
Description | T4RNALigase2,alsoknownasT4Rnl2(gp24.1),hasbothintermolecularandintramolecularRNAstrandjoiningactivity.T4RNALigase2ismuchmoreactivejoiningnicksondoublestrandedRNAthanonjoiningtheendsofsinglestrandedRNA.Ligationofsingle-strandedRNAsubstratesgenerateseitherintramolecularorintermolecularproducts.Theenzymerequiresanadjacent5´phosphateand3´OHforligation.Theenzymecanalsoligatethe3´OHofRNAtothe5´phosphateofDNAinadoublestrandedstructure.Thenon-ligatedstrandoftheduplexcanbeeitherRNAorDNA.T4RNAligase2requiresATPforactivityunlessthesubstrateispreadenylatedonthe5′end. |
Applications |
|
Source | PurifiedfromarecombinantE.colistraincarryingtheT4phageRNALigase2(gp24.1)gene |
Components |
|
UnitDefinition | Oneunitisdefinedastheamountofenzymerequiredtoligate50%of0.4µgofanequimolarmixofasingle-stranded5′FAM-labeled17-merRNAtothe5′phosphorylatedendofa18-merDNAwhenbothstrandsareannealedtoacomplementary35-merDNAstrandin20µLat37°Cfor30minutes. |
QualityControl |
|
Storage | -20°C. |
ebiomall.com






>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
菌体构建时,目的基因连接在T载体上,测序也正确,但是将目的基因还有载体分别双酶切后总是连接不上,将连接后产物跑核酸胶,什么也没有,不知道是什么原因?我的目的基因浓度为9ng/ul,载体回收后的浓度为6ng/ul,是因为浓度太低的原因吗?还有就是连接有目的基因的T载体双酶切后出现了三条带,这个又是什么原因呢?希望得到解答
DNA连接酶主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键最初从原核生物(大肠杆菌)分离得到的.现在生物基因工程主要是从T4噬菌体中分离得到的,
DNA连接酶:可以连接被限制酶切割开磷酸二酯键
有没有人用过NEB的Blunt/TALigaseMasterMix和InstantSticky-endLigaseMasterMix?
有没有人用过NEB的Blunt/TALigaseMasterMix和InstantSticky-endLigaseMasterMix?
有没有人用过NEB的Blunt/TALigaseMasterMix和InstantSticky-endLigaseMasterMix?
.....它说连得又快又好,想问问有木有小白鼠试过它家的这两个产品呢。。如果用过能不能请教下效果咋样呢。。我之前用Thermo的T4,属于又便宜又慢效果还可以的那类型的。。(虽然说thermo也说室温30min就ok,但是还是4度过夜了,室温30min不靠谱)
连接酶有T4噬菌体DNA连接酶、T4噬菌体RNA连接酶、大肠埃希菌DNA连接酶等。DNA连接酶可连接平端,也连接粘端。反应需有Mg2+和ATP存在,pH7.5-7.6。最适温度37℃,30℃以下活性明显下降,但考虑到被连接DNa 的稳定性和粘性末端的退火温度,一般平端连接用20-25℃,粘端连接用12℃左右。
聚合酶有DNA聚合酶(以DNA为模板合成DNA大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ,大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ大片段(Klenow大片段),T4或T7噬菌体DNA聚合酶等);RNA聚合酶(以DNA为模板合成RNA,T7或T3噬菌体RNA聚合酶);逆转录酶(以RNA为模板合成DNA,除RNA病毒中发现外,发现大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ和Taq DNA聚合酶都有逆转录活性)。
大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ具有5′→3′聚合酶活性和5′→3′,3′→5′外切酶活性。Klenow片段是DNA聚合酶Ⅰ被枯草杆菌酶作用产生的一个大片段,有5′→3′聚合酶和3′→5′外切酶活性,无5′→3′外切酶活性。可用于缺口翻译(Nick translation)法标记核酸,也可用于DNA序列测定,修补DNA链等。向左转|向右转


暂无品牌分类