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DigestssDNA,butnotdsDNA,ina3´to5´direction
Specific:ProcessivelydigestssDNAina3´to5´directionwithoutharmingdsDNA-short3´overhangsinDNAarenotdigested- FlexIBLe:Activeunderawidevarietyofbufferconditionsandcanbeaddeddirectlyintomostreactionmixes
- HeatInactivated:Destroytheenzymeactivitybyincubatingat80°Cfor15minutes
ExonucleaseIdigestsssDNAina3´to5´direction,1-3butdoesnotdigestdsDNA.Althoughitrequiresthepresenceofmagnesiumandafree3´-hydroxylterminusforactivity,itisactiveunderawidevarietyofbufferconditionsandcanbeaddeddirectlyintomostreactionmixes.ExonucleaseIcanbeheat-inactivatedbyincubationat80°Cfor15minutes.
Applications
- RemovalofresidualssDNA,includingoligos,fromreactionmixes.
- RemovalofssDNAfromnucleicacidmixtures.
UnitDefinition:OneunitofExonucleaseIcatalyzesthereleaseof10nmolofacid-solublenucleotidesfromheat-denaturedcalfthymusDNAin30minutesat37°Cunderstandardassayconditions.
StorageBuffer:50%glycerolcontaining50mMTris-HCl(pH7.5),0.1MNaCl,0.1mMEDTA,1mMDTT,and0.1%Triton®X-100.
QualityControl:ExonucleaseIistestedindegradationofssDNAandisfreeofdetectableRNase,endonuclease,anddouble-strandedexonucleaseactivities.
References
- Lehman,I.R.andNussbaum,A.L.(1964)J.Biol.Chem.239,2628.
- Kushner,S.R.etal.(1971)Proc.Natl.Acad.Sci.USA68,824.
- Kushner,S.R.etal.(1972)Proc.Natl.Acad.Sci.USA69,1366.
 | Figure1.SpecificityofExonucleaseIforssDNA.200ngofEcoRI-linearizedpUC19dsDNAand1µgofa100-merssDNAoligoweremixedin1XTABufferandincubatedat37°Cfor20minintheabsenceorpresenceof10unitsofExonuclease I.Asseenonthis1%agarosegel,ExonucleaseIcompletelydigestedthelinearssDNAoligo,butleftthelinearizedplasmiddsDNAintact.Lane1,sizeMarkers;Lane2,minusExoI;Lane3,plusExoI. | |
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2021-09-04
耐热DNA聚合酶特点：合理选择耐热DNA聚合酶是PCR成败与否的一个关键因素，如何选择最合适的耐热聚合酶，是进行PCR实验首先要考虑的问题。目前市面上有许多耐热DNA聚合酶，虽然名称各不相同，但主要区别在于特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段 查看更多
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2019-01-19
上海宾智生物科技有限公司在发布的Phusion Hot Start II High-Fidelity DNA Polymerase 的Phusion热启动II高保真DNA聚合酶供应信息，浏览与Phusion Hot Start II High-Fidelity DNA Polymerase 的Phusion热启动II高保真DNA聚合酶相关的产品或在搜索更多与Phusion Hot Start II High-Fidelity DNA Polymerase 的Phusion热启动II高保真DNA聚合酶相关的 查看更多
