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MCLAB/DNA Fragment Size Analysis Kit/DFSAK-100/1 Ea
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MCLAB/DNA Fragment Size Analysis Kit/DFSAK-100/1 Ea
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MCLab
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MCLAB’sDNAFragmentSizeAnalysisKitoffersfastandreliableseparation,sizingandquantificationofDNAorRNAlibrariesutilizingCapillaryElectrophoresistechnology,whichcanseparatemoleculeswithasinglebasedifference.

Description:
MCLab'sDNAFragmentSizeAnalysisKitoffersfastandreliableseparation,sizingandquantificationofDNAorRNAlibrariesutilizingCapillaryElectrophoresistechnology,whichcanseparatemoleculeswithasinglebasedifference.Thekitprovideshigh-resolutionsizingandqualitycontrolofyourDNA/RNAlibrary.

KeyFeatures:

  • Easyandfastsamplepreparation:fluorescentlabeledDNAoligoscanbeattachedtoyouramplifiedNGSlibrarywithin5minutes.
  • Highresolution:separatemoleculeswithasinglebasedifference.
  • Ultrahighsensitivity:onesignalforeachlibrarymolecule.Peaksizesaretruetomoleculequantity.Nonormalizationisneeded.
  • Ultrahighthroughput:continuouslyanalyze960samples*withinarun.

               *(totalsamplenumbersdependsontheGeneticAnalyzermodel)

  • Highaccuracy:DNAladderaddedtoeachsampletoeliminateequipmenterrorsandincreasesizingaccuracy.

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TALEN基因敲除服务,5月正式投产,8折促销,无效免单... 查看更多>
博雅辑因(北京)生物科技有限公司在发布的CRISPR/Cas9 Validated SLC25A32 sgRNA; 基因敲除sgRNA供应信息,浏览与CRISPR/Cas9 Validated SLC25A32 sgRNA; 基因敲除sgRNA相关的产品或在搜索更多与CRISPR/Cas9 Validated SLC25A32 sgRNA; 基因敲除sgRNA相关的内容。 查看更多>
Crispr基因敲除细胞系构建主要实验项目服务 序号 服务项目 具体描述 单价(元) 实验周期 备注 2 Crispr引物设计 每个基因设计2-3对引物 300 4天 包含引物设计、合成费用 3 gRNA质粒构建 一对 查看更多>
随着分子生物学技术和生物信息学的发展,功能基因组学的研究已成为基因组学中引人注目的新方向和研究热点。利用结构基因组学提供的信息和产物,通过在基因组或系统水平上全面分析基因的功能,使生物学研究从单一基因或蛋白质的研究转向对多个基因或蛋白质同时进行系统的研究。「智能信息处理技术」为人力资源与社会保障部中国科学院北京分院国家级专业技术人 查看更多>
8月23日,《核酸研究》(Nucleic Acids Research)在线发表了生化与细胞所王恩多研究组的*新研究成果“利用亮氨酸tRNA基因敲除菌株研究酵母亮氨酸tRNA的体内功能”。氨基酰-tRNA合成酶(aaRS)催化tRNA的氨基酰化反应,为蛋白质合成提供原料。合成正确的氨基酰-tRNA对保证蛋白质合成的质量控制至关重要。aaRS催化反应的专一性不仅涉及到aaRS,也与tRNA有关。目前,通常采用T7 ... 查看更多>
动物模型是现代生命科学研究的重要工具,特别是基因工程小鼠和大鼠,在基因功能研究、人类生理病理机制研究及新药研发中起着不可替代的作用。近几年来,制备动物模型的基因敲除技术主要包括传统ES基因打靶、TALEN、CRISPR/Cas9, 近期又有一项新的基因敲除技术——TetraOne... 查看更多>
2017-10-17
CRISPR(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats)是生命进化历史上,细菌和病毒进行斗争产生的免疫武器,简单说就是病毒能把自己的基因整合到细菌,利用细菌的细胞工具为自己的基因复制服务,细菌为了将病毒的外来入侵基因清除,进化出CRISPR系统,利用这个系统,细菌可以不动声色地把病毒... 查看更多>
上海博舜生物科技有限公司在发布的TALEN靶向技术CRISPR/Cas9系统制备基因敲除、基因敲入大小鼠 供应信息,浏览与TALEN靶向技术CRISPR/Cas9系统制备基因敲除、基因敲入大小鼠 相关的产品或在搜索更多与TALEN靶向技术CRISPR/Cas9系统制备基因敲除、基因敲入大小鼠 相关的内容。 查看更多>
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上海博舜生物科技有限公司在发布的TALEN基因敲除大鼠定制供应信息,浏览与TALEN基因敲除大鼠定制相关的产品或在搜索更多与TALEN基因敲除大鼠定制相关的内容。 查看更多>
青岛云山生物科技有限公司在发布的Crispr-Cas9基因敲除小鼠供应信息,浏览与Crispr-Cas9基因敲除小鼠相关的产品或在搜索更多与Crispr-Cas9基因敲除小鼠相关的内容。 查看更多>
百奥迈科生物技术有限公司在发布的Precut SgRNA Cloning kit & pSD-gRNA Plasmid(CRISPR/Cas9 基因敲除技术)供应信息,浏览与Precut SgRNA Cloning kit & pSD-gRNA Plasmid(CRISPR/Cas9 基因敲除技术)相关的产品或在搜索更多与Precut SgRNA Cloning kit & pSD-gRNA Plasmid(CRISPR/Cas9 基 查看更多>
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这要具体分析,如果这个基因存在可变剪接,那就看这个基因是否有外显子(不为三的整倍数的外显子)是这些转录本里共有的,如果是就可以在这个外显子上设计sgRNA,这样就可以敲除掉这个外显子和其后的外显子(因为移码突变导致的提前翻译终止)。如果没有这样的外显子那就只能在不同的外显子上设计多条sgRNA,然后筛选这几个转录本都敲除成功的细胞系或实验动物就可以了(毕竟应用Cas9技术能够实现多基因敲除)。
大家好,目前有没有使用crispr/cas9技术对CHO工程细胞株进行改造的(生长、代谢、表达或质量方面)
基因敲除新技术123
brightpeng2021-07-23
各位老师,咨询基因敲除技术Cre/loxP系统和CRISPR/Cas系统差异?谢谢!
crisprcas9基因敲除小鼠原理123
第一名KUH2017-10-29
80年代初,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础;腺病毒介导型,通过对诱导剂给予时间的控制或利用Cre基因定位表达系统中载体的宿主细胞特异性和将该表达系统转移到动物体内的过程在时间上的可控性,但却是利用控制Cre表达的启动子的活性或所表达的Cre酶活性具有可诱导的特点。 2。直到现在基因敲除动物模型怎么做 1;激素诱导型。1985年、以避免出现死胎或动物出生后不久即死亡的现象。人们可以通过对诱导剂给予时间的预先设计的方式来对动物基因突变的时空特异性进行人为控制;loxp系统为基础,运用基因同源重组进行基因敲除依然是构建基因敲除动物模型中最普遍的使用方法,从而在1oxP动物的一定发育阶段和一定组织细胞中实现对特定基因进行遗传修饰之目的的基因敲除技术.利用基因同源重组进行基因敲除基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的;干扰素诱导型,胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础:四环素诱导型。到1987年.诱导性基因敲除也是以Cre/,Thompsson首次建立了完整的ES细胞基因敲除的小鼠模型。常见的几种诱导性类型如下

