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CellGenix/CellGenix® rh FGF-2/1 mg/1021-1000
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CellGenix/CellGenix® rh FGF-2/1 mg/1021-1000
品牌 / 
CellGenix
货号 / 
1021-1000
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Technical Details

Source
Expressed in E. coli
Description

Human FGF-2, accession # P090938, Ala135-Ser288

Formulation

Lyophilized from a 0.2 µm-filtered solution containing 25 mM sodium phosphate, 400 mM sodium chloride, 10 mM glutathione (red.) and 5% mannitol, pH 6.5

Both product grades are produced under the same conditions in a GMP facility, ensuring an equal product quality and performance. We offer a more comprehensive QC testing including tighter specifications and documentation for our GMP products: Preclinical vs GMP.

 PreclinicalGMP
Molecular weight17.3 kDa17.3 kDa
Purity≥ 95 % as determined by SDS-PAGE≥ 97 % as determined by SDS-PAGE and RP-HPLC
Activity≥ 0.9 x 106 IU/mg, calibrated against NIBSC #90/712 Measured in a cell proliferation assay using a FGF-2-dependent cell line, FBHE0.9 – 3 x 106 IU/mg, calibrated against NIBSC #90/712 Measured in a cell proliferation assay using a FGF-2-dependent cell line, FBHE

Batch specific activity on CoA

Endotoxin level< 1000 EU/mg≤ 50 EU/mg
Intended useIntended for preclinical ex vivo use. Not intended for therapeutic use.Intended for clinical ex vivo use. Not intended for human in vivo application.

Handling Instructions

Reconstitution

Recommended in sterile water to a final concentration of 250 µg/ml for 50 µg vials or 500 µg/ml for 1 mg vials.

Shipment

Ambient temperature. Please refer to Technote to learn more about our shipment validation procedure.

Expiry

≥ 6 months from date of shipping. Please refer to Certificate of Analysis for the exact expiry date.

Storage & Stability

Store lyophilized cytokine at -20°C to -80°C.

Store a 250 µg/ml reconstituted cytokine solution:

• 4 months at -20°C to -80°C under sterile conditions after reconstitution. Store in 60 µl aliquots in polypropylene cryogenic vials.

Avoid repeated freeze/thaw cycles.

Documents

  • Data Sheet: GMP or Preclinical
  • Material Safety Data Sheet: MSDS
  • Certificate of Analysis
  • Technote: ADCF and Serum-free Policy
  • Technote: Batch-to-Batch Consistency of CellGenix® GMP Cytokines
  • Technote: Stability of CellGenix® GMP Cytokines after Reconstitution
  • Technote: Shipment of CellGenix® Preclinical and GMP Cytokines at Ambient Temperatures
  • Technote: CellGenix® rh Cytokines - Preclinical vs GMP
  • More information under Resources

Data

CellGenix GMP rh FGF-2 has an activity of 0.9 – 3.6 × 106 IU/mg

The activity of GMP rh FGF-2 was measured in a cell proliferation assay using the FGF-2-dependent cell line FBHE. It was calibrated against NIBSC #90/712.

You can find the batch specific activity on the certificate of analysis (CoA).

Regulatory Support

We offer the following to assist you with your regulatory approval process:

  • Comprehensive documentation (e.g. DMFs, Regulatory Support Files, Certificates of Origin)
  • Outstanding QC support (e.g. extensive stability data)
  • The possibility to audit our production site
  • Detailed batch specific test results on our Certificates of Analysis
  • Change notifications prior to relevant changes

Customized solutions can be provided to meet special compliance needs. Contact our Regulatory Support Team for all your regulatory requests & questions:

Phone:     +49 761 88 88 9-302 Email:      regulatorysupport@cellgenix.com

In order to stay up-to-date and help improve regulatory guidance we are actively involved in many of the regulatory initiatives and discussions. We were amongst others actively involved in the discussions for the setup of Ph. Eur. General Chapter 5.2.12 and the ISO Technical Standard 20399.