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2020-07-28
成都艾特姆生物科技有限公司在发布的供应销售Taq DNA聚合酶供应信息，浏览与供应销售Taq DNA聚合酶相关的产品或在搜索更多与供应销售Taq DNA聚合酶相关的内容。 查看更多
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2018-12-26
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2019-07-24
北京金石百优科技有限公司在发布的Long Taq DNA聚合酶供应信息，浏览与Long Taq DNA聚合酶相关的产品或在搜索更多与Long Taq DNA聚合酶相关的内容。 查看更多
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2021-07-14
订1支7折，订2支5折，下单即送必拓充电宝活动日期：2017.07.13-2017.9.30ExFi Tusion DNA聚合酶是一种高度热稳定的DNA聚合酶，来源于嗜热菌Thermococcus sp.4557的PolB基因，通过单链DNA结合结构域融合及多个关键位点的基因进化，经大肠杆菌表达及多种介质纯化而得到。酶的分子量为106 kDa。产品特色1.更高保真性；2. 更快的扩增速度，延伸速度为3-4 kb/min；3. 可很好的扩... 查看更多
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2021-07-27
成都艾特姆生物科技有限公司在发布的供应销售Gold Taq DNA聚合酶供应信息，浏览与供应销售Gold Taq DNA聚合酶相关的产品或在搜索更多与供应销售Gold Taq DNA聚合酶相关的内容。 查看更多
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2018-12-26
Infection with retroviruses It is well established with avian retroviruses that cells are most efficiently infected just after they are trypsinized. Trypsiniza 查看更多
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2018-12-26
Orcinol Determination of RNALEVEL I Materials RNAAlkaline distilled waterAcid-orcinol reagentBoiling water bathSpectrophotometer and cuvettes Procedure Prepare 查看更多
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2020-05-15
E.特异性酯酶法 进入在线模考 有关尿干化学检测原理,葡萄糖测定用 A.偶氮偶联法 B.马来酐试剂 C.葡萄糖氧化酶法 D.多聚电解质离子解离法 E.特异性酯酶... 查看更多
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2021-09-13
第一链cDNA合成的起始可以使用三种不同的方法，各种方法的相对特异性影响了所合成cDNA的量和种类。随机引物法是三种方法中特异性最低的。引物在整个 查看更多
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2021-08-07
Klenow酶是大肠杆菌八聚合酶I的羧基端片段，它具有DNA聚合酶和3’到5’方向的外切酶活性，不含5’到3”方向的外切酶活性。 查看更多
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Platinum DNA聚合酶 | Thermo Fisher Scientific CN123
sunk332008-10-06
大家谁用过Invitrogen的platinumpfxDNA聚合酶？保真性是否如宣传的那样
我用来扩增一个1.1kb的基因，用TAKARA的EXtaq和其他的总是出现突变不知道这个酶能不能完全保真，另外末端是否加A
我用来扩增一个1.1kb的基因，用TAKARA的EXtaq和其他的总是出现突变不知道这个酶能不能完全保真，另外末端是否加A
Bst DNA 聚合酶,全长批发_价格厂家供应商_北京百奥莱博科技有限...123
wujie82118912006-04-10
哪里能买到BstDNA聚合酶！哪里的更好用一点？请大家帮忙！
DNA聚合酶与DNA连接酶等作用如何区别 实验方法123
zy19239951412017-11-27
DNA聚合酶作用于DNA复制时，用于连接两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键以及碱基互补配对时的氢键。
DNA连接酶作用于基因工程，用于连接两个DNA片段间的磷酸二酯键。
DNA连接酶作用于基因工程，用于连接两个DNA片段间的磷酸二酯键。
17秋西南大学[1194]《生活中的DNA科学》作业答案123
