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Altogen/CLBPEC Transfection Reagent (Neuroblastoma Cells)/8.0 ml(Catalog #1737)
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Altogen/CLBPEC Transfection Reagent (Neuroblastoma Cells)/8.0 ml(Catalog #1737)
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TransfectionReagentfor CLBPECCells(NeuroblastomaCells)

  • Proprietarycationiclipidsformulation
  • HightransfectionefficiencyofsmallRNA(siRNA,shRNA,miRNA),mRNA,pDNA
  • Effectiveandrobustintracellulardelivery
  • KitincludesTransfectionEnhancerreagent
  • Aprovenreagentforestablishingstablecelllines
  • DownloadinvitroCLBPECtransfectionprotocol:[PDF]
  • Download CLBPECCRISPR/Cas9transfectionprotocol:[PDF]
  • DownloadPowerPointpresentationforCLBPECcellstransfectionkit:[PPT]
  • DevelopedandmanufacturedbyAltogenBiosystems

TransfectionEfficiency:

Reagentexhibitsatleast70%transfectionefficiencyofsiRNAdelivery.TransfectionefficiencywasdeterminedbyqRT-PCR.

TransfectionProtocolandMSDS:

DownloadAltogenBiosystemsTransfectionProtocol:[PDF]

DownloadMSDS:[PDF]

CLBPEC CellLine:

Neuroblastomaisarareformofcanceroustumorthatdevelopsfromneuroblasts,foundintheadrenalglandsandalmostalwaysoccursinchildren,accordingtoSt.Jude’sHospital.Neuroblastomacomprises50%ofallcancersthatarediagnosedininfants,beingthemostcommoncancerininfantsunder12monthsofage,withthemajorityofcasesdiagnosedbyage5,aspertheAmericanCancerSociety(ACS). Sinceapproximately70%ofneuroblastomapatientsarediagnosedatalatestage,innovativetreatmentoptionsandnewapproachesarevital.Neuroblastsarecellsfoundinfetusesthatultimatelydevelopintoneurons. TheCLBPECcelllinewasestablishedfromneuroblastomacellsofapatientandisapowerfultoolforperformingtransfectionstudiesinthequesttofindaviablecureforthedisease.CLBPECcellsarewidelyusedinthestudyofcancersthataffectyoungchildren.AltogenBiosystemsprovideslipid-basedhigh-efficiencytransfectionreagentkitsfortheCLBPECneuroblastomacelllinethatisanappropriatehostforstudyingpediatricbraintumors.

Data:

CLBPEC Transfection Kit

Figure1.GAPDmRNAlevelswerequantifiedusingreal-timeRT-PCRintheCLBPECcellstransfectedwithsiRNAstargetingGAPDornon-silencingsiRNA.Forty-eighthourspost-transfection,thecellswereharvestedandanalyzedbyreal-timeRT-PCRforGAPDmRNAexpressionlevels.Datawerenormalizedagainstthe18SrRNAsignal.Controlsampleswereeithermock-transfectedoruntreated.Valuesarenormalizedtountreatedsample.Dataaremeans±SD(n=5).

CLBPEC-cells-transfection-protocol

Figure2.ProteinexpressionofGAPDHinCLBPECcells.DNAplasmidexpressingGAPDHorsiRNAtargetingGAPDHweretransfectedintoCLBPECcellsfollowingAltogenBiosystemstransfectionprotocol.At72hourspost-transfectionthecellswereanalyzedbyWesternBlotforproteinexpressionlevels(normalizedbytotalprotein,10µgoftotalproteinloadedpereachwell).Untreatedcellsusedasanegativecontrol.

RequestaQuotefor
CLBPECTransfectionReagent

AltogenBiosystems:
AltogenBiosystemsprovidespre-optimizedtransfectionkitsandelectroporationproductsforlifesciencesandcancerresearch.Transfectionprotocolsareoptimizedforindividualcancercelllines.AltogenBiosystemsdevelopedtwotypesofinvivodeliverykits(animaltransfection):1)Tissue-targetedreagents(deliveryofproteins,DNA,andRNAintoliver,pancreas,orkidneytissues),and2)Broadrangeinvivobiodistributionreagents(PEG-Liposomebasedreagent,Nanoparticle-basedinvivoreagent,Lipid-basedtransfectionkit,andPolymer-basedkit).Advancedformulationofreagentsandoptimizedtransfectionprotocolsprovideefficientintracellulardeliveryofproteins,DNA,mRNA,shRNA,siRNA,andothernegativelychargedbiomoleculesin vitroandinvivo.Readmore abouttransfectiontechnologyatAltogen’sTransfectionResource.