Regulatory Resources

  • TSE certificate (available on request)
  • Regulatory Support File (available on request)
  • Request a DMF Letter of Authorization (USA only)

Publications

  • Phase 1-2 pilot clinical trial in patients with decompensated liver cirrhosis treated with bone marrow-derived endothelial progenitor cellsD`Avola, D. et al., 2016, Translational Research
  • Intramyocardial transplantation of mesenchymal stromal cells for chronic myocardial ischemia and impaired left ventricular function: Results of the MESAMI 1 pilot trialGuijarro D. et al., 2016, International Journal of Cardiology
  • Autologous chondrocyte implantation in children and adolescentsSchmal, H. et al., 2012, Knee Surgery, Sports Traumatology, Arthroscopy
  • In vitro cell quality of articular chondrocytes assigned for autologous implantation in dependence of specific patient characteristicsPestka, JM. et al., 2011, Archives of Orthopaedic and Trauma Surgery
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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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商品咨询
细胞裂解液的主要目的:1.利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞;2. 溶解蛋白;3. 蛋白变性使其稳定;4. 抑制蛋白酶活性 推荐RIPA buffer:
. 50 mM Tris-HCl pH 7.4 缓冲体系 · 150 mM NaCl 等渗体系
· 1 mM PMSF 强大的蛋白酶抑制剂 · 1 mM EDTA 变性剂和稳定剂
· 5 µg/ml Aprotinin 蛋白酶抑制剂 · 5 µg/ml Leupeptin 蛋白酶抑制剂 · 1% Triton x-100 破坏细胞
·1% Sodium deoxycholate 中度变性剂和蛋白溶解剂 ·0.1% SDS 强变性剂和蛋白溶解剂
组织裂解液和细胞裂解液如何配制
http://wenku.baidu.com/link?url=wSb7SK6U6DwRWnh4oq2PWLhYpcVp1BZQA42ybzcNGDB0xXR1HJCmuREp-ikc--tOmNYvKu-vRHAHjFz_D0eB3IZ_uEYz1AAU9X4BkluWIZW
有多大,会不会引起基因突变,甚是惶恐,求解答
蛋白提取时使用蛋白裂解液将细胞裂解,然后离心分为上清液和下层沉淀,如果你说的是这个上清液的话,那么这个上清液是细胞中的可溶性蛋白,一般包括细胞质的蛋白和细胞核的可溶性蛋白,下层沉淀主要是细胞碎片以及不可溶的蛋白以及染色质之类的。
裂解细胞用的溶液;适合目的蛋白的溶液,例如PBS,tris盐溶液
磷酸酶活性测定123
greenfish19742021-08-02
我是新手,请问如何检测的活性。请各位大侠指导,谢了
我的邮箱:maoyuanqing@citiz.net
可以用温和的红细胞裂解液,和外周血一样,裂解液不会对单个核细胞有影响,HY StemCell是一家为干细胞研究服务的知名公司,有各种生化试剂供客户选择,可以查询各大品牌红细胞裂解液,供参考
DNA提取加细胞裂解液的量是固定的吗?有的书上说加50μl,有的加500μl,不知为什么,请指教!谢谢!
裂解方法包括化学裂解、酶裂解和机械裂解.化学裂解和酶裂解通常是比较温和的方法,通常会很少使DNA 断裂.这两种方法(包括SDS 和溶菌酶处理等)提取纯化DNA中常用的方法.机械裂解可以更均一的裂解细胞,同化学裂解相比,机械处理具有更高的裂解效率和更低的选择性.机械处理可以更剧烈和全面的裂解细胞,但也会造成DNA 的断裂.
一、机械裂解法主要有以下两中:
1.热休克(Thermal shock),既反复冻溶法,是一种常用的机械裂解方式比,通常由冷冻和解冻两部分组成(freezing and thawing),.原理:由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎.冷冻通常在液氮或-20°C冰上进行,解冻可以在37、50、65 或100℃水浴中进热休克比化学裂解温和,但是很有效,有资料表明用热休克和溶菌酶与SDS的方法获得了90%的细胞裂解率.
2.超声波处理(Ultrasonication)既利用超声加热的方法,把细胞破碎.但这种处理会导致DNA 的断裂,所以加热不宜过剧烈,要设定好超声时间和间隙时间,一般超声时间不超过5秒,间隙时间最好大于超声时间,这些都有利于保护酶的活性.bead-beating 也是常用的机械处理方式,有报道指出bead-beating 比热休克和化学裂解的细胞裂解效果更好 虽然DNA产量较高,但通常得到的DNA片段较小.
二、 化学裂解和酶裂解法(在提核酸时联合使用)
主要是裂解液处理法,细胞裂解液的主要目的有以下几种:(1)利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞;(2)溶解蛋白;(3)蛋白变性使其稳定;(4)抑制蛋白酶活性.
主要根据不同的目的,裂解液的组成有所不同,主要有提取核酸和蛋白两中.在提取RNA或DNA时,我们主要是要充分裂解细胞,得到更多的核酸;如果我们的目的是蛋白,那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液,在提取蛋白后,再根据实验需要复性蛋白等.以下是细胞裂解中常用试剂和其作用:
50 mM Tris-HCl pH 7.4(缓冲体系),150 mM NaCl(等渗体系),1 mM PMSF (强大的蛋白酶抑制剂),1 mM EDTA(变性剂和稳定剂),5 μg/ml Aprotinin(蛋白酶抑制剂),5 μg/ml Leupeptin(蛋白酶抑制剂),1% Triton x-100(破坏细胞),1% Sodium deoxycholate(中度变性剂和蛋白溶解剂),0.1% SDS(强变性剂和蛋白溶解剂).7M 尿素,2M硫脲(可以提高膜蛋白的融解),蛋白酶K等.
一、细胞凋亡检测系统和试剂
Caspase-GloTM3/7检测
Apo-ONETM均质Caspase-3/7检测
CaspACETMFITC-VAD-FMK原位标准物
CaspACETM检测系统,比色法
CaspACETM检测系统,荧光法
末端脱氧核苷酸转移酶
DeadEndTM比色法TUNEL系统
DeadEndTM荧光法TUNEL系统
DeathCheckTM检测系统
Caspase抑制物Z-VAD-FMK
Caspase抑制物Ac-DEVD-CHO

