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Agrisera/H+ATPase | Plasma membrane H+ATPase (100 µl)/AS07 260-100/
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Agrisera/H+ATPase | Plasma membrane H+ATPase (100 µl)/AS07 260-100/
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Agrisera
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AS07260-100
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ThePlasmaMembraneH+ATPaseisafamilyofproteinsofca.100kDathatarebelievedtobeexclusivetotheplasmamembranesofplantsandfungi.TheproteinisanchoredwithinBIOLOGicalmembranewhichcreatesanelectRochemicalgrADIentusedasanenergysourceandisessentialforuptakeofmostmetabolitesandplantresponsestoenvironment,forexamplemovementofleaves.

Immunogen

KLH-conjugatedsyntheticpeptideexposedtocytoplasminH+ATPasemodel,derivedfromavailablediandmonocot,fern,mossesandalgalplasmamembraneATPasesequencesincludingArABIdopsisthalianaATPase1(UniProt:P20649,TAIR:At2g18960)andATPase2(UniProt: P19456,TAIR:At4g30190),3(UniProt:P20431,TAIR:At5g57350),4(UniProt: Q9SU58,TAIR:At3g47950),6(UniProt: Q9SH76,TAIR:At2g07560),7(UniProt: Q9LY32,TAIR:At3g60330),8(UniProt: Q9M2A0,TAIR:At3g42640),9(UniProt: Q42556,TAIR:At1g80660),11(UniProt:Q9LV11,TAIR:At5g62670)ofArabidopsisthalianaandhydrogenATPaseofChlamydomonasreinhardtii(Q9FNS3)

HostRabbit
ClonalityPolyclonal
Clone
PuritySerum
FormatLyophilized
Quantity2x50µl
ReconstitutionForreconstitutionadd50µlofsterilewatertoeachtube
Storage

storelyophilized/reconstitutedat-20°C;oncereconstitutedmakealiquotstoavoidrepeatedfreeze-thawcycles.Please,remembertospintubesbrieflypriortoopeningthemtoavoidanylossesthatmightoccurfromlyophilizedmaterialadheringtothecaporsidesofthetubes.Donotstorethisantibodyin4°C.

Testedapplicationswesternblot(WB),immunofluorescence(IF),immunolocalization(IL)
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antibodiestomembranetransportsystem

recommendedsecondaryantibody

Additionalinformation

cellular[compartmentMarker]forplasmamembrane

applicationinformation
Recommendeddilution

1:1000-1:5000withstandardECLOR1:10000withECL-Advance,enhancedchemiluminescence(WB),1:600-1:1000(IF),1:100(IL)

Expected|apparentMW

95kDa(Arabidopsisthaliana)

Confirmedreactivitydicotsincluding:Arabidopsisthaliana,Cucumissativus,Cucurbitamoschata,Glycinemax(weak),Kandeliaobovata,Loliumperenne,Lycopersiconesculentum,Marchantiapolymorpha,Medicagotruntata,Nicotianatabacum,Noccaeacaerulescens,PhalenopsisSogoYukidiancultivarV3,Ricinuscommunis,Spinaciaoleracea,monocotsinlcuding:Hordeumvulgare,Oryzasativa,Zeamays,trees:Piceaabies,Populustremula,Pterisvittata(fern),algae:Chlamydmonasreinhardtii
Predictedreactivity

dicotsincluding:Mesembruanthemumcrystallinum,Solanumtuberosum;monocots(includingAvenasativa,Hordeumvulgare,conifers(Pinusthunbergii),mosses(Physocomitrellapatens),algae(Dunaliellaspp.,Ostreococcusspp.),Saccharomycescerevisiae

Notreactivein

Aspergillusniger

Additionalinformation

foradditionalWesternblotdetectionimagepleaserefertothearticlebelow.

VERYIMPORTANT:please,donotheatupyoursamplesover70°CasthismightcauseH+ATPasetoprecipitateandtherewillbenosignalonyourwesternblot.