2017-11-27
DNA聚合酶有特异性的，DNA聚合酶只能催化核苷酸与核苷酸短链的连接,且具有方向性，由DNA5'端点开始复制到3'端的。
高保真DNA聚合酶在SNP检测中的应用123
luzhikunjxnk2021-07-27
各位，我需要做基因的序列测定检测突变，想请教一下各位用过哪个公司的哪种高保真酶比较好？（最好是保真性能高而且扩增效率也好）谢谢！
PCR实验中DNA聚合酶的选择及实验方法 实验方法123
无双蛛蛛2009-03-16
我要P一个3kb左右的目的基因，需要一个保真性高的酶，因为后面要测序，而且我的两个引物的GC含量相差也很大，还需要一个载体连接去进行筛选，这个载体要4kb以上的，因为要和我的目的基因大小相差大一点的，而且这个载体上还要有多个切割位点，好让我切割下来，与最终的质粒相连。
最近，我看了很多这方面的资料，但是我对这个方面不是很了解，所以现在搞得头昏眼花的，不知道该选什么酶和载体，希望大家多多帮忙
在此十分感谢
最近，我看了很多这方面的资料，但是我对这个方面不是很了解，所以现在搞得头昏眼花的，不知道该选什么酶和载体，希望大家多多帮忙
在此十分感谢
【分享】Taq DNA聚合酶、Pfu DNA聚合酶等酶的特点及应用123
qingdaomdbio2021-07-25
合理选择耐热DNA聚合酶是PCR成败与否的一个关键因素。选择最合适的耐热聚合酶，是进行PCR实验首先要考虑的问题。许多耐热DNA聚合酶的主要区别在于特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段长度等几个指标。
下面是六种不同耐热聚合酶的比较：
Taq：扩增效率最高的耐热DNA聚合酶，能很好的扩增6kb以下的DNA片段。扩增碱基出错率为10-5左右。
Pfu：目前保真度最高的耐热DNA聚合酶，碱基出错率为10-6，但扩增效率低于Taq酶，一般能很好的扩增2kb以下的片段。
TaqPlus：集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比Pfu高，保真度比Taq好。能有效的扩增10kb以下的片段。
HotstartTaq：经过化学修饰的耐热DNA聚合酶。此酶在常温下，活性被化学基团封闭，要在94℃-95℃加热数分钟才能回复正常活力开始反应，避免了起始循环较低温度下的非特异性扩增，提高了反应的灵敏度和特异性。
LongTaq：具有3’-5’外切酶活性的耐热DNA聚合酶，它不但扩增效率高而且错配率低，对于简单模板可扩增长达40kb的模板，对复杂模板也可扩增长达15kb的片段。
TaqPlatinum：热启动高保真耐热DNA聚合酶。如果对保真度要求很高，而用Pfu扩增有难度，可选用TaqPlatinum，一般扩增长度可达4kb。
根据不同的实验目的选择最合适的酶，
克隆普通长度的目的DNA片段：Taq、TaqPlus
保真度要求较高，片段比较短，如点突变、基因筛选等：Pfu、TaqPlatinum
高保真长片段扩增，如构建基因图谱及分子遗传学研究等：LongTaq、TaqPlus
扩增基因组模板，需要降低背景：HotstartTaq、TaqPlatinum
扩增GC含量较高或二级结构较复杂的模板：TaqPlus、LongTaq、TaqPlatinum
实时荧光定量PCR反应：Taq、HotstartTaq、TaqPlatinum
从菌株或质粒模板，筛选鉴定目的克隆，扩增6kb以下的片段：Taq、TaqPlus、2×TaqPCRMasterMix
模板比较复杂或目的片段丰度低，用普通Taq酶扩增不出条带：2×TaqPCRMasterMix、2×PfuPCRMasterMix
下面是六种不同耐热聚合酶的比较：
Taq：扩增效率最高的耐热DNA聚合酶，能很好的扩增6kb以下的DNA片段。扩增碱基出错率为10-5左右。
Pfu：目前保真度最高的耐热DNA聚合酶，碱基出错率为10-6，但扩增效率低于Taq酶，一般能很好的扩增2kb以下的片段。
TaqPlus：集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比Pfu高，保真度比Taq好。能有效的扩增10kb以下的片段。
HotstartTaq：经过化学修饰的耐热DNA聚合酶。此酶在常温下，活性被化学基团封闭，要在94℃-95℃加热数分钟才能回复正常活力开始反应，避免了起始循环较低温度下的非特异性扩增，提高了反应的灵敏度和特异性。
LongTaq：具有3’-5’外切酶活性的耐热DNA聚合酶，它不但扩增效率高而且错配率低，对于简单模板可扩增长达40kb的模板，对复杂模板也可扩增长达15kb的片段。
TaqPlatinum：热启动高保真耐热DNA聚合酶。如果对保真度要求很高，而用Pfu扩增有难度，可选用TaqPlatinum，一般扩增长度可达4kb。
根据不同的实验目的选择最合适的酶，
克隆普通长度的目的DNA片段：Taq、TaqPlus
保真度要求较高，片段比较短，如点突变、基因筛选等：Pfu、TaqPlatinum
高保真长片段扩增，如构建基因图谱及分子遗传学研究等：LongTaq、TaqPlus
扩增基因组模板，需要降低背景：HotstartTaq、TaqPlatinum
扩增GC含量较高或二级结构较复杂的模板：TaqPlus、LongTaq、TaqPlatinum
