Catalogue number
PKA-094
Synonyms
Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2, EC 2.7.10.1, p185erbB2, C-erbB-2, NEU proto-oncogene, Tyrosine kinase-type cell surface receptor HER2, MLN 19, CD340 antigen, NEU, NGL, HER2, TKR1, HER-2, c-erb B2, HER-2/neu.
Introduction
HER-2/neu (erbB-2) encodes an 185-kDa orphan receptor tyrosine kinase that is constitutively active as a dimer and displays potent oncogenic activity when overexpressed. Herstatin, as the product of alternative HER-2 transcript, retains intron 8.The herstatin mRNA is expressed in normal human fetal kidney and liver, but is at reduced levels relative to p185HER-2 mRNA in carcinoma cells that contain an amplified HER-2 gene. Herstatin appears to be an inhibitor of p185HER-2, because it disrupts dimers, reduces tyrosine phosphorylation of p185, and inhibits the anchorage-independent growth of transformed cells that overexpress HER-2.
Description
ErbB2 Human Recombinant produced in Sf9 Baculovirus cells is a single, glycosylated polypeptide chain containing 638 amino acids (23-652) and having a molecular mass of 70.4kDa (Molecular size on SDS-PAGE will appear at approximately 70-100kDa). ErbB2 is fused to 8 amino acid IgG His-Tag at C-terminus and purified by proprietary chromatographic techniques.
Source
Physical Appearance
Formulation
ErbB2 protein solution (0.25mg/ml) containing Phosphate Buffered Saline (pH 7.4) and 10% glycerol.
Stability
Purity
Greater than 85.0% as determined by SDS-PAGE.
Amino acid sequence
TQVCTGTDMK LRLPASPETH LDMLRHLYQG CQVVQGNLEL TYLPTNASLS FLQDIQEVQG YVLIAHNQVR QVPLQRLRIV RGTQLFEDNY ALAVLDNGDP LNNTTPVTGA SPGGLRELQL RSLTEILKGG VLIQRNPQLC YQDTILWKDI FHKNNQLALT LIDTNRSRAC HPCSPMCKGS RCWGESSEDC QSLTRTVCAG GCARCKGPLP TDCCHEQCAA GCTGPKHSDC LACLHFNHSG ICELHCPALV TYNTDTFESM PNPEGRYTFG ASCVTACPYN YLSTDVGSCT LVCPLHNQEV TAEDGTQRCE KCSKPCARVC YGLGMEHLRE VRAVTSANIQ EFAGCKKIFG SLAFLPESFD GDPASNTAPL QPEQLQVFET LEEITGYLYI SAWPDSLPDL SVFQNLQVIR GRILHNGAYS LTLQGLGISW LGLRSLRELG SGLALIHHNT HLCFVHTVPW DQLFRNPHQA LLHTANRPED ECVGEGLACH QLCARGHCWG PGPTQCVNCS QFLRGQECVE ECRVLQGLPR EYVNARHCLP CHPECQPQNG SVTCFGPEAD QCVACAHYKD PPFCVARCPS GVKPDLSYMP IWKFPDEEGA CQPCPINCTH SCVDLDDKGC PAEQRASPLT LEHHHHHH.