AltogenResearchServices:

AltogenLabsprovidesGLP-compliantcontractresearchstudiesforpre-clinicalresearch,INDapplications,anddrugdevelopment.BIOLOGyCROservices include:Xenograftmodels(30+),developmentofstablecelllines,ELISAassaydevelopment,cell-basedandtissuetargetedRNAistudies,safetypharm/toxassays,andotherstudies(visitAltogenLabs.com).

VolumeOptions:

  • 0.5ml(Catalog#1735)
  • 1.5ml(Catalog#1736)
  • 1.5mlCRISPR(Catalog#2131)
  • 8.0ml(Catalog#1737)

AltogenBiosystems是一家开发和制造用于生命科学研究,药物发现和开发的转染试剂盒的生物技术公司。转染试剂盒针对特定癌细胞系和原代细胞培养进行了优化,可将生物分子有效递送到靶组织中。通过先进的试剂配方和优化的转染方案实现体外(癌细胞系)和体内(动物组织靶向试剂、癌细胞系)递送货物分子,包括质粒DNA,各种类型的RNA(mRNA,siRNA,shRNA,microRNA),蛋白质和小分子研究。 


Altogen生命科学公司致力于研发,生产和销售特定细胞系的转染试剂,用于细胞间生物分子的传递,并通过对转染试剂类型的设计将siRNA和质粒DNA有效地转入不同的细胞系和原代细胞内。Altogen公司开发的聚合物,脂质体,纳米粒子为基础的转染技术分别针对分子生物学,组合化学,和细胞生物学而分别应用。Altogen定制服务提供符合GLP要求定制研究服务,包括代稳定的细胞系,细胞银行和冷冻保存,焦磷酸测序,克隆,RNA干扰(RNAi)和基因沉默服务,发展分析,siRNA文库筛选,并转染服务。稳定的肿瘤细胞株和原代细胞的产生,可以是非常昂贵和费时。该公司的细胞培养科学家的细胞株的选择,无论是利息或shRNA表达载体的稳定表达的基因改造。标准的RNAi技术服务,包括设计与合成的siRNA的利益,验证siRNA的沉默效率,siRNA转染条件的优化,使高效的基因沉默细胞系或原代培养细胞的靶基因。转染培养细胞的瞬时或稳定的引入外源性分子和遗传物质(即RNA或DNA),通常是在生物实验室用来研究基因功能,基因表达的调节,生化映射,突变分析,和蛋白质的生产。科学家利用各种载体分子,这种分子,使质粒DNA(PDNA),信使RNA(mRNA),短干扰RNA(siRNA),小分子RNA(miRNA)的,并进入肿瘤细胞株和原代细胞的蛋白质的基因交付。不幸的是,无单提货的方法或转染试剂,可以适用于所有类型的细胞,细胞的细胞毒性和转染效率显着不同,取决于试剂,协议,并正在利用细胞类型。Altogen生物系统公司提供超过60种类型的细胞的预优化转染试剂盒。纳米粒子,脂质和聚合物基ALTOGEN®在体内转染试剂,使交付功能的RNA和DNA分子在体内。PEG脂质体在体内输送系统减少由于PEG修饰的先天免疫反应,并提供高效的siRNA转染的DNA,并在体内的蛋白质。由科学“杂志(2010年12月17日):PEG脂质体在体内转染试剂盒siRNA的特色Altogen生物系统功能的特定细胞系转染试剂盒


120+细胞转染试剂和活体组织靶向试剂盒制造商AltogenBiosystems是一家生物技术公司,开发和制造用于生命科学研究、药物发现和开发的转染试剂盒。Altogen®体内转染试剂可有效地将生物分子导入靶组织。细胞转染试剂盒针对特定的癌细胞系和原代细胞进行了优化。通过先进的试剂配方和优化的转染方案实现货物分子(DNA、RNA、蛋白质)的高效传递。AltogenBiosystems利用高分子化学、分子和细胞生物学的专业知识,开发了新的体内外给药技术。转染是将外源分子导入培养细胞中,常用于研究基因功能、基因表达调控、生化定位和蛋白质生产。不幸的是,由于细胞毒性和转染效率的差异很大,并且取决于所使用的试剂、方案和细胞类型,因此没有一种单一的传递方法或转染试剂可应用于所有类型的细胞。AltogenBiosystems为120多个癌细胞系和原代细胞类型提供优化的转染试剂盒和电穿孔产品。体内转染试剂可实现组织靶向给药。Altogen的转染试剂盒包括用于体外(癌细胞系)和体内(用于动物研究的组织靶向试剂)转染的转染增强剂试剂和转染复合物冷凝器。Altogen实验室提供符合GLP的实验室合同研究服务。我们的生物CRO服务包括异种移植物的疗效、IND应用的pharm/tox研究和安全性测试、分析开发(ELISA、IC-50、qPCR)、90多个异种移植物动物模型、RNAi和基因沉默服务。Altogen的细胞培养科学家通过在28天内培育出稳定的细胞系,将选择的细胞系转化为稳定表达感兴趣的基因。

