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肝脏蛋白质代谢程起重要作用血浆内主要蛋白质几乎全部由肝脏制造肝脏合蛋白质主要白蛋白部球蛋白由肝脏产肝脏尚能合酶蛋白凝血纤维蛋白质凝血酶原、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ 等血清蛋白测定主要包括总蛋白、白蛋白、球蛋白白／球比值其值：总蛋白 60－80/L、白蛋白35－5og／L、球蛋白25－40g/L、白/球比值1.5－2.5白蛋白减少白/球比值降低甚至颠倒肝硬化特征代偿良肝硬化患者即使已现明显增高（球蛋白血症）白蛋白减少往往属轻度肝硬化患者已届失代偿期白蛋白即明显减少测定血清总蛋白及白蛋白浓度作判定慢性肝病患者预良指标肝硬化病总蛋白低于60g/L白蛋白低于30g/L提示预欠佳

我想做关于血清铁蛋白的电泳，首先要分离和纯化铁蛋白。请各位老师和学长指点。

2005年，17173创办人蔡宗建与他在网龙时的同事池元等人联合创办了IGG。
2006年，由蔡宗建（董事长）和池元（首席执行官），于福建福州（总部）成立“福州天盟数码有限公司”。
2009年，于新加坡成立“IGG Singapore Pte. Ltd.”（前身为“Skyunion Pte. Ltd.”）。
IGG主要专注于海外运营，截至2011年，IGG将20多款国产端游及页游推向海外市场，在全球拥有2000多万注册用户。鉴于在海外市场取得的良好成绩，IGG相继开发了《百年战争》、《泰坦战争》，准备凭借这两款产品进军国内市场。但国内的玩家对这两款网游并不买账，在国内表现不佳，几乎让蔡宗建赔光了老本，2011年底，IGG连员工的年终奖都没有发。由于这次惨痛的失败，蔡宗建不得不放弃国内市场。
2012年，IGG与facebook合作，推出了《Galaxy Online2》（星际文明2）。
2013年IGG投入了移动游戏市场，截至到2013年已经推出了9款手机游戏，截至2013年5月31日，IGG手机游戏日活跃用户的平均收益为0.08美元，平均日活跃用户为31.7万人。
2013年10月18日，蔡宗建带领下的IGG在港交所成功上市，公司市值达40.2亿港元。向左转|向右转

文章原文链接http://www.jbc.org/content/282/23/16776.long

有多大，会不会引起基因突变，甚是惶恐，求解答

保存方法如下：
　　1.以沉淀形式保存在高浓度的硫酸铵中。
　　2.添加50%甘油冷冻，尤其适用于酶类。
　　3.如果样品要用于生物学检测，避免使用防腐剂。在体内实验中不能添加防腐剂，而应当将样品分装成小份冷冻。
　　4.可使用无菌滤器以延长保存时间。
　　5.添加稳定剂，如甘油（5-20%）、血清白蛋白（10mg/ml）、配基（浓度取决于活性蛋白的浓度）以帮助维持生物活性。
　　6.避免反复冻融或冻干重溶解过程，这样很可能会降低生物活性。
　　7.一些冷沉淀蛋白会在4度沉淀出来，包括一些小鼠IgG3亚族的抗体，不能保存在4度冰箱中，可添加防腐剂保存在室温中。

用SDS裂解，RNA酶降解，在过柱，后洗脱

提取DNA时裂解液的配制方法应该是怎样的
用SDS裂解，RNA酶降解，
在过柱，后洗脱

抗体纯化分了几种类型，根据用途决定选择哪种方法进行纯化：
1. 粗纯：将制备抗体的血清或是腹水，细胞上清，直接用盐析法进行处理，这样可以将这些物质里面的其他杂质去掉，获得蛋白的成分，但是由于是粗纯，里面会混有大量的其他蛋白，这样获得的抗体，纯度较低，用于实验中背景比较高。
2.通用型纯化：用抗体结合蛋白Protein A，Protein G或者Protein L。因为不同来源的抗体和这些抗体结合蛋白的结合能力不同，所以需要根据抗体来源选择使用哪种抗体将诶和蛋白最好。对于有一些单链抗体，则多半使用protein L来进行纯化。经过抗体结合蛋白的亲和纯化后，溶液中基本只保留了抗体的成分，其他蛋白都去掉了，抗体纯度可以比较高。相对来说，这种方法是大规模抗体制备中，用得最多的纯化方法，很多抗体公司都采用这种方法来对抗体进行纯化。
3.特异型纯化：但是有些抗体，需要纯度特别高，特异性特别好，就不能简单采用上述两种方法进行纯化了。必须要通过将抗原固定制备成特异的亲和纯化柱，再纯化抗体。这个时候得到的就全是针对一种抗原的抗体了，特异性最好。当然，由于牵涉到抗原固定等操作，成本相应是最高的。

