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Stemrd/Thiazovivin/25 mg/THIA-025
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Stemrd/Thiazovivin/25 mg/THIA-025
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Stemrd
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THIA-025
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SourceM.W.311.36CAS No.1226056-71-8
Structural InfoThiazovivin
FormulationPowder
ReconstitutionBefore reconstitution, we recommend a brief spin todrive down any material dislodged from the bottom of the tube. The compound is soluble in DMSO.
StabilityThe powder is stable for at least 1 year if stored at-20 °C.The dissolved compound isstable for at least 1 month at 4 °C, but should be stored in aliquots at-20 °C for longer term. Protectfrom light.
PurityGreater than 99% as determined by LC/MS analysis.LC/MS and/or NMR data available upon request.
Biological ActivityTested active for culturing human iPS cells in serum-free medium on Matrigel coated plates.
Country of OriginUSA

Thiazovivin,N-benzyl-2-(pyrimidin-4-ylamino)thiazole-4-carboxamide, is a selectiveinhibitor of Rho-associated kinase (ROCK). It protects human ES cells from death in the absence of ECM byregulating E-cadherin mediated cell-cell interaction.Thiazovivin, in combination with inhibitorsof the TGF-beta receptor and the MEK kinases, improves reprogramming efficiencydramatically.Ref: Lin, T., et al. (2009) Achemical platform for improved induction of human iPSCs. Nature Methods. 6(11):805.

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随机序列库的纯化实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。<link rel="stylesheet" type="text/css" href="/ueditor/themes/ifram... 查看更多>
For amplification of cognate sequences from different organisms, or for "evolutionary PCR", one may increase the chances of getting product by designing 查看更多>
Electroporation of P. aeruginosa Preparation of Electrocompetent Cells Inoculate a 5-ml of L-broth with cells of the P. aeruginosa strain to be electrotransfor 查看更多>