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METAFECTENE EASY+易操作低毒性转染试剂是由深圳市库源生物科技有限公司代理或销售的biontex品牌的试剂,产品来源于德国。深圳市库源生物科技有限公司是中国最权威的METAFECTENE EASY+易操作低毒性转染试剂试剂销售服务商之一,在深圳等地方销售METAFECTENE EASY+易操作低毒性转染试剂试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业METAFECTENE EASY+易操作低毒性转染试剂仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的METAFECTENE EASY+易操作低毒性转染试剂 查看更多>
预优化siRNA转染试剂是由上海新睿生物科技有限公司代理或销售的SignaGen品牌的试剂,产品来源于美国。上海新睿生物科技有限公司是中国最权威的预优化siRNA转染试剂试剂销售服务商之一,在上海等地方销售预优化siRNA转染试剂试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业预优化siRNA转染试剂仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的预优化siRNA转染试剂产品 查看更多>
深圳市库源生物科技有限公司一、代理德国Biontex 公司的转染试剂Biontex 公司成立于1998年,其总部位于德国慕尼黑附近的Martinsried,专注于转染试剂的研发和应用。 (一) K2® Transfection System ,Biontex最新产品全新高效的哺乳动物细胞DNA和mRNA转染工具 产品特点: 通过抑制细胞对外源DNA的免疫反应来提高转染效率,特别适用于转染人类细胞 多数情况下,比... 查看更多>
高效、低毒性siRNA转染试剂,成功转染的细胞系包括:HeLa S3, HT-1080, HT-29, CHO K1, J774, A549, BxPC3, DU145, HeLa, H1299, MCF7, MDA-MB453, hMSC, SKBR3, H9C2, NIH/3T3, COS7, 786-0, DLD-1, GM5756T, H2122, HCC193, HCT116, Huh7, IMR-32, Jurkat, MS53, PANC-1, PANC-10, SK-OV-3, SKW6. 查看更多>
Origene中国区域代理艾美捷科技——cDNA/蛋白/抗体/转染试剂 发布者:艾美捷科技发布时间:2014-01-13 分享按钮 OriGene成立于1996年,立足于收集世界上最大的人全长cDNA克隆库,将其构建在统一的表达载体内,并使其商品化作为研究工具提供给全世界的科学家。随着人类基因组全测序的完成及以基因组研究为基础的研究工具的开发,使得人们可以通过系统生物学的研究,进行药物相关靶向的鉴定。OriGene的目标是提供大量全面... 查看更多>
DharmaconFECT 转染试剂是由北京北方同正生物技术发展有限公司代理或销售的Dharmacon品牌的试剂,产品来源于USA。北京北方同正生物技术发展有限公司是中国最权威的DharmaconFECT 转染试剂试剂销售服务商之一,在北京等地方销售DharmaconFECT 转染试剂试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业DharmaconFECT 转染试剂仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的DharmaconFECT 转染试剂产品 查看更多>
博奥派克生物在发布的【EndoFectin™】转染试剂供应信息,浏览与【EndoFectin™】转染试剂相关的产品或在搜索更多与【EndoFectin™】转染试剂相关的内容。 查看更多>
2016-04-09
