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Altogen/DU145 Transfection Kit (Prostate Carcinoma Cells)/1.5 ml CRISPR/2140
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Altogen/DU145 Transfection Kit (Prostate Carcinoma Cells)/1.5 ml CRISPR/2140
品牌 / 
Altogen Labs
货号 / 
2140
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Transfection Reagent for DU145 Cells (Prostate Carcinoma Cells, HTB-81)

  • Proprietary cationic lipids formulation
  • High transfection efficiency of small RNA (siRNA, shRNA, miRNA), mRNA, pDNA
  • Effective and robust intracellular delivery
  • Work in the presence of serum
  • A proven reagent for establishing stable DU145 cell lines
  • Optimized transfection protocols are adapted for use with both standard & reverse transfection methods
  • Download DU145 transfection protocol: [PDF]
  • Download DU145 CRISPR/Cas9 transfection protocol: [PDF]
  • Download PowerPoint presentation for DU145 cells transfection kit: [PPT]
  • Developed and manufactured by Altogen Biosystems

Transfection Efficiency:

Reagent exhibits at least 75% transfection efficiency of siRNA delivery. Transfection efficiency was determined by qRT-PCR.

Transfection Protocol and MSDS:

Download Altogen Biosystems Transfection Protocol: [PDF]

Download MSDS: [PDF]

DU145 Cell Line:

According to American Cancer Society, over 161,000 men are estimated to be diagnosed with prostate cancer by the end of 2017. It is the third primary cause of male cancer deaths, in the United States. Prostate cancer is the most prevalent cancer especially in older males and can be successfully cured if diagnosed early. However, when it has spread to other parts of the body, more complicated treatment is required. The DU-145 prostate cancer cell line comprises androgen independent cells with a moderate ability to metastasize. The DU-145 cell line was established from human prostate cancer cells. These cells exhibit an epithelial cell morphology and possess metastatic potential. DU-145 cells are commonly used, along with PC3 cell line, in the study of prostate cancer, which affects many people (mainly men over the age of 50). This cell line is considered one of the “classical” prostate cancer cell lines. These cells are not sensitive to hormones and fail to express prostate-specific antigen (PSA). DU-145 cells are epithelial-like adherent cells growing as monolayers. The DU-145 line is not measurably hormone sensitive. It is only weakly positive for acid phosphatase, and isolated cells form colonies in soft agar. Analyses of the cell line have revealed microvilli, tonofilaments, and desmosomes. DU-145 do not express prostate antigen but do express functional receptor activator of NF-kappaB and androgen receptor. It has been shown glucosamine suppresses proliferation of DU-145. Transfection studies carried out using established cell lines significantly aid cancer research. Altogen Biosystems offers efficient lipid-based transfection reagent kits for the DU-145 prostate cancer cell line.

Data:

DU145 Transfection Reagent

Figure 1. siRNAs targeting Lamin A/C mRNA or non-silencing control siRNA were transfected into DU-145 cells following the recommended protocol. At 48 hours post-transfection the cells were analyzed by qRT-PCR for Lamin A/C gene expression levels. 18S rRNA levels were used to normalize the Lamin A/C data. Values are normalized to untreated sample. Data are means ± SD (n=4).

DU145-cells-transfection-protocol

Figure 2. Protein expression of Lamin A/C in DU145 cells. DNA plasmid expressing Lamin A/C or siRNA targeting Lamin A/C were transfected into DU145 cells following Altogen Biosystems transfection protocol. At 72 hours post-transfection the cells were analyzed by Western Blot for protein expression levels (normalized by total protein, 10 µg of total protein loaded per each well). Untreated cells used as a negative control.

Selected in vivo transfection product citations (ALTOGEN® IN VIVO Transfection Kits used in the following publications):

  • Circulation Research. 2010 15;107(8). Kruppel-like factor-4 transcriptionally regulates … Cowan et al [PDF]
  • Hypertension. 2012 59(1):158-66. Role of uncoupled endothelial nitric oxide synthase … Gao et al [PDF]
  • Jounal of Biological Chemistry. 2012 287(4):2907. Chaperoning of mutant p53 protein … Gogna et al [PDF]
  • J Proteome Res. 2012(11) Retinal proteome analysis in a mouse model of oxygen-induced … Kim et al [PDF]
  • Mol Cell Biol. 2013 33(7). SCO2 induces p53-mediated apoptosis by Thr845 phosphorylation … Madan et al [PDF]
  • Hypertension. 2015 65(2):430-9. Neurokinin 3 receptor and phosphocholine transferase… Parchim et al [PDF]

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DU145 Transfection Kit

Altogen Biosystems:
Altogen Biosystems provides pre-optimized transfection kits and electroporation products for life science research. Transfection products are developed for individual cancer cell line and transfection protocols are optimized to enable high transfection  efficiency of biomolecules. Altogen Biosystems developed in vivo delivery products for small animal research, mouse and rat targeted tissue delivery: liver targeted, pancreas targeted, kidney targeted, PEG-Liposome-, Nanoparticle-, Lipid-, and Polymer-based in vivo transfection kits. Advanced formulation of reagents and optimized transfection protocols provide efficient intracellular delivery of biomolecules. Read more about transfection technology at Altogen’s Transfection Resource.

