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Excellgen/T4 RNA Ligase 2, dsRNA Ligase/EG-1052/5,000 Units
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Excellgen/T4 RNA Ligase 2, dsRNA Ligase/EG-1052/5,000 Units
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DescriptionT4RNALigase2,alsoknownasT4Rnl2(gp24.1),hasbothintermolecularandintramolecularRNAstrandjoiningactivity.T4RNALigase2ismuchmoreactivejoiningnicksondoublestrandedRNAthanonjoiningtheendsofsinglestrandedRNA.Ligationofsingle-strandedRNAsubstratesgenerateseitherintramolecularorintermolecularproducts.Theenzymerequiresanadjacent5´phosphateand3´OHforligation.Theenzymecanalsoligatethe3´OHofRNAtothe5´phosphateofDNAinadoublestrandedstructure.Thenon-ligatedstrandoftheduplexcanbeeitherRNAorDNA.T4RNAligase2requiresATPforactivityunlessthesubstrateispreadenylatedonthe5′end.
Applications
  • LigateanickindsRNA
  • Ligatethe3´OHofRNAtothe5´phosphateofDNAinadoublestrandedstructure
Source

PurifiedfromarecombinantE.colistraincarryingtheT4phageRNALigase2(gp24.1)gene

Components
  • T4RNALigase2:30,000U/mlinstoragebuffer:10mMTris-HCl,100mMNaCl,0.1mMDTT,0.1mMEDTA,50%glycerol,pH7.5@25°C
  • 10XT4RNALigase2Buffer:500mMTris-HCl,100mMMgCl2,50mMDTT,10mMATP,pH7.6@25°C
UnitDefinition

Oneunitisdefinedastheamountofenzymerequiredtoligate50%of0.4µgofanequimolarmixofasingle-stranded5′FAM-labeled17-merRNAtothe5′phosphorylatedendofa18-merDNAwhenbothstrandsareannealedtoacomplementary35-merDNAstrandin20µLat37°Cfor30minutes.

QualityControl
  • Theabsenceofendo-,exodeoxyribonucleases,phosphatases,andribonucleasesconfirmedbyappropriatequalitytests.
  • Functionallytestedforthecapacitytojoincohesive-andblunt-endDNAfragments.
Storage-20°C.
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连接酶链反应(Ligase Chain Reaction,LCR)是继PCR后,新出现的一种更加完善的DNA体外扩增和检测技术。在检测点突变等方面具有独特的优点。... 查看更多>
北京瑞泽康科技有限公司在发布的连接酶供应信息,浏览与连接酶相关的产品或在搜索更多与连接酶相关的内容。 查看更多>
连接酶(英语:Ligase,或称连结酶和结合酶)是一种催化两种大型分子以一种新的化学键结合一起的酶,一般会涉及水解其中一个分子的团。一般连结酶催化以下的反应:或有时是:其中小阶的字母代表小团。... 查看更多>
所有产品都有正品保障,透析袋现货,为美国spectrumlabs、viskase、cellu.sep三大公司生产。 快速连接™ 试剂盒 货号 规格 价格 库存 #M2200L 150 次反... 查看更多>
泛素蛋白酶体途径是目前己知的所有真核生物体内具有高度选择性的最为重要的蛋白质降解途径。真核细胞中泛素化修饰后的靶蛋白可能被降解、可能被转移到细胞或细胞外的特定部位,也有可能导致靶蛋白的功能发生变化,这主要取决于靶蛋白所加的泛素链的结构,以及泛素链的长短。泛素连接酶E3... 查看更多>
所有产品都有正品保障,透析袋现货,为美国spectrumlabs、viskase、cellu.sep三大公司生产。 T4 DNA 连接酶 货号 规格 价格 库存 #M0202L 100,000 unit... 查看更多>
连接酶链反应(Ligase Chain Reaction,LCR)是继PCR后,新出现的一种更加完善的DNA体外扩增和检测技术。在检测点突变等方面具有独特的优点。... 查看更多>
上海宾智生物科技有限公司在发布的512105 AIR™ Ligase 空气™连接酶供应信息,浏览与512105 AIR™ Ligase 空气™连接酶相关的产品或在搜索更多与512105 AIR™ Ligase 空气™连接酶相关的内容。 查看更多>
特性 可在高温条件下,连接 DNA 链上的切刻位点 具有极高的耐热性,与 PCR 反应条件兼容 可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测 可通过 PCR 扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变 概述9oNTM DNA连接酶能够催化磷酸二酯键的形成,使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的 5 -磷酸末端和 3 -羟基末端通过磷酸二酯键相连。该酶在 45 ℃-90 ℃ 范围内均有活性。 来源纯化自重组 E. coli 菌株,其携带有从极度耐热的海底超嗜热古菌(Therm 查看更多>
泛素连接酶Siah1抗体SIAH1263381广州速聚生物科技有限公司泛素连接酶Siah1抗体 查看更多>
在pUC18载体基础上构建而成,具有pUC18载体的相似功能。 克隆效率高,阳性率在90%以上,缩短了筛选过程。 组分说明: 组分 含量储存 pUC-T(50 ng/µl)20 μl-20℃ Solution Buffer,2× 150 μl -20℃ Conctrol Insert (50 ng/µl) 10 μl-20℃ DH5α 查看更多>
2021-09-10
DNA连接酶(DNA Ligase)也称DNA黏合酶,在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色,那就是连接DNA链3‘-OH末端和,另一DNA链的5’-P末端,使二者生成磷酸二酯键,从而把两段相邻的DNA链连成完整的链。连接酶的催化作用需要消耗ATP。... 查看更多>
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菌体构建时,目的基因连接在T载体上,测序也正确,但是将目的基因还有载体分别双酶切后总是连接不上,将连接后产物跑核酸胶,什么也没有,不知道是什么原因?我的目的基因浓度为9ng/ul,载体回收后的浓度为6ng/ul,是因为浓度太低的原因吗?还有就是连接有目的基因的T载体双酶切后出现了三条带,这个又是什么原因呢?希望得到解答