二、与细胞凋亡有关的抗体
抗pS473Akt抗体
抗ACTIVE®Caspase-3抗体
抗细胞色素C单克隆抗体
抗PARPp85片段抗体
从细胞中提取RNA的方法123
陌语哲俀2021-07-22
操作步骤:
样品处理:
a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀。
b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
c. 贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。
d. 细胞悬液:离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。
e. 血液处理:取0.2-1ml新鲜血液加3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10分钟,10000rpm离心1分钟。弃上清,若沉淀含有红细胞,可加入2倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。离心后沉淀加入1 ml裂解液混匀。
将处理后的样品在室温放置5分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。
向匀浆样品中加0.2ml氯仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置3-5分钟。
2-8℃ 12000 rpm离心10分钟。RNA主要在上层无色的水相中,把水相转移到新管中,不要吸到沉淀。
吸附柱前处理:在吸附柱中加入500ul 洗柱液,室温放置2分钟,2-8℃ 12,000 rpm离心2min,弃废液。6. 第4步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀,加入吸附柱静置2分钟,2-8℃ 12000rpm离心2min,弃废液。7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),2-8℃ 12,000 rpm离心2min,弃废液。8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8℃ 12,000 rpm离心2min,弃废液。9. 12000rpm离心2min,弃掉收集管,将吸附柱置于室温放置数分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除。10. 将吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O,室温放置5min,12000rpm室温离心2min即得到RNA。

注意事项:
所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品,操作过程要小心,带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。
RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA不纯,需电泳检测。
细胞总蛋白提取方法123
coollanlan2021-08-04
最近将长满的100毫升的细胞培养瓶的细胞进行总蛋白的提取,每次只加了100微升的三去污溶液,最后测的溶度还是比较低,5微升里最多只有十几微克的总蛋白。不知道大家的经验是什么?如何提高细胞总蛋白的浓度?