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实验室常用贮存液的配制参数_常用试剂_化学试剂培养基_仪器设备_食品...
来自 : mayitao
货号:M0202S
供应商:北京益奥柏科贸有限公司
数量:100支
英文名:T4DNALigase
保质期:厂家标准
保存条件:-20
规格:20,000units

特性

高效连接粘性末端和平末端
T/A克隆
dsDNA切刻修复
构建高丰度克隆文库
RNA和DNA的连接 

概述

该酶催化双链DNA或RNA上相邻的5´-磷酸末端和3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平齐末端或粘性末端之间的连接,还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切刻。

来源

纯化自 E.coli C600pcl857pPLc28lig8。

反应条件

1XT4DNA连接酶反应缓冲液
[50mMTris-HCl(pH7.5@25℃),10mMMgCl2,10mMDTT,1mMATP]推荐DNA5´末端浓度为0.1-1.0μM,16℃温育。

热失活

65℃加热10分钟。

质保声明

T4DNA连接酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆www.neb.com 或 www.neb-china.com

单位定义(粘性末端活性单位)

1单位指在20μl1XT4DNA连接酶反应缓冲液中,16℃反应条件下,30分钟能使50%的经HindIII消化的λDNA片段[5´端浓度为0.12μM(300μg/ml)]连接所需的酶量。

浓度

400,000units/ml和2,000,000units/ml。

注意事项

与 E.coli DNA连接酶需要NAD作辅因子不同,T4DNA连接酶的辅因子是ATP。若需稀释T4DNA连接酶,推荐使用50%甘油贮存缓冲液(稀释缓冲液A,NEB#B8001)稀释,-20℃保存。如稀释后马上使用,也可用1XT4DNA连接酶反应缓冲液稀释。
只要在反应体系中补加1mMATP,连接反应就可以在NEB提供的四种限制性内切酶缓冲液或在T4DNA多聚核苷酸激酶反应缓冲液中进行。

温馨提示:不可用于临床治疗。
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