Safety Data Sheet
SDS
Usage
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ProSpec的生产和研发工厂位于以色列雷霍沃特(Rehovot),专注于蛋白(重组及合成)生产研发。目前ProSpec可以提供细胞因子,生长因子,激素,信号蛋白,病毒抗原等近800种重组蛋白和100多种抗体,是世界上提供蛋白品种最多的公司之一,领先的生产工艺和规模使其可以提供毫克到克级蛋白,价格优于同类公司。 欢迎各位ProSpec客户及合作伙伴拨打全国免费电话400-6800-868转801/802/803垂询蚂蚁淘科技问询相关产品及解决方案! 代理ProSpec细胞因子、生长因子、激素、病毒抗原等重组蛋白产品简介 为便于客户选购ProSpec公司的各种重组蛋白,特将选购及使用注意事项列举如下: 1、需要考虑细胞因子、生长因子的种属来源和表达细胞选择 ProSpec可以提供多种不同种属来源的细胞因子等重组蛋白,如白介素-3,可以提供人白介素-3、小鼠白介素-3、大鼠白介素-3;而瘦蛋白Leptin则有人源、小鼠源、大鼠源、绵羊源、猪源、河豚源、马源、鸡源、狗源、兔源等十多种不同Leptin。蚂蚁淘科技推荐,建议按照作用的细胞选择相同种属的细胞因子。不过不同种属之间,蛋白同源性(序列一致性)在80%以上的基本上就可确定为有交叉活性,可推荐使用。另外,蚂蚁淘还可以向您提供ProSpec不同种属细胞表达的细胞因子,以重组人血管内皮生长因子(rVEGF)为例,ProSpec可以提供大肠杆菌表达的、酵母Yeast表达的、中国仓鼠卵巢CHO细胞、人胚肾HEK细胞表达的VEGF。可以根据您的实验需求,垂询蚂蚁淘科技有限公司为您推荐不同细胞表达的细胞因子产品。 2、ProSpec细胞因子的溶解和保存建议 ProSpec绝大部分细胞因子产品是天然成熟型蛋白,而不含有载体蛋白(CarrierProtein)或其他添加剂(如BSA、HAS或蔗糖等)。同时,ProSpec-Tany绝大部分产品通常以最少量的盐来进行冻干处理,因此易于运输和保存。所以我们建议在收到产品后,务必在开盖前先离心,使粘在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底(此时能否见到白色沉淀均属正常现象)。为获得更好生物活性和保存稳定性,请联系蚂蚁淘科技垂询相关的溶解以保存建议。 领先的生产工艺和规模使其可以提供毫克到克级蛋白,价格优于同类公司,而小包装形式的细胞因子也受广大研究生客户喜爱。作为ProSpec的中国总代理,蚂蚁淘科技有限公司为客户精选真核细胞表达、高活性的几十多种常用现货ProSpec细胞因子。更多细胞因子产品请查询蚂蚁淘网站或垂询蚂蚁淘科技有限公司。 


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食物酶:
天然存在於所有的生食物中。他们是消化酶的外部来源。食物酶在烹饪和处理过程中很容易被破坏。
一些富含酶的食物:
青木瓜内含丰富的木瓜酵素、木瓜蛋白酶、凝乳蛋白酶、胡萝卜素。
绿豆富含维生素B族、葡萄糖、蛋白质、淀粉酶、氧化酶。
生的蔬菜水果坚果种子富含各种酶,如菠菜、海藻等。
胡萝卜富含维生素C分解酶,萝卜、香瓜、菜花富含过氧化物酶,南瓜含维生素C分解酶,蕨菜含有维生素B1分解酶,菠萝和猕猴桃富含蛋白酶,无花果富含淀粉酶和蛋白酶,纳豆菌中富含淀粉酶、纤维酶。
人体内存在大量酶,结构复杂,种类繁多,到目前为止,已发现3000种以上(即多样性).如米饭在口腔内咀嚼时,咀嚼时间越长,甜味越明显,是由于米饭中的淀粉在口腔分泌出的唾液淀粉酶的作用下,水解成麦芽糖的缘故.因此,吃饭时多咀嚼可以让食物与唾液充分混合,有利于消化.此外人体内还有胃蛋白酶,胰蛋白酶等多种水解酶.人体从食物中摄取的蛋白质,必须在胃蛋白酶等作用下,水解成氨基酸,然后再在其它酶的作用下,选择人体所需的20多种氨基酸,按照一定的顺序重新结合成人体所需的各种蛋白质,这其中发生了许多复杂的化学反应.可以这样说,没有酶就没有生物的新陈代谢,也就没有自然界中形形色色、丰富多彩的生物界.
(2)不同点:①影响因素:变构调节是由细胞内变构效应剂浓度的改变而影响酶的活性;化学修饰调节是激素等信息分子通过酶的作用而引起共价修饰。②酶分子改变:变构效应剂通过非共价键与酶的调节亚基或调节部位可逆结合,引起酶分子构像改变,常表现为变构酶亚基的聚合或解聚;化学修饰调节是酶蛋白的某些基团在其他酶的催化下发生共价修饰而改变酶活性。③特点及生理意义:变构调节的动力学特征为S型曲线,在反馈调节中可防止产物堆积和能源的浪费;化学修饰调节耗能少,作用快,有放大效应,是经济有效的调节方式。
2017年11月14日,糖生物实验室在NatureCommunications发表了题为“O-GlcNAcylationofSIRT1enhancesitsdeacetylaseactivityandpromotescytoprotectionunderstress”(《在应激条件下O-GlcNAc修饰促进SIRT1的脱乙酰化酶活性和细胞保护作用》)的最新研究成果(论文链接:https://www.nature.com/articles/s41467-017-01654-6),发现了长寿基因SIRT1活性调控的新机制。