SomaGenics, Inc品牌介绍/产品分类/厂家直采/代理 查看更多>
Pichia pastoris is a methylotropic yeast used to express high amounts of protein. Secreted expression is achieved with a cleavalable faktor. To yield high expr 查看更多>
Isolation of RNA from Difficult TissuesThe often exacting process of isolating intact total RNA from tissue becomes even more difficult when processing certain 查看更多>
转化 一.单选题1.下列哪种DNA结构在转化时能获得最高转化效率( )A.线形双链DNA B. 单链线形DNA C. 完整的环状双链DNAD.开口环状双链DNA E. A和C2.下列表型中,哪种是基因工程上的理想的受体菌表型( B )A. r+m+rec+ B. 查看更多>
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描述了 cDNA 芯片在人类基因表达分析中的用途。制备 cDNA 芯片的方法之一是用一个特制的打印机将扩增的 cDNA 转移至显微镜载(玻)片上。标记 cDNA 探针的制备以及与芯片的杂交也有所描述。 查看更多>
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rn2502试剂盒提取rna还需要哪些试剂
准备RNA用的试剂:70%乙醇(用DEPC处理后的水稀释新开封的无水乙醇),DEPC处理后的水,新开封的三氯甲烷等,
容器:玻璃试剂瓶需要180度,8个小时以上烘烤
Eppendorf管和“枪头”:RNase-free的管子和“枪头”(可以直接买到);或者普通的ep管和“枪头”,但是需要DEPC水浸泡后,高温灭菌(121度,20-40分钟)。
如果需要使用研钵和药品匙,研钵和药品匙也是需要180度,8小时以上的烘烤。
还需要没开封的手套,提取RNA时,尽量勤换手套,少说话,尽量不要对着样品吹气。
1. 使用正确的细胞或组织储存条件
  在样品用液氮瞬间冻结之后,应该储存在-80°C,千万不能解冻。即使是置于含有胍盐的裂解液中作匀浆前的短暂解冻,也会导致RNA的降解和损失。瞬间冻结的组织应该首先在超低温条件下先研磨成粉,然后置于裂解液中进行匀浆。
  RNAfixer使样品储存更为便利。储存在RNAfixer中的细胞或组织可在室温下稳定保存长达1个星期,在4°C可稳定保存长达1个月,或永久保存在-20°C。
  2. 消除环境RNase的污染
  为了得到完整的、高品质RNA,在整个RNA制备过程中,当RNA离开强蛋白变性剂(如离液裂解液或酚)的保护时,避免引入新的RNase污染就非常关键。由于RNase几乎是无所不在,所以必须确保与纯化的RNA接触的每一样东西都是无RNase污染的。所有的表面,包括移液器、工作台、玻璃器皿和制胶设备,都必须用表面去污净化溶液如RNase喷雾清除剂 来处理过,去除各种溶液或者反应缓冲液中可能存在的RNase污染,可以用RNAsafe。必须保证一直使用无RNase的枪头、试管和溶液,手套也应经常更换。
  3.迅速灭活内源的RNA酶,以防止RNA降解。
  以下3个方法均可有效使内源RNA酶失活:
  1)、用含离液(如胍盐)的细胞裂解液收获样品,并立即匀浆。
  2)、用液氮瞬间冻结样品。值得特别注意的是:组织块必须保证足够小,在浸入液氮的瞬间就能冻结,以确保瞬间令RNA酶失活。
  3)、立即将样品置于RNAfixer无液氮RNA样品储存液中。它是一种水相、无毒的收集试剂,能立即稳定并保护完整、未冻结的组织和细胞样品中的RNA。关键要点是组织样品切片一定要够薄(<0.5 cm),这样RNAfixer才能在RNase破坏RNA之前迅速渗入组织块中。
  4. 选择合适破壁方法
  细胞或组织的彻底匀浆对RNA提取来说,是一个很关键的步骤,它能够防止RNA的损失和降解。匀浆的方法应根据细胞或组织的类型来选择。大部分培养的细胞可以置于细胞裂解液中,通过简单的涡旋震荡来匀浆;而动物组织、植物组织、酵母和细菌、真菌则常常需要更加剧烈的方法,通常用液氮研磨。比如说细菌(特别是革兰氏阳性菌)的细胞壁,就需要溶菌酶消化来实现彻底的细胞裂解和RNA的最大回收,酵母提取时加入破壁酶帮助破壁,再用TRIpure或RNApure进行提取。
