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长时间反应时内切酶的活性保持情况因酶而异。本表中列出了在16小时内完全酶解底物DNA所需的最小酶量。实验方法:在50µl的反应体系中,分别加入1µg的单位定义底物DNA和1.00、0.50、0.25和0.13个单位的内切酶,37°C(或要求的最适温度)反应16小时。用琼脂糖凝胶电泳法来确定在1 查看更多>
试剂代理品牌有:twistdx、enzymatics、echelon、chromotek、biomatik。 单位注册资金未知。 马上拨打电话 产品参数 价格面议 数量1.00 0 产品规格3,0... 查看更多>
EnzymeSupplied NEBuffer% Activity in NEBuffers1234Aat II405050100Acc I4505010100Acc65 I3 + BSA107510025Aci I3255010050Acl I4 + BSA10100100Afe I *SE-Y255025100A 查看更多>
MBI内切酶是由上海三踏生物科有限公司代理或销售的MBI品牌的试剂,产品来源于美国。上海三踏生物科有限公司是中国最权威的MBI内切酶试剂销售服务商之一,在上海等地方销售MBI内切酶试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业MBI内切酶仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的MBI内切酶产品 查看更多>
上海康朗生物科技有限公司在发布的TaqαI限制性内切酶供应信息,浏览与TaqαI限制性内切酶相关的产品或在搜索更多与TaqαI限制性内切酶相关的内容。 查看更多>
M16 Medium (Protocol obtained from Karen Austen-Reed from SS Tan Laboratory, Anatomy Department)For oocyte maturation and routine culture of mouse embryos, M16 查看更多>
核酸内切酶(endonuclease)在核酸水解酶中,为可水解分子链内部磷酸二酯键生成寡核苷酸的酶,与核酸外切酶相对应。从对底物的特异性来看,可分为DNaseⅠ、DNaseⅡ等分解DNA的酶;RNase、RNaseT1等分解RNA的酶。一般来说,大都不具碱基特异性,但也有诸如脾脏RNase、RNaseT1等或限制性内切酶那种能够识别并... 查看更多>
Asymmetric sequences are indicated by *.Single letter code:R = G or A;Y = C or T;W = A or T;M = A or C;K = G or T;S = C or G;H = A, C or T;V = A, C or G;B = C, 查看更多>
四川展峥生物科技有限公司在发布的限制性内切酶 DpnI(用于表观遗传分析)供应信息,浏览与限制性内切酶 DpnI(用于表观遗传分析)相关的产品或在搜索更多与限制性内切酶 DpnI(用于表观遗传分析)相关的内容。 查看更多>
限制酶图谱(restriction map):同一DNA用不同的限制酶进行切割,从而获得各种限制酶的切割位点,由此建立的位点图谱有助于对DNA的结构进行分析。 限制性核酸内切酶分析技术是病原变异、毒株鉴别、分型及了解基因结构和进行流行病学研究的有效方法,对动物检疫有很重要的实用意义,尤其对区别进... 查看更多>
A. 吸附法 优点:做作条件温和、简便;成本低;载体可反复使用不足:对离子强度、pH、温度等因子敏感,故酶易损漏,且酶转载容量较小B.共价偶联法优点:载体与酶偶联的方法多样化;固定化的酶非常稳定,损漏少不足:偶联试剂对生命组织多有一定毒性;偶联条件激烈,易引起酶失效;成本较高C.交 查看更多>
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实验九DNA的酶切123
园香丁dingxiang2016-09-01

求问酶切体系为10ul,内切酶1ul,37℃水浴45min,不知道DNA产物是否完全被切开了?

所用内切酶信息如下



本人提取的RNA,准备反转录做Real-timePCR.由于引物不跨越内含子,所以为了排除基因组DNA的污染.先用DNA酶消化,可是消化了1小时,阳性对照的DNA(PCR产物)消化后跑电泳都看不到带了,说明DNA酶好使啊.可是为何消化后的RNA还能扩出目的片段呢?还有痕量的残留?????
郁闷啊,
也许如mxBDna2003所说:"TAQ(除了具有DNA指导的)还有RNA指导的DNA聚合酶功能,所以是可以直接从RNA中P出来的!"


