黄岩模具钢大全_
| 实验方法原理 | 该方法利用mRNA上的寡聚A可与较联寡聚T的纤维素柱在高盐下以碱基配对形式发生亲和吸附，而在低盐下，碱基配对能力破坏，吸附解除，而其他成分的RNA则不具该特性，因此在高盐下当RNA抽提样品流经该柱时，mRNA被挂在柱上，而其他RNA则随高盐溶液流出；当用低盐洗脱液洗柱时，mRNA随洗脱液流出。再用有机溶剂沉淀则可得纯化mRNA。 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | mRNA 试剂、试剂盒 | 十二烷基肌氨酸钠EDTANaClTris-HCl洗脱液SDS 实验步骤 | 1. DEPC处理层析柱。 2. 0.1MNaOH处理Oliga(dT）－纤维素。 3. 用1×上样液洗柱至pH<8.0。 4. 无菌水溶解RNA，65℃温浴5分钟后，迅速冷却至室温，加等体积2×上样液，上样，分部收集。 5. 1倍体积1×上样液洗柱，分部收集。 6. OD260沉淀收集液，确定收集液的该值是否接近0，如该值仍很大，则上样液继续洗柱，直至该值接近0。 7. 2~3倍柱床体积的洗脱液，洗柱，分部收集。 8. 测定各收集管的OD260，将有吸光值的各管合并。 9. 在洗脱液中加入0.1体积的NaAC，1体积的异丙醇，-20℃沉淀过夜，12000g离心10min，75%乙醇洗沉淀，真空干燥。 10. 提取mRNA质量的分光光度计检测，将所提mRAN分别在260，280nm比色，要求A. OD260%/OD280%不小于2.0及40μg所提样品在OD260%的值为1。 11. 提取mRNA质量的电泳检测，在1%的变性胶上，EB染色后，mRNA应在0.5-8Kb间均匀着色，1.5-2Kb间着色较强。 |
免责声明 本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
发布于 ： 2021-07-20
阅读（494）
▍
相关分类
▍
相关文章
The ribonuclease protection assay (RPA) 实验方法
Sucrose Density Gradient Fractionation 实验方法
pelfreezbio代理pelfreezbio代理pelfreezbio北京代理上海 ...
财政部发布《“六保”财政政策措施问答》
黄岩模具钢大全_
佛山市翁开尔贸易有限公司_旺铺 1688.com
德国Brand 微量移液器,可调量程单通道微704768_参数_厂家报价_仪器信 ...
sigma脱氧核糖核酸酶I Dnase I详细信息上海力敏实业有限公司
Eshine 品牌简介_品牌服装网
日本乳化NihonEmulsionCo.,Ltd.商友圈
ExpressionL19usingPichiapastoris
Welcome to seniorsconcierge.com Homepage
▍
相关问答
