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请教，天然菌种发酵的蛋白和重组技术发酵的蛋白在质量检测指标上有何区别？谢谢！

我想做个目的蛋白的单抗，通过基因克隆、表达、纯化来得到目的蛋白，但是因为用的是原核表达系统，缺少翻译后的正常修饰，所以肯定与天然蛋白有区别，这样的话，作出来的单抗就不一定能够识别组织中的天然蛋白了，有什么方法可以减少他们的差异？也就是尽量让单抗可以识别天然蛋白。谢谢！

如题，最好有详解

氨基酸

我现在在纯化天然蛋白时第一步层析使用的是苯基的疏水层析柱，样品和缓冲液的硫酸铵浓度为0.5M，PH在5.6左右，发现蛋白能结合到柱子上，但是在洗脱时采用梯度洗脱洗不下来，最后用水洗也洗不下来，后来我用少量的0.15M的氢氧化钠洗出一高峰，请问，这是因为我的蛋白结合的太牢吗？该怎样解决呢？
再就是疏水层析和PH值有这么大的关系吗？
谢谢！

本人目前需从电鳗放电器官中提取乙酰胆碱受体蛋白，提纯需要的步骤和电鳗器官都可以提供，有没有提供外包提纯服务的公司或者实验室。

天然蛋白质中不存在的氨基酸是。。。鸟氨酸羟脯氨酸瓜氨酸哪个啊？好象不同版本答案不一样啊

人体能产生20种
算上其他生物24种
大概是记不太清了

小弟用E.coli表达的一蛋白(一天然毒素的N段)制备了11株单抗,但没有一株能中和天然蛋白,这可急死我了.再拖下去就不能毕业了.导师天天催我建立诊断方法呢.大家给我出出主意!

http://www.medicalnewstoday.com/medicalnews.php?newsid=58498

NaturalProteinStopsDeadlyHumanBrainCancerInMice


ScientistsfromJohnsHopkinsandfromtheUniversityofMilanhaveeffectivelyproventhattheycaninhibitlethalhumanbraincancersinmiceusingaproteinthatselectivelyinducespositivechangesintheactivityofcellsthatbehavelikecancerstemcells.ThereportispublishedinNature.

Themostcommontypeofbraincancer-glioblastoma-ismarkedbythepresenceofthesestem-cell-likebraincells,which,insteadoftriggeringthereplacementofdamagedcells,formcancertissue.Stemcells,unlikeallothercellsinthebody,arecapableofformingalmostanykindofcellwhentheright"signals"triggertheirdevelopment.

Fortheirtreatmentexperiment,theresearchersreliedonaclassofproteins,bonemorphogenicproteins,thatcauseneuralstem-cell-likeclusterstolosetheirstemcellproperties,whichinturnstopstheirABIlitytodivide.

Firsttheypretreatedhumanglioblastomacellswithbonemorphogenicprotein4(BMP4),theninjectedthesetreatedcellsintomousebrains.Inmiceinjectedwithcellsthatwerenotpretreated,large,invasivecancersgrew.InthemicewithBMP4-treatedcells,nocancersgrewatall.Threetofourmonthsafterinjection,allmicethatgotuntreatedcellsdied,andnearlyallmicewithBMP4-treatedcellswerealive.

Next,thescientistsdeliveredslow-releaseBMP4-containing"beads"directlyintomousebrainswithimplantedglioblastomacells.Micethatgotemptybeadsdevelopedlargemalignanttumorsanddied.MicewithBMP4beadssurvivedmuchlonger,and80percentsurvivedfourmonthsaftercancercellimplants.

"OurideaistotreatpatientswithBMP4orsomethinglikeitrightaftersurgerytoremoveglioblastomainhopesofpreventingtheregrowthofthecancerandimprovingsurvivaltime,"saysAlessandroOlivi,M.D.,directoroftheDivisionofNeurosurgicalOncologyatHopkinsandacontributortothestudy.

OlivisaysclinicalstudiesusingBMP4couldbeginwithinayearand,ifsuccessful,drugtherapiescouldbeavailabletothepublicwithinthreetofouryears.

"ThiswasproofoftheideathatBMPscouldstopglioblastomabydepletingthestem-cell-likepopulationthatfeedsit,"saysHenryBrem,M.D.,chairmanoftheDepartmentofNeurosurgeryatHopkinsandacollaboratorinthestudy."Thisopensexcitingdoorstofutureresearchintotreatmentsandtherapiesforsuchadevastatingdisease."

常见的都是天然蛋白质，人工合成的蛋白质也是要遵从自然界的规律的，元素不是说添加就添加的，人工合成的蛋白质也离不开天然蛋白质的这些组成元素。蛋白质主要是由C（碳）、H（氢）、O（氧）、N（氮）组成，一般蛋白质可能还会含有P、S、Fe（铁）、Zn（锌）、Cu（铜）、B（硼）、Mn(锰)、I（碘）、Mo（钼）等 。

最近要用原核系统表达几条基因的成熟蛋白，N末端没有Met，而且最好能够表达出可溶的有活性的蛋白。
我本想用pET带有信号肽的载体表达到周质空间，但发现在信号肽切除的位置克隆进去我的基因的话还是会引入多余的氨基酸。
请教各位有经验的高手，哪些载体或者方法我可以尝试去做？
多谢了！