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| 试剂、试剂盒 | 乙醇β-巯基乙醇 仪器、耗材 | 转子-定子均化器或类似设备MarligenRapidTotalRNASystem 实验步骤 | 一、材料 1.缓冲液、溶液和试剂 乙醇,70%和100% β-巯基乙醇 2.特殊设备 转子-定子均化器或类似设备 3.其他 MarligenRapidTotalRNASystem(MarligenBiosciences) 二、方法 (1）加β-巯基乙醇制备裂解溶液。 (2）按照厂商的方案要求，向细胞和组织样品中加裂解溶液（裂解液体积取决于所处理样品的大小）。用转子-定子均化器或类似设备均化。 (3）向裂解产物中加等体积的70%乙醇。均质化裂解产物以使沉淀分散。 (4）将裂解产物置随试剂盒提供的离心套柱中，在微量离心机中12000~16000g离心。 (5）用700ul洗涤缓冲液1洗涤一次，12000~16000g离心1min。 (6）用洗涤缓冲液2洗涤两次，每次500ul,12000~16000g离心1min。 (7）12000~16000g离心2min以移弃残留洗涤缓冲液。 (8）参照试剂盒的使用说明用适董的水从柱中洗脱RNA。然后储存于-70°C。较少的样品可用45ul水洗脱，样品较多可用20ul水洗脱。  |
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发布于 ： 2021-07-30
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