ExpressionSystemsispleasedtoofferbaculovirustiteringservicestohelpourcustomersmaximizeexpressionandreproducibility.BaculovirustiteringisroutinelysetuponWednesdayswithdatadeliveryThursdayafternoonPST.Samplesshouldbereceivedby11AMWednesdaytobesetupthatweek.
Description:
Accuratetiteringofrecombinantbaculovirusisanimportantstepinproteinproductionoptimization.Ahighthroughput,flowcytometricassayisutilizedtoquantitateinfectiousbaculovirusparticlesproducedininsectcellculture,allowingforaccuratevirustiterdeterminationformultipleconditionsinlessthan24hours.Theassaydetectsthecellsurfaceexpressionofgp64afterashortincubationperiodallowingforasingleroundofinfection.Virusinfectedcellsarethenassessedbyflowcytometricanalysisforgp64expression.
Ship0.5-1mlofvirusstock(aslittleas200µlcanbetiteredwithadvancenotice)
Shipsterilealiquotsin2mlscrewcaptubesorequivalent.Shipovernightoncoldpacks.
Pleaseusetheformonthispageunderthe“TiteringServiceForm”taboratcheckout.
Shipto:
Attention:TiteringService
ExpressionSystems
25372ndStreet
Davis,CA95618
Phone:530-747-2035
Specification:
BaculovirusTiterServiceFAQ
HowmuchvirusdoIneedtoship?
Weprefer1.0mLbutcanruntheassaywith0.5mL.Ifnecessary,wecanuseaslittle200μLbutthatrequiresadvancenotice.
HowdoIneedtoshipmyvirussamples?
Samplesneedtobesterileandshouldbeideallysentincryovialsorsomeothersmallscrewcaptube.Eppendorftubesand15mLconicalsarenotappropriate.(Wehaveexperiencedcrackingof15mLconicaltubesduringshipment.)
ThesampleshouldNOTbefrozenbutshouldbeshippedovernightoncoldpacks.Forcustomersthatwouldliketosubmitmorethan10samples,werequestadvancenotice(theMondaybeforetheyship,forexample,isareasonablenotice).
HowdoIplaceanorder?
Toplaceaphoneorder,completethetiteringserviceformandphoneinpaymentbycalling5307472035.Topaybypurchaseorder,creditcardordebitcard,visittheBaculovirusTiteringServicepage
WheredoIshipmysamples?
Attention:TiteringService
ExpressionSystems
25372ndStreet
Davis,CA95618
Phone:530-747-2035
WhenwillIreceivemyresults?
TiterdataforsamplesreceivedbynoononWedareemailedThursdayafternoonPacificStandardTime.
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有战友对比过罗氏X-tremeGENEDNATransfectionReagent和lipofectamine3000的优劣吗？求解答
质粒转染一般是说DNA转染，用常用的sinofection等转染试剂就可以；
小干扰RNA（Small interfering RNA；siRNA）有时称为短干扰RNA（short interfering RNA）或沉默RNA（silencing RNA），是一个长20到25个核苷酸的双股RNA，这种RNA的转染需要用专门的RNA转染试剂。
—DNA转染试剂Polyjet-适用于普遍的哺乳动物细胞
LipoD293-适用于悬浮细胞的转染（包括昆虫细胞SF9）-对于普遍的哺乳动物细胞具有更优异的转染效率
—DNAandsiRNA转染试剂
Lipojet-适用于大多数哺乳动物细胞的转染-低毒性（无需换液）-用量少-DNA/RNA共转染（co-transfection）-效果优于Lipofectamine2000
—siRNA转染试剂
GenMute-适用于大多数哺乳动物细胞转染-低毒性（无需换液）-用量少-DNA/siRNA共转染（co-transfection）PepMute-适用于普遍的哺乳动物细胞的转染
对重复性要求不高的试验，一般没有问题的，只不过可能需要增加一些转染试剂用量了。
为了避免这个问题，推荐收到货之后，进行适当分装，用多少，拿出来多少最好。
DXY721认为：
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大，主要差别在于转染后的筛选，当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单，问题是能不能转的进去的，转染率能有多少，转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染，说明书上都有具体的操作过程，将脂质体和目的基因按比例混合，然后加到细胞悬液里就OK了，说的简单，实际上还是有一些细节要注意的，比如脂质体和目的基因混合的比例，转染的细胞数，细胞的代数，细胞的状态，有的还要求在转染的前一天传代一次，不过不要怕，这些在脂质体说明书上都有明确的说明，按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为：
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法，目前为止，悬浮细胞转染的最好方法还是电转，我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的，使用条件是电压250V，电容975uF，效果不错，不妨一用。