Altogen Labs Research Services:

Altogen Labs provides GLP-compliant contract research studies for pre-clinical research, IND applications, and drug development. Biology CRO services include: Xenograft models (30+), development of stable cell lines, ELISA assay development, cell-based and tissue targeted RNAi studies, safety pharm/tox assays, and other studies (visit AltogenLabs.com).

Volume Options:

  • 0.5 ml (Catalog #1749)
  • 1.5 ml (Catalog #1750)
  • 1.5 ml CRISPR (Catalog #2140)
  • 8.0 ml (Catalog #7038)

AltogenBiosystems是一家开发和制造用于生命科学研究,药物发现和开发的转染试剂盒的生物技术公司。转染试剂盒针对特定癌细胞系和原代细胞培养进行了优化,可将生物分子有效递送到靶组织中。通过先进的试剂配方和优化的转染方案实现体外(癌细胞系)和体内(动物组织靶向试剂、癌细胞系)递送货物分子,包括质粒DNA,各种类型的RNA(mRNA,siRNA,shRNA,microRNA),蛋白质和小分子研究。 


Altogen生命科学公司致力于研发,生产和销售特定细胞系的转染试剂,用于细胞间生物分子的传递,并通过对转染试剂类型的设计将siRNA和质粒DNA有效地转入不同的细胞系和原代细胞内。Altogen公司开发的聚合物,脂质体,纳米粒子为基础的转染技术分别针对分子生物学,组合化学,和细胞生物学而分别应用。Altogen定制服务提供符合GLP要求定制研究服务,包括代稳定的细胞系,细胞银行和冷冻保存,焦磷酸测序,克隆,RNA干扰(RNAi)和基因沉默服务,发展分析,siRNA文库筛选,并转染服务。稳定的肿瘤细胞株和原代细胞的产生,可以是非常昂贵和费时。该公司的细胞培养科学家的细胞株的选择,无论是利息或shRNA表达载体的稳定表达的基因改造。标准的RNAi技术服务,包括设计与合成的siRNA的利益,验证siRNA的沉默效率,siRNA转染条件的优化,使高效的基因沉默细胞系或原代培养细胞的靶基因。转染培养细胞的瞬时或稳定的引入外源性分子和遗传物质(即RNA或DNA),通常是在生物实验室用来研究基因功能,基因表达的调节,生化映射,突变分析,和蛋白质的生产。科学家利用各种载体分子,这种分子,使质粒DNA(PDNA),信使RNA(mRNA),短干扰RNA(siRNA),小分子RNA(miRNA)的,并进入肿瘤细胞株和原代细胞的蛋白质的基因交付。不幸的是,无单提货的方法或转染试剂,可以适用于所有类型的细胞,细胞的细胞毒性和转染效率显着不同,取决于试剂,协议,并正在利用细胞类型。Altogen生物系统公司提供超过60种类型的细胞的预优化转染试剂盒。纳米粒子,脂质和聚合物基ALTOGEN®在体内转染试剂,使交付功能的RNA和DNA分子在体内。PEG脂质体在体内输送系统减少由于PEG修饰的先天免疫反应,并提供高效的siRNA转染的DNA,并在体内的蛋白质。由科学“杂志(2010年12月17日):PEG脂质体在体内转染试剂盒siRNA的特色Altogen生物系统功能的特定细胞系转染试剂盒


120+细胞转染试剂和活体组织靶向试剂盒制造商AltogenBiosystems是一家生物技术公司,开发和制造用于生命科学研究、药物发现和开发的转染试剂盒。Altogen®体内转染试剂可有效地将生物分子导入靶组织。细胞转染试剂盒针对特定的癌细胞系和原代细胞进行了优化。通过先进的试剂配方和优化的转染方案实现货物分子(DNA、RNA、蛋白质)的高效传递。AltogenBiosystems利用高分子化学、分子和细胞生物学的专业知识,开发了新的体内外给药技术。转染是将外源分子导入培养细胞中,常用于研究基因功能、基因表达调控、生化定位和蛋白质生产。不幸的是,由于细胞毒性和转染效率的差异很大,并且取决于所使用的试剂、方案和细胞类型,因此没有一种单一的传递方法或转染试剂可应用于所有类型的细胞。AltogenBiosystems为120多个癌细胞系和原代细胞类型提供优化的转染试剂盒和电穿孔产品。体内转染试剂可实现组织靶向给药。Altogen的转染试剂盒包括用于体外(癌细胞系)和体内(用于动物研究的组织靶向试剂)转染的转染增强剂试剂和转染复合物冷凝器。Altogen实验室提供符合GLP的实验室合同研究服务。我们的生物CRO服务包括异种移植物的疗效、IND应用的pharm/tox研究和安全性测试、分析开发(ELISA、IC-50、qPCR)、90多个异种移植物动物模型、RNAi和基因沉默服务。Altogen的细胞培养科学家通过在28天内培育出稳定的细胞系,将选择的细胞系转化为稳定表达感兴趣的基因。

