【求助】invitrogen的T4连接酶
2021-07-31
问题描述：
大家有用过Invitrogen的T4连接酶吗？说明书上是23－26度连接，一般的连接酶不都是16度吗？应该用多少度呢？另外，说明书上还说连接后为了达到更好的转化效率，应将连接反应液至少稀释5倍再转化，是这样吗？谢谢大家帮忙啊
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jcnapoleon
用户
4度冰箱过夜连接也能连上
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ninthicee
用户现在很多连接酶都建议在室温，而且10－15min。按照说明书来，问题不大的。至于是否要稀释，你可以多转化几管啊，，稀释的，没稀释的就可以保证没有问题了啊。一般我是20ul体系，取5－10ul直接转化的。
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jlcccs
用户学习了，马上要做呢
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herrich1984
用户我试过稀释和没稀释的。稀释5倍的有50个左右菌，没稀释的就1个。
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biocrysrain
用户照着说明书做吧，她们的T4还是很好用的
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whbf5
用户我们一般都只做5微升的体系，16度过夜是效果较好的，实在不行的室温过夜也可以，快速连接体系的话就不要链接太长时间。
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