【正品直销,售后保障】(高效低毒转染试剂)ExFect Transfection Reagent是由南京诺唯赞生物科技有限公司代理或销售的Vazyme品牌的试剂,产品来源于南京。南京诺唯赞生物科技有限公司是中国最权威的【正品直销,售后保障】(高效低毒转染试剂)ExFect Transfection Reagent试剂销售服务商之一,在南京等地方销售【正品直销,售后保障】(高效低毒转染试剂)ExFect Transfection Reagent试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业【正品直销,售后保障】(高 查看更多>
WESTERN BLOT PROTOCOLIn a Western blot, proteins that are separated on polyacrylamide gels on the basis of size are transferred to a membrane for detection wit 查看更多>
Westernblot 实验步骤 1. 组织块称重 2. 利用液氮、研钵粉碎组织块 3. 加入RIPA缓冲液(每克组织3 ml RIPA),PMSF(每克组织30μl,10 mg/ml PMSF),利用Polytron进一步匀浆(15,000转/分*1分钟)维持4℃ 4. 加入PMSF(每克组织30μl,10 mg/ 查看更多>
后来居上---美国SignaGen转染试剂SignaGen生物技术公司于2006年成立于美国马里兰州。公司的创始人系几个来自美国国立卫生研究院(National Institutes of Health, NIH)的致力于生物医学研究的科学家。自SignaGen生物技术公司建立的第一天起, 他们就一直致力于成为美国基因转导及基因治疗领域的先驱. 目前SignaGen公司已经成功地开发出三大系列分别用于体内和体外的DNA和RNA转染试剂,... 查看更多>
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相关疾病:肿瘤癌症支气管哮喘EntransterTM-invivo是英格恩生物公司(EngreenBiosystemCo,...
荧光互作转染细胞质粒和转染试剂需要孵育
质粒转染一般是说DNA转染,用常用的sinofection等转染试剂就可以;
小干扰RNA(Small interfering RNA;siRNA)有时称为短干扰RNA(short interfering RNA)或沉默RNA(silencing RNA),是一个长20到25个核苷酸的双股RNA,这种RNA的转染需要用专门的RNA转染试剂。
转染 123
selena21122021-08-03
最近要购买转染试剂,市场上现在转染试剂的品牌和名字可谓玲琅满目,不知道如何选择,最近有汉恒生物公司的销售向我推荐他们公司的Lipofiter转染试剂免费试用装,不知道有谁用过这个公司的转染试剂呢,效果怎么样?或者大家都是用过哪些转染试剂,觉得哪种比...
试剂方面,大致下面三个组分。DNA转染试剂制备复合物需要的基础培养基或者150mM氯化钠溶液。
质粒转染细胞 实验方法123
eosrtihlear2017-10-03
如果提质粒的试剂盒没有去内毒素功能提出的质粒一般就有内毒素
转染试剂和DNA室温孵育太久会影响转染效率么?求助啊~
表面活性剂原理及应用 图文123
蚌硼遇淌╮2017-10-03
悬浮细胞NB4用哪种转染试剂比较好
DXY721认为:
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有多少,转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染,说明书上都有具体的操作过程,将脂质体和目的基因按比例混合,然后加到细胞悬液里就OK了,说的简单,实际上还是有一些细节要注意的,比如脂质体和目的基因混合的比例,转染的细胞数,细胞的代数,细胞的状态,有的还要求在转染的前一天传代一次,不过不要怕,这些在脂质体说明书上都有明确的说明,按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为:
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法,目前为止,悬浮细胞转染的最好方法还是电转,我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的,使用条件是电压250V,电容975uF,效果不错,不妨一用。

