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T4DNA连接酶作为工具酶种重要的连接酶，本文将就其来源、用途和保存等方面对其进行详细介绍。
一、简介
T4DNA连接酶催化dsDNA平末端或粘性末端相邻核苷酸的5-磷酸和3-OH的连接反应。依赖ATP将ssRNA或ssDNA连接到ssRNA或ssDNA分子的5-P末端，还能将[5-32P]核苷酸、3，5-双（磷酸）加入到RNA上，但不能和全单链核苷酸连接。本公司所生产T4DNA连接酶比一般T4DNA连接酶连接效率要高2-4倍。
二、来源
大肠杆菌
三、产品用途
·催化dsDNA分子平端或粘性末端间的连接
·连接单链核苷酸
·标记RNA3-末端
·环化RNA和DNA寡聚核苷酸
·克隆长片段CDNA
组成：150mMTris-HCl(pH7.8)
50mMMgCl2
50mM二硫苏糖醇（DTT）
5mMATP
注意事项:
1、二硫苏糖醇用于保持酶的活性。在10倍浓缩的缓冲液中，DTT在冷冻时有可能析出。如果出现这种情况，将缓冲液涡旋，使沉淀重新溶解即可，对实验结果无影响。
2、为防止ATP和DTT的降解，缓冲液应小量分装，-20℃保存。
五、酶活性定义：
0.01个Weiss单位T4DNA连接酶定义为16℃、20分钟催化连接1微克LamBDaDNA中95%以上的HindIII片段所需的酶的量。
六、保存条件：
T4DNA连接酶保存于下述缓冲液中，－20℃保存。
保存缓冲液组成：
10mMTris-HCl(pH7.0
50mMKCl
1mM二硫苏糖醇（DTT）
0.1mMEDTA
T4DNA连接酶工具酶
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发布于 ： 2021-07-18
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