看了园子里不少关于这类的帖子,RT时被DNA困扰的人还真不少啊------烦请高手指点.大家讨论.
看文献,看到其复苏脐带血单个核细胞,去除DMSO后,用含有DNA酶的培养液孵育了一会。请问人在复苏细胞的时候也有类似的做法,或者知道这样做的具体原因吗?
感谢赐教~!
最近准备做southern,但是提取的苜蓿基因组dna酶切总是不尽如人意
同一管dna有的酶可以切开,比如dra1,ecoR1,Hind111
有的酶又完全不能切动,如BamH1,sac1,xba1,xho1,pst1
请问高手这是什么原因??
DNA即脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid),其基本组成单位是核苷酸,而核苷酸又是有核酸,戊糖和磷酸组成(DNA中的戊糖为脱氧核糖)。DNA水解酶为一类可以将组成DNA分子的脱氧核糖核苷酸之间的连接(3’,5’-磷酸二酯键)打开的酶。具体包括:DNA聚合酶α/引发酶(引发及后随链的部分合成),DNA聚合酶δ(DNA复制主要酶),增殖细胞核抗原(滑动夹子,与合成连接性有关),拓扑异构酶(母链DNA拓扑异构化),解(螺)旋酶(能解开DNA双螺旋),单链DNA结合蛋白及复制蛋白(单链DNA结合作用),复制因子C(参与滑动夹子的装配),DNA连接酶(连接冈崎片段及参与修复),核酸酶(去除RNA引物),侧翼核酸内切酶(去除RNA引物)。总体作用是在DNA复制过程中发挥的,在DNA复制过程中起到关键性的作用。
各位大侠小弟有一事很是郁闷,请各位赐教!
我做的双酶切反应,酶分别是宝生物的BamHI和XhoI,双酶切体系是:载体及目的片段分别是30ul,通用buffer4ul,XhoI、BamHI各2ul,无核酶水2ul,总体积40ul。载体和目的片段都是经37度酶切6h。载体上面这两个酶切位点的距离是6个碱基,目的片段是由pcr反应获得的,从puc19中p出来的,两端带有这两种酶的酶切位点,酶切完成后,做连接反应,体系如下:目的片段(全长1441bp)4ul,无核酶水3ul,10*T4DNA连接酶缓冲液1ul,载体1ul,T4DNA连接酶1ul,总体积10ul。16度过夜。之后摇菌送沉菌测序结果回来,送了5管一个都不对。重复实验两次还是不对!
之后改为先用BanHI单切载体,体系如下:载体17ul,酶1ul,buffer2ul,总体积20ul,30度切6小时后,Promega纯化试剂盒直接纯化,完了之后再用XhoI,37度酶切6小时,体系如上,再次用promega纯化试剂盒纯化,目的片段用双酶切体系酶切,之后做连接反应,之后铺板,挑取菌落共10个,摇菌13小时,取菌液做pcr鉴定,结果10个菌落全是引物2聚体,跑出来的条带都是100bp左右。
各位老师这是怎么回事呢?为什么连接不上呢?小弟先谢过各位大哥了!
大家好,我们实验室有一种酶活为30KU每ml的Dnase1,由于其酶活太高,所以想进行稀释后使用,但是由于没有说明书,不知道如何稀释,请问应该如何稀释呢?稀释液的配方如何配制?有什么要注意的吗?谢谢
请问dna酶1和rna酶A可以用milliQ水[配制溶液吗?
配后是否应该分装,因为不能反复冻融?
多谢!

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高中生物必修二中,艾弗里实验最后一组实验为什么要加DNA和DNA酶到R型细菌里?