  5. RNA提取少走弯路——不同材料如何选择最适RNA提取试剂
  现有众多的RNA分离方法也许令人难以取舍。目前最简单也是最安全的方法是柱式分离,如RNApure 因为操作简单,时间短,纯度高而受到大家的喜爱,RNApure不需要DNA酶消化DNA,节省了时间,避免RNA的降解,从而提高了产量;相对非柱式分离(如TRIzol),去除蛋白及其他杂质干净,提高了纯度,对于细胞、组织、一般植物均非常适合。植物RNA的提取比较难抉择,植物RNA提取受酚、多糖、蛋白杂质、次生代谢物含量的影响,一般用TRIzol提取纯度不高,而且很多植物用TRIzol提取不出来。
  这时候可以选择多糖多酚植物总RNA提取试剂盒(水仙、辣椒、胡萝卜、玉米、百合、小麦、西红柿、花菜、油菜等)和通用植物RNA提取试剂盒(适合绝大多数植物提取,包括:各种中草药、植物种子、苹果、葡萄、草莓、香蕉、龙眼、荔枝、草坪植物、松树、杉树、白桦、紫松果、彩叶草、一品红、夹竹桃、垂叶榕、紫罗兰、月季、天竺蓝、牵牛花等);非常值得一提的是血液(包括血清、血浆、脑脊液、各种拭子或其他液体含量高的样本)RNA的提取用TRIzol和红细胞裂解的方法效果都不好,因为红细胞裂解液不含有RNA酶的抑制成分,这个过程RNA很容易降解,推荐使用TRIpure LS (RP1101)或者血液总RNA提取试剂盒(RP4001),该方法适用于表达谱芯片实验中RNA的提取。
  6. 低浓度RNA的沉淀
  纯化得到的RNA可能需要通过沉淀来浓缩,以满足一些下游应用的需要。醋酸铵(NH4OAc) 沉淀(加0.1体积的5M 醋酸铵、2-2.5体积的无水乙醇,-20°C放置25分钟以上)可以很好地回收RNA。如果需要定量回收低浓度的RNA(ng/ml),可以采用共沉淀(如linear acrylamide糖原glycogen,、酵母yeast RNA )的方法。核酸助沉剂是linear acrylamide,当RNA用于RT-PCR分析时,线性的丙烯酰胺和DNase处理的糖原都可以作为理想的共沉淀剂,因为它们都不含DNA污染,糖原含量高会抑制PCR反应,应注意控制浓度,核酸助沉剂对PCR无影响,成为病毒核酸提取的首选。酵母RNA和未处理的糖原会给样品带来核酸污染,有可能影响RT-PCR的结果。沉淀后,注意避免RNA沉淀过分干燥,因为这可能导致很难重新溶解。
  7. 提取好的RNA如何储存
  如果只是短期储存,重悬的RNA应放置于-20°C;如果是长期储存的话,就应该放置于-80°C。储存RNA时,可以加入少量的RNA酶抑制剂(RP5601),避免RNA的降解,RNA可以直接做下游实验。如果要长期保存RNA,可以加入RNAlong。我们推荐将RNA溶液分装在几支管中。这会避免反复冻融损伤RNA,并预防偶然的RNase污染。
想请问各位大神~哪个厂家的真菌RNA提取的试剂盒性价比高点呀~~本人毕业论文,想做基因表达的~~查了一下天根RNAprepPure植物总RNA提取试剂盒,跟生工的酵母总RNA快速抽提试剂盒与真菌总RNA快速抽提试剂盒,就想在这三个里面选~~但天根的比较贵呀~~生工的效果有不知道如何~?想问一下各位有木有用过这几个试剂盒的?那样好一点呀~~求回复~~~~谢谢各位了~
请问各位大神,我实验室有这些试剂盒,QIAprepSpinMiniprepKit(250)、AllPrepDNA/RNAMiniKit(50)、QIAampDNAMiniKit、WizardGenomicDNAPurificationKit,请问这几个提DNA的试剂盒有什么不同吗?
有哪些可以提取细胞中病毒DNA的?或者用其他试剂盒提过呢
坐等回复!
天根RNA试剂盒DP419提取的蛋白可以做WB吗:分三层后,上层是RNA,那个中间层的蛋白怎么提出来纯化一下做WB?请高手解答,非常感谢!
试剂准备:使用前先在SEWS-M Wash Solution中加入100 ml 100%的乙醇,混匀。在瓶子上做好标记,密闭储存于室温条件。提取步骤:1. 在样品处理管E中加入至多500 mg的土壤样品2. 将978 μl的Sodium Phosphate Buffer加入到样品处理管E中3. 再加入122 μl的 MT Buffer(为了得到良好的样品处理效果,请在加入土壤样品及两个缓冲液后,在样品处理管中仍能保留有250 – 500μl 空间)4. 将样品置于FastPrep? 仪器上,样品处理条件一般为,时间:40秒,速度:6.0(如果样品需要额外的处理时间,请在间隔期将样品处理管在冰上孵育至少2分钟,以免样品过热)5. 14,000 x g离心5~10分钟(如果把离心时间延长到15分钟,可以更好地使样品量较大的;或者细胞壁结构较复杂的细胞的碎片沉降到管底)6. 