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细胞转染试剂polo3000 · 杰出的细胞转染效率 · 上千例的成功实证 · 稳定、批间差异小 经过近两年的开发,锐赛生物研发部门推出锐赛自主产权的最新细胞转染试剂新产品——POLOdeliverer™ 3000 Transfection Reagent,该产品极大提高目的基因导入诸多... 查看更多>
下面的步骤适用于通过Xcell Ⅱ转印系统进行蛋白印记的大部分应用。为达到最佳效果,用户的优化是必要的。I. 所需材料: •Xcell SureLock™或Xcell Ⅱ™ Mini-Cell以及Blot Module(Cat. Nos. EI10001, EI9001及EI905 查看更多>
预优化siRNA转染试剂是由上海新睿生物科技有限公司代理或销售的SignaGen品牌的试剂,产品来源于美国。上海新睿生物科技有限公司是中国最权威的预优化siRNA转染试剂试剂销售服务商之一,在上海等地方销售预优化siRNA转染试剂试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业预优化siRNA转染试剂仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的预优化siRNA转染试剂产品 查看更多>
高效、低毒性siRNA转染试剂,成功转染的细胞包括:BxPC3, H1299, MDA-MB453, PC-3, A7R5, NRK-49F, RAT2, COS7, A549, DU145, HEK293, HeLa, HeLa S3, HepG2, HT-1080, HT-29, MCF7, MCF10a, hMSC, SKBR3, 786-O, C2C12, CHO K1, ES-D3, ES-E14TG2a, H9C2, H2122, HBEC34, HCC193, HCC366, HCT116, 查看更多>
经过上千位客户近百种细胞的成功转染实验,证明DNAFect转染试剂具有如下优势:● 转染效率高       ● 细胞毒性低       ● DNA用量少... 查看更多>
Lipofectamine 2000DescriptionLipofectamine® 2000 Transfection Reagent is a versatile transfection reagent that has been shown to effectively transfect the widest variety of adherent and suspension cell lines. Researc... 查看更多>
美国Delta Biolabs品牌产品目录/代理商价格 查看更多>
上海耕欣生物科技有限公司在发布的TurboFect™体外转染试剂供应信息,浏览与TurboFect™体外转染试剂相关的产品或在搜索更多与TurboFect™体外转染试剂相关的内容。 查看更多>
转染试剂的那些事儿 查看更多>
基因转染需要一定的转染试剂将带有目的基因的载体运送到细胞内。目前,最常用的转染试剂是阳离子脂质体和阳离子聚合物,它们的特点和病毒类似,容易透过细胞膜。其中,阳离子脂质体在体外基因转染中有很高的效率,然而在体内,它迅速被血清清除,在肺组织内累积,诱发强烈的抗炎反应,这将导致高水平的毒性,因此,在很大程度上限制了其应用。由于阳离子脂质体的局限性,阳离子聚合物转染试剂日益受到重视。 查看更多>
原代细胞核酸转染仪所采用的技术是德国amaxa公司的Nucleofector™ 专利创新技术,其原理是采用独特的电场参数与细胞类型特异的转染溶液相结合的方法,直接将DNA转到细胞核内,即使是原代细胞(包括不分裂的血细胞或神经元),转染后2-4小时就能检测到转染基因的表达。转染效率高,操作简单方便。... 查看更多>
上海生博生物医药科技有限公司在发布的SunBio Trans-pri-N原代神经元细胞转染试剂供应信息,浏览与SunBio Trans-pri-N原代神经元细胞转染试剂相关的产品或在搜索更多与SunBio Trans-pri-N原代神经元细胞转染试剂相关的内容。 查看更多>
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转染 123
selena21122021-08-03
最近要购买转染试剂,市场上现在转染试剂的品牌和名字可谓玲琅满目,不知道如何选择,最近有汉恒生物公司的销售向我推荐他们公司的Lipofiter转染试剂免费试用装,不知道有谁用过这个公司的转染试剂呢,效果怎么样?或者大家都是用过哪些转染试剂,觉得哪种比...