实时荧光定量PCR反应：Taq、HotstartTaq、TaqPlatinum
从菌株或质粒模板，筛选鉴定目的克隆，扩增6kb以下的片段：Taq、TaqPlus、2×TaqPCRMasterMix
模板比较复杂或目的片段丰度低，用普通Taq酶扩增不出条带：2×TaqPCRMasterMix、2×PfuPCRMasterMix
高中生物DNA聚合酶和DNA连接酶的区别_123
ggj20033070012021-07-24
二者的区别在于作用的底物：DNA连接酶与DNA聚合酶都是形成磷酸二酯键。但DNA连接酶连接的是DNA片段（比如冈崎片段）；DNA聚合酶是将单个脱氧核糖核苷酸按顺序连接到DNA链上。向左转|向右转
DNA聚合酶只能将___加到已有的核苷酸片段的末端,形成___。DNA连接...123
2021-07-22
观察以下dna结构图,判断dna聚合酶能够与哪一个结合123
啊姗痚2017-11-05
观察以下dna结构图，判断dna聚合酶能够与哪一个结合
可分为以下几个类群:(1)依赖DNA的DNA聚合酶；(2)依赖RNA的DNA聚合酶；(3)依赖DNA的RNA聚合酶；(4)依赖RNA的RNA聚合酶。前两者是DNA聚合酶，它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ，PolⅡ和PolⅢ等)；DNA聚合酶只能在有引物的基础上，即在DNA或RNA引物的3′-OH延伸，这DNA的合成方向记为5′→3′。换言之DNA聚合酶催化反应除底物(αNTP)外，还需要Mg2+ 、模板DNA和引物，迄今细胞内尚无发现可从单体起始DNA的合成。同样，上述(3)和(4)是催化RNA生物合成反应中最主要的RNA合成酶，它们以四种三磷酸核糖核苷(NTP)为底物，并需有DNA模板以及Mn2 及Mg2 的存在下，在前一个核苷酸3′-OH与下一个核苷酸的5′-P聚合形成3′，5′-磷酸二酯键，其新生链的方向也是5′→3′。RNA聚合酶也大量存在于原核和真核生物的细胞中。如大肠杆菌RNA聚合酶分子量4.8×105，由5条多肽链组成，分别命名为α，α，β，β′，和γ，全酶可用α2ββ′λ表示。真核生物RNA聚合酶分子大于5×105，由10～12个大小不等亚基组成。聚合酶除作为自然界生命活动中不可缺少的组分外，在实验室中大多用作生命科学研究的工具酶类之一。
可分为以下几个类群:(1)依赖DNA的DNA聚合酶；(2)依赖RNA的DNA聚合酶；(3)依赖DNA的RNA聚合酶；(4)依赖RNA的RNA聚合酶。前两者是DNA聚合酶，它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ，PolⅡ和PolⅢ等)；DNA聚合酶只能在有引物的基础上，即在DNA或RNA引物的3′-OH延伸，这DNA的合成方向记为5′→3′。换言之DNA聚合酶催化反应除底物(αNTP)外，还需要Mg2+ 、模板DNA和引物，迄今细胞内尚无发现可从单体起始DNA的合成。同样，上述(3)和(4)是催化RNA生物合成反应中最主要的RNA合成酶，它们以四种三磷酸核糖核苷(NTP)为底物，并需有DNA模板以及Mn2 及Mg2 的存在下，在前一个核苷酸3′-OH与下一个核苷酸的5′-P聚合形成3′，5′-磷酸二酯键，其新生链的方向也是5′→3′。RNA聚合酶也大量存在于原核和真核生物的细胞中。如大肠杆菌RNA聚合酶分子量4.8×105，由5条多肽链组成，分别命名为α，α，β，β′，和γ，全酶可用α2ββ′λ表示。真核生物RNA聚合酶分子大于5×105，由10～12个大小不等亚基组成。聚合酶除作为自然界生命活动中不可缺少的组分外，在实验室中大多用作生命科学研究的工具酶类之一。
需要镁离子催化的酶_真核生物的dna聚合酶需要镁离子,这和它的...123
陡变吧AWJ2017-11-27
TaqDNA聚合酶是Mg2+依赖性酶，该酶的催化活性对Mg2+浓度非常敏感。以活性程度很低的鲑鱼精子DNA为模板，dNTP的浓度为0.7～0.8mmol/L时，用不同浓度Mg2+进行PCR反应10min，测定结果为Mgcl2浓度在2.0mmol/L时该酶催化活性最高，此浓度能最大限度地激活TaqDNA聚合酶的活性，Mg2+过高就抑制酶活性，当Mgcl2浓度在10mmol/L时可抑制40～50%的酶活性。由于Mg2+能与dNTP结合而影响PCR反应液中游离的Mg2+浓度，因而Mgcl2的浓度在不同的反应体系中应适当调整，优化浓度。一般反应中Mg2+浓度至少应比dNTP总浓度高0.5～1.0mmol/L。适当浓度的KCl能使Taq DNA聚合酶的催化活性提高50～60%，其最适浓度为50mmol/L，高于75mmol/L时明显抑制该酶的活性。
DNA聚合酶,解旋酶,RNA聚合酶各自的作用对象和作用时期(详细) 懂得123
Azshin2017-11-05
DNA聚合酶：在DNA复制时，作用于游离的脱氧核苷酸，将游离的脱氧核苷酸连接形成新的脱氧核苷酸长链。
解旋酶：在DNA复制、转录时，作用于DNA双链，将双链DNA解开形成单链。
RNA聚合酶：在转录过程中，作用于游离的核糖核苷酸，将它们连接形成mRNA链
解旋酶：在DNA复制、转录时，作用于DNA双链，将双链DNA解开形成单链。
RNA聚合酶：在转录过程中，作用于游离的核糖核苷酸，将它们连接形成mRNA链
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