人血清白蛋白是由585个氨基酸组成的单链蛋白质，分子量为67kDa。成熟的人血清白蛋白是一个心形分子，由3个结构相似的α-螺旋结构域组成。向左转|向右转

各位大侠:俺在提取细胞总蛋白时，蛋白质提取出像果冻一样的东西，俺的步骤如下:
1细胞用冷PBS洗两遍，离心，去除上清；
2加50～100ul三去污细胞裂解液；
3加PMSF，AP各1ul;
4用100ulTIp头吹打数次；
5置冰上15分钟
612000rpm,15min,4度
7取上清。这时，上清呈黏液状，用枪头吸时会将细胞碎片一起吸出。拉丝度很长，测蛋白浓度显示有，各位，这是怎么回事？做WB会影响结果吗？这种蛋白质在保存过程中会容易降解吗?
有的资料上显示第四步，不是用Tip头吹打，而是将EP管在桌上猛敲击几下，这个方法我也试过，但是结果蛋白浓度很低，没有出现上述现象，这是怎么回事呀?

【目的要求】1.掌握α1-AT分离纯化各步骤原理、操作及鉴定方法2.掌握基本技术操作及仪器使用3.熟悉人血清蛋白质的分类方法,α1-AT性质4.了解生物大分子制备技术,分离纯化类型5.学会利用学过的分离纯化方法进行基本的科研设计6.练习研究论文基本写作

【教学内容一】分段盐析法，凝胶过滤法(盐析法概念及原理，分段盐析概念，分子筛效应，柱层析基本技术)

【实验原理】1.盐析法是一种利用蛋白质在高盐溶液中溶解度不同而分离的方法。通过将硫酸铵加入蛋白质溶液中，使蛋白质表面电荷被中和，水化膜被破坏，导致蛋白质在水溶液中的稳定性因素去除而沉淀。2.通过分段改变盐类浓度达到分离目的的方法叫分段盐析法。3.凝胶过滤又称分子筛层析。混合物随流动相流经装有凝胶作为固定相的层析柱时，分子量大的物质因不能进入凝胶网孔而沿凝胶颗粒间的空隙先被洗脱(阻力小,流程短,流速大),分子量小的物质因能进入凝胶网孔而受阻滞,流速缓慢,流程长而后被洗脱,由于流速不同可以把大小不同的分子分开.

【仪器与试剂】1.离心机2.真空泵3.饱和硫酸铵溶液：称取767g固体硫酸铵，加入1000ml水中，加热使之溶解，室温冷却后4℃静置过夜，然后用氨水将pH调至中性。4.固体(NH4)2SO45.SephadexG—256.奈氏试剂7.双缩脲试剂8.pH7.4,0.05MPBS

【步骤】

一分段盐析

1.观看人血清抗胰蛋白酶(α1-AT)的分离及鉴定教学录像2.每组量取20ml血清，倒入一干净烧杯中，缓慢加入饱和硫酸铵20ml，边加边搅拌,放入4℃冰箱30分钟3.从冰箱中取出烧杯，将血清倒入离心管，3000rpm，离心20分钟4.将上清倒入一干净量筒中，记录体积后，倒入干净烧杯中，按17.6g/100ml量取固体硫酸铵，缓慢加入上清中，边加边搅拌。4℃冰箱放置30分钟5.将烧杯中液体倒入抽滤器中，负压抽滤6.刮下滤纸上的粗提蛋白，用4ml缓冲液溶解，准备加样

二凝胶过滤层析

1.凝胶柱准备：(1)连接层析柱(2)夹住出口，加入1/3体积的0.05MpH6.4PBS，灌胶，待凝胶自然沉降约1cm时，打开出口，控制流速，60滴/分(3)层析柱填装完成后，连接下口瓶，调节流速，使入口和出口流速相同。平衡至入口pH值与出口pH值相同(即pH试纸呈色相同)，关闭出口，等待加样2.加样：用吸管吸去胶面以上的缓冲液，立即加入蛋白粗提液(沿管壁缓慢加入)3.打开出口，调流速15滴/分，待蛋白粗提液完全进入胶面，用少量缓冲液清洗管壁。连接下口瓶4.检测：用双缩脲试剂检测洗脱液。待试剂变红，开始收集，直到试剂不变色停止收集。测量并记录收集液的体积，留取1ml样品(标记为G—25样品)，放入一冷冻管中冰箱冻存;剩余的液体收集入一大试管中，作好标记，下次实验用5.洗去铵盐：全速洗脱，用奈氏试剂检测洗脱液，直到橙色消失为止，回收凝胶

【注意事项】1.盐析所用器皿一定要干燥2.盐析时，应将饱和硫酸铵或固体硫酸铵加入到血清中，且边加边搅拌3.层析柱上方要留有少量液体，避免使凝胶暴露于空气中4.凝胶过滤上样时，使样品沿管壁缓缓流下，勿冲破胶面

（信息提供：探生网生物医药）