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点击量 391 更新于 2021-08-14
原理酵母核酸中RNA含量较多,DNA含量则少于2%。RNA可溶于碱性溶液,当碱被中和后,可加乙醇使其沉淀,有此可得粗RNA制品。
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点击量 503 更新于 2021-08-13
如果对噬菌体颗粒进行纯化的目的,是为了获得随后亚克隆所需的外派 DNA 片段或制备噬菌体两臂,那么就可用离心来代替 CsCl 分级梯度和平衡梯度,通过离心将噬菌体颗粒沉淀于离心管底。用这种方法获得的噬菌体的纯度不及平衡梯度离心或甘油梯度离心所获得的,但它们完全能满足于 DNA 的提取。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。
酵母菌的分离纯化实验方案
点击量 307 更新于 2021-08-13
原理酵母核酸中RNA含量较多,DNA含量则少于2%。RNA可溶于碱性溶液,当碱被中和后,可加乙醇使其沉淀,有此可得粗RNA制品。
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点击量 346 更新于 2021-08-12
与 rRNA, 5SRNA, 5.8 SRNA 和 tRNA 相比,大多数真核生物的 mRNA 在其 3' 端带有 poly(A) 尾巴。因此,mRNA 能用 oligo(dT)-纤维素亲和层析法从细胞总 RNA 中分离 (Edmonds et al. 1971; Aviv and Leder 1972)。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。
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点击量 320 更新于 2021-08-11
许多生物学过程,如重组、复制及转录都涉及序列特异性DNA结合蛋白的作用, 这些蛋白质的量通常小于细胞总蛋白质量的0.01%。基于这些蛋白质的序列特异性 DNA结合特性,亲和层析是一种十分有效的纯化蛋白质的方法。来源:《精编分子生物学》第五版
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点击量 360 更新于 2021-08-11
在提取过程的第一阶段细胞的 RNA 酶应尽快灭活。一旦内源的 RNA 酶被破坏,RNA 受损的可能就大大降低,而纯化的过程就可以按合适的速度进行。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。
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点击量 257 更新于 2021-08-10
本方案介绍用阳离子去污剂——十六烧基溴化吡啶(cetylpyridinium bromide,CPB) 定量差异沉淀分离放射性标记的寡核苷酸与未掺入的放射性标记物。此方法最初是用于回收磷酸缓冲液从羟磷灰石柱洗脱的 DNA(Geek and Nasz 1983), 也可用于沉淀放射性标记核酸包括寡核苷酸。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)上册,作者:黄培堂。
人工神经网络研究现状及其展望
点击量 290 更新于 2021-08-09
如果放射性标记的寡核苷酸只是用作杂交探针的话,一般不必完全除去未掺入的放射性标记物。然而,为了使本底降至最低,应该将未掺入的大部分放射性标记物与放射性标记的寡核苷酸分离。如果寡核苷酸长度超过 18 个核苷酸(本方案),则绝大部分未反应的放射性前体物质可通过乙醇分级沉淀除去。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)上册,作者:黄培堂。
同位素示踪技术
点击量 295 更新于 2021-08-08
许多生物学过程,如重组、复制及转录都涉及序列特异性DNA结合蛋白的作用, 这些蛋白质的量通常小于细胞总蛋白质量的0.01%。基于这些蛋白质的序列特异性 DNA结合特性,亲和层析是一种十分有效的纯化蛋白质的方法。来源:《精编分子生物学》第五版
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