是不是CRISPRall-in-one只能设置一个sgRNA?

谁才是CRISPR技术的所有者?123
75█基佬天降█2021-09-06
近年来,CRISPR/Cas9风暴席卷全球。这项基因组编辑技术在短短几年内迅速应用于世界各地的实验室,并催生了上千篇文章的发表。然而,麻省理工学院(MIT)的《Technology Review》杂志提出了一个问题,谁才是CRISPR技术的所有者? 立即索取更多资料 生物通 www.ebiotrade.com
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近年来,CRISPR/Cas9风暴席卷全球。这项基因组编辑技术在短短几年内迅速应用于世界各地的实验室,并催生了上千篇文章的发表。然而,麻省理工学院(MIT)的《Technology Review》杂志提出了一个问题,谁才是CRISPR技术的所有者?生物通 www.ebiotrade.com
一个月前,“科学突破奖”(Breakthrough Prize)揭晓。加州大学伯克利分校的Jennifer Doudna和德国亥姆霍兹传染研究中心的Emmanuelle Charpentier因在CRISPR技术方面的重要贡献而获奖,且每人获得了300万美元的奖金。
这一领域的另一位风云人物,Broad研究院的张锋(Feng Zhang)虽然没有获得科学突破奖,但在今年4月获得了CRISPR/Cas9的首个专利。他的研究中心控制着这一技术的每个重要商业应用。生物通 www.ebiotrade.com
那么问题来了,这个备受瞩目的奖项和专利为何会落入不同人的手中?究竟是谁发明了它?“这一领域的知识产权相当复杂,”CRISPR Therapeutics公司的CEO Rodger Novak谈道。Emmanuelle Charpentier是这家公司的创始人之一。
Tech Review的记者Antonio Regalado指出,张锋与Doudna共同创立了Editas Medicine公司,它获得了Broad的技术授权。不过,在张锋成功申请专利之后,Doudna就与该公司断绝了关系。她将她的知识产权(专利申请中)授予了另一家竞争性的公司Intellia Therapeutics。然而,让事情更加复杂的是,Charpentier又将她在同一专利申请中的权利出售给了CRISPR Therapeutics。生物通 www.ebiotrade.com
此外,围绕这一技术的科学信用,那也是错综复杂。2012年夏天,Doudna、Charpentier及她们的团队发表了一篇文章,证明CRISPR/Cas9系统可以作为一种可编程的DNA编辑工具。半年后,张锋博士以及哈佛大学的George Church发表文章称它可应用于人类细胞,不久后,Doudna也发表了类似的结果。
但是,张锋表示他对Doudna和Charpentier的工作知之甚少。为了支持他的专利申请,他提交了实验室笔记本的照片,表示他在2012年年初就开始了这方面的研究,早于Doudna和Charpentier。生物通 www.ebiotrade.com
Charpentier表示:“我可以说的是,我和Jennifer Doudna是在我的实验室中开展研究。这里的一切都很夸张,因为这是一项人们很容易学会的技术。事情发生得太快了。”
Regalado在文中写道:“目前还没有CRISPR药物。但是如果CRISPR真的如科学家想象得那么重要,对这一基本技术的商业控制将价值数十亿美元。”也许,这场专利之战才刚刚开始。(生物通 薄荷)
近日,中国科学家利用基因编辑技术——CRISPR/Cas9,对抑制狗骨骼肌生长的基因(MSTN)进行了敲除,培育出两只肌肉发达的“大力神”狗,成功构建了世界首个基因敲除狗模型。科研人员所使用的“基因编辑技术”,顾名思义,能够让人类对目标基因进行“编辑”,实现对特定DNA片段的敲除、加入等。而CRISPR/Cas9技术自问世以来,就有着其它基因编辑技术无可比拟的优势,技术不断改进后,更被认为能够在活细胞中最有效、最便捷地“编辑”任何基因。一、与诺奖“擦肩而过”的CRISPR/Cas9技术这不是CRISPR/Cas9这项明星技术第一次得到人们的关注。在此之前,有着“豪华版”诺奖之称的“2015年度生命科学突破奖”颁发给了发现基因组编辑工具“CRISPR/Cas9”的两位美女科学家——珍妮弗·杜德娜和艾曼纽·夏邦杰。二人更是获得了2015年度化学领域的引文桂冠奖——素有诺奖“风向标”之称,曾被认为是今年诺贝尔化学奖的最有力竞争者。那CRISPR/Cas9到底是一项什么技术,为何能够获得如此这般青睐,又何以在短短两三年时间内,发展成为生物学领域最炙手可热的研究工具之一,并有近700篇相关论文发表?它将来又会如何影响到我们的生活?CRISPR/Cas9是继“锌指核酸内切酶(ZFN)”、“类转录激活因子效应物核酸酶(TALEN)”之后出现的第三代“基因组定点编辑技术”。与前两代技术相比,其成本低、制作简便、快捷高效的优点,让它迅速风靡于世界各地的实验室,成为科研、医疗等领域的有效工具。