将上清转移到一个干净的2.0 ml离心管中。加入250μL的PPS溶液(蛋白质沉淀溶液),用手摇晃10次,使之充分的混合。7. 14,000 x g离心5分钟,将上清转移到一个干净的15ml管中(此处也可使用2Ml管,但使用大管子能获得更好的混合和DNA绑定效果)8. 重悬硅珠(Binding Matrix)溶液,将1.0 ml重悬液加入该15ml管中。9. 使用振荡器或者手动震荡2分钟,将DNA绑定在硅珠上。将管子置于管架上,静置3分钟,使硅珠沉淀下来。10. 小心地移除500μl的上清液,避免吸取到沉淀下来的硅珠。11. 将硅珠在剩余的上清液中重悬。转移约600μl的重悬液至SPIN? Filter中,14,000 x g离心1分钟。弃去接液管中的废液,将15ml管中剩余的重悬液转移到SPIN? Filter再次离心弃去废液。12. 加入500 μl事先准备好的SEWS-M溶液,用枪头轻轻吹打,小心地重悬沉淀。13. 14,000 x g离心1分钟,弃去废液。14. 不加其他溶液,将SPIN? Filter 14,000 x g离心2分钟,除去残留的SEWS-M溶液。弃去接液管,更换一个新的、干净的离心管。15. 将SPIN? Filter置于室温下晾干5分钟16.轻轻地用50-100 μl 的DES溶液(或者无菌/无DNA酶的水)重悬SPIN filter上的硅珠(为了避免过度稀释纯化出的DNA,请尽量减少DES溶液的量,55?C孵育5分钟能帮助提高纯化产物的得率)17. 14,000 x g离心1分钟使溶解的DNA转移到接液管中。弃去SPIN? Filter(得到的纯化产物可直接用于PCR等其他下游的操作,4°C使用前保存或者-20°C长期保存。)技术优势
能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切都后续实验之中。5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。注:对于去除腐植酸的方法在使用以下任何一种方法之前,请预先准备5.5M的异硫氰酸胍(Guanidine Thiocyanate)溶液方法A:1.当操作到土壤DNA提取试剂盒的第九步时,使用14,000 x g (~约5秒)的短时离心替代硅珠的自然沉降,移除上清。2.用1ml事先准备好的异硫氰酸胍溶液洗涤、重悬硅珠。3.14,000 x g (~约5秒)短时离心该离心管,除去上清。4.重复上述的洗涤步骤,直到硅珠恢复到原先的颜色。5.最后一次洗涤之后,用1ml的异硫氰酸胍溶液重悬硅珠,将600μl重悬液转移到SPIN filter里,14,000 x g离心1分钟。6.移除接液管中的废液,将剩余的重悬液转移至SPIN filter里,14,000 x g离心1分钟,弃去废液。7.从提取试剂盒操作说明的第十二步开始继续操作。方法B:1.将下列成分混合于1.5ml的离心管中,组成腐植酸洗涤液:978 μl Sodium Phosphate Buffer122 μl MT Buffer250 μl PPS2.充分混匀后,全速离心1分钟,将上清转移到一个新的离心管中(容量大于或等于2ml)3.加入等体积的5.5M的异硫氰酸胍溶液、混匀。4.完成了土壤试剂盒操作说明中的第九步后,将500μl的腐植酸洗涤液加入SPIN filter5.14,000 x g离心1分钟,弃去废液。6.重复上述的洗涤步骤,直到硅珠恢复到原先的颜色。7.从提取试剂盒操作说明的第十二步开始继续操作。
DNA提取原理和方法 123
找答案提问题2017-10-03
求水煮法提取DNA的详细过程,复制他人的请注明来源网址,谢谢

不懂得请别粘贴那些有的没的,浪费资源

采用的给全部分
水稻和棉花的种子
我要检测转基因大豆里边的转基因成分,因此需要提取大豆的DNA,再普通的PCR电泳检测是否存在转基因条带,但是我觉得普通的DNA提取试剂盒不能很好的提取大豆里边的DNA,因为大豆不是新鲜的,而且经过一定的加工,里边的DNA片段估计有断裂吧,所以想问问大家,有没有谁提取过转基因植物的DNA,有好用的试剂盒给介绍一下么?
CTAB法提取DNA中各试剂的用途
buffer P1:除去RNA
buffer P2:裂解细胞
buffer P3:沉淀DNA
buffer WA、buffer WB:都是洗涤液(这两个之间有什么区别我也不清楚)
TE:溶解DNA.
我在提一种植物的RNA用的是上海华舜生物公司的TRIZOL按照他上面的说明书,我应该用System4那种方法,可是里面要用到RNA沉淀试剂,不知道是什么东西,试剂盒只有一瓶,是RNAexReagent。其它的就没有了。不知道那东西是什么,要自己配吗?RNA沉淀试剂是什么东西?