目前大多数的细胞转染实验会用到脂质体类的转染试剂,但是脂质体本身会参与细胞生理活动,引起基因表达的上调或下调。而这些作用就是脂质体造成细胞毒性的根本原因。这会对相关研究数据产生严重的干扰,甚至影响研究的结论。

由于脂质类转染试剂对细胞的毒性是由其脂质特性决定的,目前众多的研究者和生物公司将新一代转染试剂的开发聚焦在非脂质体的聚合物上,并已有一些优秀的试剂产品上市,如Engreen公司的Entranster系列转染试剂,为纳米材料,细胞毒性低,转染效率高,已逐渐取代脂质体试剂,成为各大实验室的新宠。

近期,上海公卫临床研究中心的一位研究生应用两种转染试剂Turbofecttransfectionreagent(Thermo)和EntransterTM-R4000(Engreen)进行了一次RNA转染比较。比较情况如下:

实验方法

转染试剂:Turbofecttransfectionreagent(Thermo)和EntransterTM-R4000(EngreenBiosystemCo,Ltd)

待处理细胞:humanCD8+T细胞

1.针对Turbofect转染的方法

每孔培养体积均为100μL,细胞数目在105左右。

取0.5μLagomir,加入9.5μL无血清RPMI1640,充分混匀;

取0.2μLTurbofecttransfectionreagent和agomir稀释液充分混合。

转染复合物制备完成;混匀后室温下孵育15-20分钟,直接取10μL加入已铺好细胞的孔中,继续培养24h收取细胞,用PBS洗涤3次以上,以备RNA抽提。

转染Mix的配制:100nMago/N.C.:(0.5μLagomir+0.2μLTurbofect+9.3μL无血清的RPMI1640)×2.5=1.25+0.5+23.25

2.EntransterTM-R4000转染

每孔培养体积均为100μL,细胞数目在105左右。

取0.5μLagomir,加入9.5μL无血清RPMI1640,充分混匀,制成10μLagomir稀释液;

取0.25μLEntransterTM-R4000,然后加入9.75μL无血清稀释液体,充分混匀,制成10μLEntransterTM-R4000稀释液;

将EntransterTM-R4000稀释液和agomir稀释液充分混合(可用振荡器或加样器吹吸10次以上),室温静置15分钟。

转染复合物制备完成;

将20μL转染复合物加入孔中的细胞悬液中,前后移动培养皿,混合均匀;

转染后6h观察细胞状态,并更换培养基,继续培养24h后收取细胞,用PBS洗涤3次以上,以备RNA抽提。

转染Mix的配制:100nMago/N.C.:(0.5μLagomir+9.5μL无血清的RPMI1640)×2.5=1.25+23.75;Etranster稀释液:(0.25μLEtranster+9.75μL无血清的RPMI1640)×5=1.25+48.75(室温静置5分钟),取20μL至ago和N.C.管中,室温静置15分钟。

实验结果

结论:从目的miRNA表达水平的检测结果来看,转染24h后,英格恩生物公司(EngreenBiosystem)的EntransterTM-R4000(ago/NC:422912倍)转染试剂的效果优于Turbofect转染试剂(ago/NC:285870倍)。

讨论:从实验结果来看,英格恩生物公司(EngreenBiosystem)的EntranstenTM-R4000(ago/NC:422912倍)转染试剂的效果优于Turbofect转染试剂(ago/NC:285870倍)。EntransterTM-R4000是英格恩生物(EngreenBiosystem)最新研发合成的针对siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的转染试剂。EntransterTM-R4000不仅可以转染小RNA,而且针对mRNA等长链RNA优化。该试剂可将RNA导入多种细胞系,包括原代细胞和悬浮细胞。无论有无血清、抗生素存在均可获得很高的转染效率。


脂质体的转染毒性是最大的,很明显,那么多的细胞死亡是由于转染的细胞毒性导致的。对于这一点我有两个建议,一个是减少DNA的用量,我一般做转染,对于任何细胞,只要是12孔板,一般都是用1ugDNA,这个量绝对够了。,因为质粒转染进入细胞的本质,和病毒感染没区别,质粒的各种元件会从宿主细胞内抢夺细胞机器大量开始转录翻译你的目的蛋白,在这个过程中会产生大量的没有正确折叠蛋白,这些异常折叠蛋白进一步引起ER stress导致细胞凋亡。因此你用DNA太多,本身就有细胞毒性。另外就是脂质体本身的毒性。事实上,对于293系的细胞系,最好用的是PEI这种东西。毒性小,转染效率高,一般对293系列的细胞系可以轻易达到80%。polyscience有粉末买,买回来后直接在分子纯度的水里配置成1ug/uL的溶液,和你的质粒按照1ug DNA/6ug PEI对293进行转染。
而且直接使用自制的PEI非常便宜,在293上远比商品化的脂质体要好。

另外,如果你们实验室确实钱多,不怕花钱,建议你取用Promega的FugenHD,那个转染效率比脂质体更好,而且毒性小,至于价格。。。。。。。。。。。也更高。。。。。。。。。

另外,你说漂浮的细胞有表到GFP,那个不一定是真的GFP,很多时候
Signagen转染试剂(transfectionreagent)
—DNA转染试剂Polyjet-适用于普遍的哺乳动物细胞

LipoD293-适用于悬浮细胞的转染(包括昆虫细胞SF9)-对于普遍的哺乳动物细胞具有更优异的转染效率

—DNAandsiRNA转染试剂
Lipojet-适用于大多数哺乳动物细胞的转染-低毒性(无需换液)-用量少-DNA/RNA共转染(co-transfection)-效果优于Lipofectamine2000
—siRNA转染试剂
GenMute-适用于大多数哺乳动物细胞转染-低毒性(无需换液)-用量少-DNA/siRNA共转染(co-transfection)PepMute-适用于普遍的哺乳动物细胞的转染