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我是研一的新手，导师昨天说要分给我一个比较难的课题，蛋白质分离纯化。我们实验室主要是做微生物生物化学与分子生物学方面的，没有专门搞蛋白分离纯化的，应该是天然蛋白的分离纯化。天然蛋白质的分离纯化比较难，主要指什么方面比较难呢？仅仅蛋白质分离纯化是不是也不够作一篇硕士论文的工作量呢，是不是也应该有后续的工作或者前期的工作呢？蛋白质分离纯化方面的课题对未来就业有何帮助？谢谢大家！十分感激！

见蛋白质的含量(每100克食物)如下：大米7克、面粉9克、黄豆36克、绿豆24克、豆腐7．4克、白菜2克、茄子2．3克、苹果0．4克、花生27克、猪肉9．5克、牛肉20克、人乳1．5克、牛乳3．3克、鸡蛋15克、鲤鱼17克、对虾21克。虽然人乳、牛乳、鸡蛋中的蛋白质含量较低，但它们所含的必需氨基酸量基本上与人体相符，所以营养价值较高，是膳食中最好的食品。

人体能产生20种
算上其他生物24种
大概是记不太清了

如题，最好有详解

我想做个目的蛋白的单抗，通过基因克隆、表达、纯化来得到目的蛋白，但是因为用的是原核表达系统，缺少翻译后的正常修饰，所以肯定与天然蛋白有区别，这样的话，作出来的单抗就不一定能够识别组织中的天然蛋白了，有什么方法可以减少他们的差异？也就是尽量让单抗可以识别天然蛋白。谢谢！

快速回答，谢谢

我将目的基因插入到pPIC9K中的EcoRI和NotI位点上，分泌表达得到的蛋白经信号肽切除后，在N端是不是还要比天然蛋白多8个氨基酸呀？请大家指点，谢谢。

我现在在纯化天然蛋白时第一步层析使用的是苯基的疏水层析柱，样品和缓冲液的硫酸铵浓度为0.5M，PH在5.6左右，发现蛋白能结合到柱子上，但是在洗脱时采用梯度洗脱洗不下来，最后用水洗也洗不下来，后来我用少量的0.15M的氢氧化钠洗出一高峰，请问，这是因为我的蛋白结合的太牢吗？该怎样解决呢？
再就是疏水层析和PH值有这么大的关系吗？
谢谢！

本人目前需从电鳗放电器官中提取乙酰胆碱受体蛋白，提纯需要的步骤和电鳗器官都可以提供，有没有提供外包提纯服务的公司或者实验室。

http://www.medicalnewstoday.com/medicalnews.php?newsid=58498

NaturalProteinStopsDeadlyHumanBrainCancerInMice


ScientistsfromJohnsHopkinsandfromtheUniversityofMilanhaveeffectivelyproventhattheycaninhibitlethalhumanbraincancersinmiceusingaproteinthatselectivelyinducespositivechangesintheactivityofcellsthatbehavelikecancerstemcells.ThereportispublishedinNature.

Themostcommontypeofbraincancer-glioblastoma-ismarkedbythepresenceofthesestem-cell-likebraincells,which,insteadoftriggeringthereplacementofdamagedcells,formcancertissue.Stemcells,unlikeallothercellsinthebody,arecapableofformingalmostanykindofcellwhentheright"signals"triggertheirdevelopment.

Fortheirtreatmentexperiment,theresearchersreliedonaclassofproteins,bonemorphogenicproteins,thatcauseneuralstem-cell-likeclusterstolosetheirstemcellproperties,whichinturnstopstheirABIlitytodivide.

Firsttheypretreatedhumanglioblastomacellswithbonemorphogenicprotein4(BMP4),theninjectedthesetreatedcellsintomousebrains.Inmiceinjectedwithcellsthatwerenotpretreated,large,invasivecancersgrew.InthemicewithBMP4-treatedcells,nocancersgrewatall.Threetofourmonthsafterinjection,allmicethatgotuntreatedcellsdied,andnearlyallmicewithBMP4-treatedcellswerealive.

Next,thescientistsdeliveredslow-releaseBMP4-containing"beads"directlyintomousebrainswithimplantedglioblastomacells.Micethatgotemptybeadsdevelopedlargemalignanttumorsanddied.MicewithBMP4beadssurvivedmuchlonger,and80percentsurvivedfourmonthsaftercancercellimplants.

"OurideaistotreatpatientswithBMP4orsomethinglikeitrightaftersurgerytoremoveglioblastomainhopesofpreventingtheregrowthofthecancerandimprovingsurvivaltime,"saysAlessandroOlivi,M.D.,directoroftheDivisionofNeurosurgicalOncologyatHopkinsandacontributortothestudy.

OlivisaysclinicalstudiesusingBMP4couldbeginwithinayearand,ifsuccessful,drugtherapiescouldbeavailabletothepublicwithinthreetofouryears.

"ThiswasproofoftheideathatBMPscouldstopglioblastomabydepletingthestem-cell-likepopulationthatfeedsit,"saysHenryBrem,M.D.,chairmanoftheDepartmentofNeurosurgeryatHopkinsandacollaboratorinthestudy."Thisopensexcitingdoorstofutureresearchintotreatmentsandtherapiesforsuchadevastatingdisease."

如题，最近做天然蛋白WB，可是效果老不理想

所以请教一下高手

常见的都是天然蛋白质，人工合成的蛋白质也是要遵从自然界的规律的，元素不是说添加就添加的，人工合成的蛋白质也离不开天然蛋白质的这些组成元素。蛋白质主要是由C（碳）、H（氢）、O（氧）、N（氮）组成，一般蛋白质可能还会含有P、S、Fe（铁）、Zn（锌）、Cu（铜）、B（硼）、Mn(锰)、I（碘）、Mo（钼）等 。