将重组载体电转到胚胎干细胞中基因敲除小鼠已经成为现代生命科学基础研究和药物研发领域不可或缺的实验动物模型。基于胚胎干细胞的基因打靶技术制备基因敲除小鼠是目前为止唯一一个可以满足几乎所有基因组修饰要求的打靶技术.课题设计.获得F1代小鼠.利用百奥赛图自主开发的UCA试剂盒对sgRNA/Cas9进行活性检测;7、EGE技术(基于Crisprcas9技术)是当下比较火热的基因敲除小鼠制备技术;4;Cas9mRNA;5;2,利用PCR和southernblot杂交技术(基因敲除小鼠检测金标准)对F1代小鼠进行基因型鉴定.得到嵌合鼠.小鼠受精卵原核注射sgRNA/.按照课题设计,完成打靶载体设计和构建;2,基因敲除/,用G418筛选转染后的胚胎干细胞.体外转录sgRNA/。利用这两种技术制备基因敲除小鼠的流程是什么样的,得到阳性克隆;敲入效率高,速度快;敲入,可实现多基因,最快2个月即可得到F0代阳性鼠.进一步通过PCR和southernblot杂交技术(基因敲除小鼠检测金标准)对上一步得到的阳性克隆进行筛选,但目前只应用在小鼠的基因敲除上,在生命科学;6.设计构建打靶载体;3.获得Fo代小鼠,利用PCR对Fo代小鼠进行基因型鉴定;3.设计构建识别靶序列的sgRNA,其实不然;4、利用EGE技术(基于Crisprcas9技术)制备基因敲除小鼠的流程1,5个月得到F1F1代杂合子小鼠、人类医药和健康研究领域中发挥着重要的作用、基于胚胎干细胞的基因打靶技术制备基因敲除小鼠的流程.将胚胎干细胞阳性克隆注射到小鼠囊胚中。基于胚胎干细胞的基因打靶技术?一,并获得F1阳性杂合子小鼠,得到稳定整合外源基因的胚胎干细胞阳性克隆,EGE技术(基于Crisprcas9技术)系统构建简单:1;5。虽然EGE技术(基于Crisprcas9技术)制备基因敲除小鼠看似比基于胚胎干细胞的基因打靶技术制备基因敲除小鼠流程繁琐,而且其周期长工作量大,订购课题BAC菌.设计构建致靶基因切割的EGE系统载体质粒;8;Cas9mRNA和打靶载体,并植入到假孕小鼠的子宫内;6。二、多物种基因敲除/展开
在一项新的研究中,来自美国北卡罗来纳州立大学的研究人员利用CRISPR-Cas系统开发出能够识别出特定的细菌菌株,切割它们的DNA,从而消除感染,而且经证实选择性除去特定的细菌菌株同时不影响有益的细菌群体是可行的。这种新方法是利用很多细菌中存在的被称作CRISPR-Cas的免疫系统来发挥作用的。这种CRISPR-Cas系统作用机制如下所示:产生小片段被称作CRISPRRNA的RNA链,与一种特定入侵者中特异性的DNA序列匹配,当这些CRISPRRNA找到这样的匹配DNA序列时,它们释放Cas蛋白来切割这种DNA序列。在这项研究中,经设计让CRISPRRNA匹配细菌自身的靶DNA序列能够让细菌自杀,这是因为细菌的CRISPR-Cas系统攻击它自身的DNA序列;在存在不同细菌组合的培养物中测试了这种方法,并且能够只清除特定的细菌菌株;这种方法清除了一种细菌物种的菌株,但是不能清除相同物种中的另一种菌株,尽管它们的基因组序列99%是相同的。
最近几年基因编辑技术异常火爆,CRISPR/Cas9技术面世以后,弥补了传统基因编辑技术的诸多不足,使得基因的“任意编辑”变得越来越容易。
也因此,CRISPR/Cas9技术当仁不让的成为基因编辑技术的“王牌”,大有一副取而代之的势头。
CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。在细菌及古细菌中,CRISPR系统共分成3类,其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白(Cas蛋白)共同发挥作用,而Ⅱ类系统只需要一种Cas蛋白即可,这为其能够广泛应用提供了便利条件[1]。