SelectedreferencesLietal.(2015).ThreeSAURproteinsSAUR76,SAUR77andSAUR78promoteplantgrowthinArabidopsis.SciRep.2015Jul24;5:12477.doi:10.1038/srep12477.
Kolbetal.(2015).FYVE1isessentialforvacuolebiogenesisandintracellulartraffickinginArabidopsisthaliana.PlantPhysiol.2015Feb19.pii:pp.114.253377.
Huetal.(2015).Re-examinationofchlorophyllasefunctionimpliesitsinvolvementindefenseagainstchewingherbivores.PlantPhysiol.2015Jan12.pii:pp.114.252023.
Komatsuetal.(2014).PhototropinEncodedbyaSingle-CopyGeneMediatesChloroplastPhotorelocationMovementsintheLiverwortMarchantiapolymorphaL.1.PlantPhysiol.2014Sep;166(1):411-27.doi:10.1104/pp.114.245100.Epub2014Aug5.
Berthieretal.(2014).Identificationofanewsucrosetransporterinrye-grass(LpSUT2):Effectofdefoliationandputativefructosesensing.PlantPhysiol&Biochem,vol:84,Nov.2014.(immunolocalization,leafsheath)
Migockaetal.(2014).MolecularandbiochemicalpropertiesoftwoP1B2-ATPases,CsHMA3andCsHMA4,fromcucumber.PlantCellEnviron.2014Sep11.doi:10.1111/pce.12447.
Shenetal.(2014).ThefrondstonoplastquantitativeproteomicanalysisinarsenichyperaccumulatorPterisvittataL.JProteomics.2014Feb4.pii:S1874-3919(14)00047-5.doi:10.1016/j.jprot.2014.01.029.
Zhangetal.(2014).ArabidopsisABCG14proteincontrolstheacropetaltranslocationofroot-synthesizedcytokinins.NatCommun.2014Feb11;5:3274.doi:10.1038/ncomms4274.
Sobrino-Plataetal.(2014).Glutathioneisakeyantioxidantmetabolitetocopewithmercuryandcadmiumstress.PlantSoil,DOI10.1007/s11104-013-2006-4.

applicationexample

western blot using plant anti-H+ATPase antibodies

20µgoftotalproteinfromArabidopsisthaliana(1),Hordeumvulgare(2),Zeamays(3),Nicotianatabaccumplasmamembranefraction,2.5µg(4),extractedwithProteinExtrationBuffer,PEB(AS08300),wereboiledfor10min.in70°Candseparatedon4-12%NuPage(Invitrogen)LDS-PAGEandblotted1htoPVDF.Blotswereblockedimmediatelyfollowingtransferin2%ECLAdvanceblockingreagent(GEHealthcare)in20mMTris,137mMsodiumchloridepH7.6with0.1%(v/v)Tween-20(TBS-T)for1hatroomtemperaturewithagitation.Blotswereincubatedintheprimaryantibodyatadilutionof1:5000for1hatroomtemperaturewithagitation.Theantibodysolutionwasdecantedandtheblotwasrinsedbrieflytwice,thenwashedoncefor15minand3timesfor5mininTBS-Tatroomtemperaturewithagitation.Blotswereincubatedinsecondaryantibody(anti-rabbitIgGhorseradishperoxidaseconjugated,recommendedsecondaryantibodyAS09602)dilutedto1:20000in2%ECLAdvanceblockingsolutionfor1hatroomtemperaturewithagitation.Theblotswerewashedasaboveanddevelopedfor5minwithECLAdvancedetectionreagentaccordingthemanufacturersinstructions.ImagesoftheblotswereobtainedusingaCCDimager(FluorSMax,Bio-Rad)andQuantityOnesoftware(Bio-Rad).Exposuretimewas2min.

immunolocalization

immunolocalization using anti-H+ATPase polyclonal antibodies

PlasmamembraneH+ATPaselocalizationinArabidopsisthalianaroots.
Arabidopsisthaliana,elongationzone,H+ATPase(green).Arabidopsisthalianarootswerefixedinpara-formaldehydefor30minutes.Tissuecleaninghasbeenperformedbeforeimmunolocalization.Anti-rabbitH+ATPase|plasmamembraneprimaryantibodydilutedin1:300andanti-rabbitIgGsecondaryantibodyconjugatedwithAlexa555.Co-stainingwithDAPIvisualizednucleus(bluecolor).Scalebar–100µm.

CourtesyDr.TarasPasternak,FreiburgUniversity


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我想做个目的蛋白的单抗,通过基因克隆、表达、纯化来得到目的蛋白,但是因为用的是原核表达系统,缺少翻译后的正常修饰,所以肯定与天然蛋白有区别,这样的话,作出来的单抗就不一定能够识别组织中的天然蛋白了,有什么方法可以减少他们的差异?也就是尽量让单抗可以识别天然蛋白。谢谢!
从组织中粗提蛋白时加尿素是为了增加蛋白的溶解,是吧?一般用多大浓度呢?

