry,TheScrippsResearchInstitute,10550NorthTorreyPinesRoad,LaJolla,CA92037,USA
2DepartmentofMolecularBIOLOGy,TheScrippsResearchInstitute,10550NorthTorreyPinesRoad,LaJolla,CA92037,USA
3CenterforMassSpectrometry,TheScrippsResearchInstitute,10550NorthTorreyPinesRoad,LaJolla,CA92037,USA
4ProteomTech,Inc.,3505CADIllacAvenue,SuiteF7,CostaMesa,CA92626,USA
5DepartmentofCellandDevelopmentalBiology,MaxPlanckInstituteforMolecularBiomedicine,R?ntgenstrasse20,Münster48149,Germany
6LD***aInc.,SandownWay,SanDiego,CA92130,USA
7Theseauthorscontributedequallytothiswork
Groundbreakingworkdemonstratedthatectopicexpressionoffourtranscriptionfactors,Oct4,Klf4,Sox2,andc-Myc,couldreprogrammurinesomaticcellstoinducedpluripotentstemcells(iPSCs)(TakahashiandYamanaka,2006),andhumaniPSCsweresubsequentlygeneratedusingsimilargeneticmanipulation(Takahashietal.,2007,Yuetal.,2007).Toaddressthesafetyissuesarosefromharboringintegratedexogenoussequencesinthetargetcellgenome,anumberofmodifiedgeneticmethodshavebeendevelopedandproducediPSCswithpotentiallyreducedrisks(fordiscussion,seeYamanaka,2009,andreferencestherein).However,allofthemethodsdevelopedtodatestillinvolvetheuseofgeneticmaterialsandthusthepotentialforunexpectedgeneticmodificationsbytheexogenoussequencesinthetargetcells.Herewereportgenerationofprotein-inducedpluripotentstemcells(piPSCs)frommurineembryonicfibroblastsusingrecombinantcell-penetratingreprogrammingproteins.WedemonstratedthatsuchpiPSCscanlong-termself-renewandarepluripotentinvitroandinvivo.
提供亲和纯化相关资料：http://wenku.baidu.com/view/ef8f3831f8c75fbfc67db276
如有帮助，请采纳，谢谢~
国内或者国外进口皆可！？看来你不缺钱啊！
这个问题问的过于笼统！
首先，蛋白表达与纯化包括很多种类型，比如原核蛋白表达，哺乳动物蛋白表达，酵母蛋白表达以及昆虫蛋白表达等等，而现在生物实验中常说的蛋白表达纯化通常是指利用大肠杆菌表达系统的原核蛋白表达，这种表达方式比较简单，普遍都可以做。但是如果是指很多种蛋白表达系统的话，可以做的单位就比较少了。
另外，蛋白的表达成功与否还需要取决于蛋白的性质，所以前期一定要问清楚！
基因重组只是控制同一性状表达不同而已，但是它不会改变性状的基本情况。如：控制眼睛颜色的基因，亲本的基因重组之后可能亲本为黑色，子代便为蓝色。但绝对不会控制眼睛颜色的基因在重组之后就变成控制耳朵的基因。