请问,用T4连接酶连接以后,做转化时是否需要酒精纯化一下?还有一个问题,用T4聚合酶补平粘性末端以后,可以直接用来做连接吗?
不要机理就像看下连接前的3'和5'什么样子内切酶切开后两头都要做去磷酸化吗? 谢谢
加入PEG8000,反应体系终浓度5%
DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的,最初是在大肠杆菌细胞中发现的.

DNA连接酶主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键最初从原核生物(大肠杆菌)分离得到的.现在生物基因工程主要是从T4噬菌体中分离得到的,
限制性内切酶:可以切割磷酸二酯键
DNA连接酶:可以连接被限制酶切割开磷酸二酯键
现有DNA双链,其中一条有缺口,用T4DNA连接酶封闭缺口反应体系是什么?连接酶浓度有什么要求?

有没有人用过NEB的Blunt/TALigaseMasterMix和InstantSticky-endLigaseMasterMix?

有没有人用过NEB的Blunt/TALigaseMasterMix和InstantSticky-endLigaseMasterMix?

有没有人用过NEB的Blunt/TALigaseMasterMix和InstantSticky-endLigaseMasterMix?

.....它说连得又快又好,想问问有木有小白鼠试过它家的这两个产品呢。。如果用过能不能请教下效果咋样呢。。我之前用Thermo的T4,属于又便宜又慢效果还可以的那类型的。。(虽然说thermo也说室温30min就ok,但是还是4度过夜了,室温30min不靠谱)

它能识别特定的核苷酸序列吗
不需要识别特定的碱基序列吗?例如用不同的限制酶切出的平末端用T4DNA连接酶都能连起来吗?
它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。
连接酶有T4噬菌体DNA连接酶、T4噬菌体RNA连接酶、大肠埃希菌DNA连接酶等。DNA连接酶可连接平端,也连接粘端。反应需有Mg2+和ATP存在,pH7.5-7.6。最适温度37℃,30℃以下活性明显下降,但考虑到被连接DNa 的稳定性和粘性末端的退火温度,一般平端连接用20-25℃,粘端连接用12℃左右。
聚合酶有DNA聚合酶(以DNA为模板合成DNA大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ,大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ大片段(Klenow大片段),T4或T7噬菌体DNA聚合酶等);RNA聚合酶(以DNA为模板合成RNA,T7或T3噬菌体RNA聚合酶);逆转录酶(以RNA为模板合成DNA,除RNA病毒中发现外,发现大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ和Taq DNA聚合酶都有逆转录活性)。
大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ具有5′→3′聚合酶活性和5′→3′,3′→5′外切酶活性。Klenow片段是DNA聚合酶Ⅰ被枯草杆菌酶作用产生的一个大片段,有5′→3′聚合酶和3′→5′外切酶活性,无5′→3′外切酶活性。可用于缺口翻译(Nick translation)法标记核酸,也可用于DNA序列测定,修补DNA链等。向左转|向右转
DNA连接酶 123
2017-10-03
DNA连接酶用来连接具有互补末端的双链DNA,其最适温度是37℃,但由于其在高温不稳定,所以一般是16℃连接过夜。DNA聚合酶是用来复制DNA的,在体内的最适温度是37℃,我们做PCR常用的酶也是聚合酶,其最适扩增温度是72℃。