但是尿素是否会导致天然蛋白的失活呢?通过透析除去尿素后蛋白能“复活”吗?
gleason分级_123
隐幽羽2018-02-04
如题,最好有详解
天然蛋白质的组成中不含有的氨基酸
和天然蛋白质中不存在的氨基酸两种问答有啥区别,为啥答案就不一样,如果瓜氨酸和同型半胱氨酸在一起怎么办?
http://www.medicalnewstoday.com/medicalnews.php?newsid=58498

NaturalProteinStopsDeadlyHumanBrainCancerInMice


ScientistsfromJohnsHopkinsandfromtheUniversityofMilanhaveeffectivelyproventhattheycaninhibitlethalhumanbraincancersinmiceusingaproteinthatselectivelyinducespositivechangesintheactivityofcellsthatbehavelikecancerstemcells.ThereportispublishedinNature.

Themostcommontypeofbraincancer-glioblastoma-ismarkedbythepresenceofthesestem-cell-likebraincells,which,insteadoftriggeringthereplacementofdamagedcells,formcancertissue.Stemcells,unlikeallothercellsinthebody,arecapableofformingalmostanykindofcellwhentheright"signals"triggertheirdevelopment.

Fortheirtreatmentexperiment,theresearchersreliedonaclassofproteins,bonemorphogenicproteins,thatcauseneuralstem-cell-likeclusterstolosetheirstemcellproperties,whichinturnstopstheirABIlitytodivide.

Firsttheypretreatedhumanglioblastomacellswithbonemorphogenicprotein4(BMP4),theninjectedthesetreatedcellsintomousebrains.Inmiceinjectedwithcellsthatwerenotpretreated,large,invasivecancersgrew.InthemicewithBMP4-treatedcells,nocancersgrewatall.Threetofourmonthsafterinjection,allmicethatgotuntreatedcellsdied,andnearlyallmicewithBMP4-treatedcellswerealive.

Next,thescientistsdeliveredslow-releaseBMP4-containing"beads"directlyintomousebrainswithimplantedglioblastomacells.Micethatgotemptybeadsdevelopedlargemalignanttumorsanddied.MicewithBMP4beadssurvivedmuchlonger,and80percentsurvivedfourmonthsaftercancercellimplants.

"OurideaistotreatpatientswithBMP4orsomethinglikeitrightaftersurgerytoremoveglioblastomainhopesofpreventingtheregrowthofthecancerandimprovingsurvivaltime,"saysAlessandroOlivi,M.D.,directoroftheDivisionofNeurosurgicalOncologyatHopkinsandacontributortothestudy.

OlivisaysclinicalstudiesusingBMP4couldbeginwithinayearand,ifsuccessful,drugtherapiescouldbeavailabletothepublicwithinthreetofouryears.

"ThiswasproofoftheideathatBMPscouldstopglioblastomabydepletingthestem-cell-likepopulationthatfeedsit,"saysHenryBrem,M.D.,chairmanoftheDepartmentofNeurosurgeryatHopkinsandacollaboratorinthestudy."Thisopensexcitingdoorstofutureresearchintotreatmentsandtherapiesforsuchadevastatingdisease."
我们目前正在研究开发系列天然蛋白质降解成多肽,用于口服营养补充,目前开发的有鱼鳞胶原蛋白多肽,牦牛乳多肽等,我们在应用过程中,感觉到了他的魅力,不同原料来源、不同的工艺条件,很有很多不同的但很有意义的应用效果,非常希望能够跟战友们分享。
天然蛋白质中不存在的氨基酸是。。。鸟氨酸羟脯氨酸瓜氨酸哪个啊?好象不同版本答案不一样啊
人体能产生20种
算上其他生物24种
大概是记不太清了
我是研一的新手,导师昨天说要分给我一个比较难的课题,蛋白质分离纯化。我们实验室主要是做微生物生物化学与分子生物学方面的,没有专门搞蛋白分离纯化的,应该是天然蛋白的分离纯化。天然蛋白质的分离纯化比较难,主要指什么方面比较难呢?仅仅蛋白质分离纯化是不是也不够作一篇硕士论文的工作量呢,是不是也应该有后续的工作或者前期的工作呢?蛋白质分离纯化方面的课题对未来就业有何帮助?谢谢大家!十分感激!
请教,天然菌种发酵的蛋白和重组技术发酵的蛋白在质量检测指标上有何区别?谢谢!
有两题不解
天然蛋白质中不存在的氨基酸:同型半胱氨酸
在天然蛋白质的组成中,不含有的氨基酸是:瓜氨酸
我怎么觉得这两题一样呢
小弟用E.coli表达的一蛋白(一天然毒素的N段)制备了11株单抗,但没有一株能中和天然蛋白,这可急死我了.再拖下去就不能毕业了.导师天天催我建立诊断方法呢.大家给我出出主意!