有战友对比过罗氏X-tremeGENEDNATransfectionReagent和lipofectamine3000的优劣吗?求解答

转染试剂和DNA室温孵育太久会影响转染效率么?求助啊~
脂质体的转染毒性是最大的,很明显,那么多的细胞死亡是由于转染的细胞毒性导致的。对于这一点我有两个建议,一个是减少DNA的用量,我一般做转染,对于任何细胞,只要是12孔板,一般都是用1ugDNA,这个量绝对够了。,因为质粒转染进入细胞的本质,和病毒感染没区别,质粒的各种元件会从宿主细胞内抢夺细胞机器大量开始转录翻译你的目的蛋白,在这个过程中会产生大量的没有正确折叠蛋白,这些异常折叠蛋白进一步引起ER stress导致细胞凋亡。因此你用DNA太多,本身就有细胞毒性。另外就是脂质体本身的毒性。事实上,对于293系的细胞系,最好用的是PEI这种东西。毒性小,转染效率高,一般对293系列的细胞系可以轻易达到80%。polyscience有粉末买,买回来后直接在分子纯度的水里配置成1ug/uL的溶液,和你的质粒按照1ug DNA/6ug PEI对293进行转染。
而且直接使用自制的PEI非常便宜,在293上远比商品化的脂质体要好。

另外,如果你们实验室确实钱多,不怕花钱,建议你取用Promega的FugenHD,那个转染效率比脂质体更好,而且毒性小,至于价格。。。。。。。。。。。也更高。。。。。。。。。

另外,你说漂浮的细胞有表到GFP,那个不一定是真的GFP,很多时候

各位战友,我准备做MiRNA转染前列腺癌细胞,现在知道的转染试剂Lip2000,一种是英骏生物公司的,另外一种是赛默飞ThermoFisher),我不知道该选择哪一种转染效果好一点,有了解这方面的朋友请知道一下我,谢谢!

786-o cell用什么转染试剂
内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁(cellwall)上的特有成分,主要是脂多糖中的类脂A,在细菌被裂解时被释放出来,由于其化学结构和特性,在质粒的纯化过程中很容易混入质粒DNA一同提取出来。内毒素的存在会严重的影响质粒转染细胞的效率,此外会激活造血细胞(如B细胞、巨噬细胞等)的非特异免疫反应,造成实验的假阳性,所以转染级质粒的提取纯化必须去除内毒素。
Signagen转染试剂(transfectionreagent)
—DNA转染试剂Polyjet-适用于普遍的哺乳动物细胞

LipoD293-适用于悬浮细胞的转染(包括昆虫细胞SF9)-对于普遍的哺乳动物细胞具有更优异的转染效率

—DNAandsiRNA转染试剂
Lipojet-适用于大多数哺乳动物细胞的转染-低毒性(无需换液)-用量少-DNA/RNA共转染(co-transfection)-效果优于Lipofectamine2000
—siRNA转染试剂
GenMute-适用于大多数哺乳动物细胞转染-低毒性(无需换液)-用量少-DNA/siRNA共转染(co-transfection)PepMute-适用于普遍的哺乳动物细胞的转染

无血清,不含大量蛋白组分,不干扰DNA与转染试剂形成复合物;optimem培养基有利于细胞恢复健康状态:其中使用了 HEPES 和碳酸氢钠进行缓冲,并添加次黄嘌呤、胸苷、丙酮酸钠、L-谷氨酰胺、痕量元素和生长因子;其他因素;
荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。|||原理不同:荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光;普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量,一般是紫外光。反应要求:荧光定量对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp;普通定量可以扩增长点的片段。如果不需要检测产物分子量大小,荧光定量可以不进行电泳就对产物进行定量分析,普通pcr必须电泳。

如题,PolyplusTransfection转染试剂在中国区的代理商有哪些?求推荐1-2个靠谱的,谢谢!

想用RNAiMAX或者lipo2000转染siRNA,但是看了下转染试剂的说明书和锐博的siRNA说明书,觉得分别对siRNA的用量描述差别挺大的呀,不知道到底该参考哪个呢。

以24孔板为例在siRNA说明书中写到,siRNA终浓度是50nM的话,加入浓度为20μM的siRNA1.25ul,每孔体积是500ul,那这样的话,每孔最终siRNA的量是25pmol。

但是在RNAiMAX或者是lipo2000说明书中,一个写的每孔siRNA用量是5pmol,一个是500ng,这与siRNA厂家所提供的量相差也太多了吧。

到底该看哪一个呢。

ps.一旦siRNA的量和体积确定下来之后,转染试剂的量和siRNA1:1的加就可以了吗?

请各位大神解答。


1.siRNA说明书中的用量,红线圈出

2.RNAIMAX说明书中siRNA的用量。

3.lipo2000说明书中siRNA用量


试剂方面,大致下面三个组分。DNA转染试剂制备复合物需要的基础培养基或者150mM氯化钠溶液。