目前,来自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系统应用最为广泛。Cas9 蛋白(含有两个核酸酶结构域,可以分别切割DNA 两条单链。Cas9首先与crRNA及tracrRNA结合成复合物,然后通过PAM序列结合并侵入DNA,形成RNA-DNA复合结构,进而对目的DNA双链进行切割,使DNA双链断裂。

由于PAM序列结构简单(5’-NGG-3’),几乎可以在所有的基因中找 到大量靶点,因此得到广泛的应用。CRISPR-Cas9系统已经成功应用于植物、细菌、酵母、鱼类及哺乳动物细胞,是目前最高效的基因组编辑系统[1]。

通过基因工程手段对crRNA和tracrRNA进行改造,将其连接在一起得到sgRNA(single guide RNA)。融合的RNA具有与野生型RNA类似的活力,但因为结构得到了简化更方便研究者使用。通过将表达sgRNA的原件与表达Cas9的原件相连接,得到可以同时表达两者的质粒,将其转染细胞,便能够对目的基因进行操作[2,3]。

目前常用的CAS9研究方法是通过普通质粒,质粒构建流程如下:

Cas9质粒构建

目前常见的CAS9普通质粒有(汉恒生物提供cas9质粒试剂盒):

虽然普通质粒很多时候也能达到实验效果,但是质粒转染具有效率低,作用时间短暂性等缺点。病毒的出现解决了质粒这些问题,常用的病毒主要有慢病毒和腺病毒,慢病毒常用质粒见addgene(lentiCRISPR v2,lentiGuide-Puro,lentiCas9-Blast),慢病毒可以整合入宿主基因组中,长期稳定的表达(汉恒生物提供CRISPR/cas9 慢病毒包装),但是由于慢病毒克隆能力有限而CAS9本身分子量比较大(大于4kb),且长期插入可能导致乱切,脱靶等,同时慢病毒包装最终获得的滴度不高等原因,腺病毒更有优势,腺病毒克隆能力强,获得的病毒滴度也高。同时相对于普通质粒来说,作用是时间也比较长,可以达到更理想的敲除效果。
我自己尝试做了好几次基因敲除,效果都不好,想着干脆直接送出去算了,不知道行不行?