衰老是生命进程中一个不可逆的过程,延年益寿则是人类的一个普遍期望,也是衰老研究的终极目标。SIRT1是一种高度保守的NAD+依赖性的脱乙酰化酶,通过对底物蛋白的脱乙酰化抵抗各种压力应激和修复基因突变,发挥细胞保护作用;SIRT1参与了许多重要的生理和病理过程,如代谢调节、基因组稳定性、代谢应激、衰老等;在多种模式生物中,SIRT1均被证实能延长寿命,并能够通过抑制各种老年性疾病的发生发展发挥延长“健康寿命”的作用。因此,SIRT1是目前最受关注的长寿基因,SIRT1激活剂已成为医药领域研究与开发的前沿和热点。然而,机体对抗衰老时SIRT1激活的分子机制并不十分清楚。
O-GlcNAc糖基化修饰是一种细胞内普遍存在、动态可逆的蛋白质翻译后修饰现象。O-GlcNAc可以通过影响蛋白稳定性、细胞定位和酶活性等调节蛋白质功能并在生理和病理过中发挥重要作用。该研究成果首次发现了SIRT1蛋白具有O-GlcNAc修饰,且修饰位点是549位的丝氨酸。SIRT1的O-GlcNAc修饰增加其与底物蛋白的亲和力并提高SIRT1的脱乙酰化酶活性。进一步研究表明,在应激(氧化应激、代谢应激和基因毒等)条件下,细胞内SIRT1的O-GlcNAc修饰显著增加,并促进其对p53、FOXO3等靶蛋白的脱乙酰化从而发挥细胞保护作用。众所周知,卡路里限制能降低衰老相关疾病的发生和延年益寿。本研究成果表明,卡路里限制能可能通过O-GlcNAc修饰激活SIRT1而起到细胞保护作用,从而揭示了节食延年益寿的一个新的分子机制。综上所述,该研究发现了SIRT1活性调控的新机制,首次证明了O-GlcNAc修饰是SIRT1抵抗应激的分子开关,表明O-GlcNAc修饰可能成为抗衰老和老年性疾病的新靶点,为抗老年性疾病药物和长寿药物的研究开辟了新途径,具有重要的理论意义和明确的应用前景。
该研究成果由糖生物学实验室独立完成,博士研究生韩翠芳、单慧和顾玉超副教授是该论文的共同第一作者,顾玉超副教授和于文功教授是共同通讯作者。该研究由NSFC-山东省海洋科学研究中心联合基金项目(No.U1606403)、青岛海洋科学与技术国家实验室鳌山科技创新计划项目(No.2015ASKJ02)、国家自然科学基金面上项目(No.81272264)等资助。
于文功教授和顾玉超副教授长期从事糖生物学研究,发现了蛋白质的O-GlcNAc糖基化修饰促进肿瘤发生和转移并阐明了其分子机制(CancerRes.2010Aug1;70(15):6344-51;BiochimBiophysActa.2011Apr;1812(4):514-9.)。经过多年的积累,该团队已经建立了系统的O-GlcNAc糖基化修饰研究技术体系,目前正在进行O-GlcNAc修饰对肿瘤和糖尿病等重大疾病发生过程中关键蛋白的调控作用和机制研究,以期阐明相关疾病发生的机制并发现新的治疗靶点。
炎性体(inflammasome)是细胞内的一类多蛋白复合物,在炎性反应中发挥着至关重要的作用。炎性体包括半胱天冬酶-1(caspase1)、PYCARD和NALP,有时也包括半胱天冬酶-5(caspase5,也被称作半胱天冬酶-11或ICH-3)。它是在骨髓细胞(myeloidcell)中产生的,也是先天性免疫系统的一个组分。炎性体的确切组成依赖于启动炎性体组装的激活物,如双链RNA和石棉会引发不同的炎性体组成。炎性体促进炎性细胞因子IL-1β和IL-18成熟。
在一项新的研究中,来自比利时法兰德斯生物技术中心/根特大学(VIB/UGent)的LieselotteVandeWalle博士、DanielJiménezFernández以及教授MoLamkanfi研究团队对半胱天冬酶-12(caspase12)的功能产生新的认识。基于此,他们打破了这个领域对半胱天冬酶-12的固执观念:半胱天冬酶-12是炎性体的负调节物。这些新的认识为研究人员挣脱现有的研究路线和鉴定它的真正生理学功能铺平道路。相关研究结果发表在2016年6月2日那期Nature期刊上,论文标题为“Doescaspase-12suppressinflammasomeactivation?”。
研究人员也指出这将需要进行大量的“重新研究(re-researching)”。之前所谓的半胱天冬酶-12在细胞死亡、应激反应、疟疾和败血症等中的作用---引用了9000多次---必需复核,这是因为这些作用经常是基于不正确的小鼠模型得出的。
VIB/UGent教授MoLamkanfi说,“我们发现在很多情形下,对半胱天冬酶-12的研究是基于对半胱天冬酶-11(caspase11)和半胱天冬酶-12都进行基因敲除的小鼠模型开展的。因此从研究结果中推断半胱天冬酶-12的作用是不可能的。我们如今引入新的选择性半胱天冬酶-12基因敲除小鼠,这应当能够让我们追踪半胱天冬酶-12的确切功能。”
利用这些新的小鼠,Lamkanfi团队证实在体外模拟的BMDM(bonemarrow-derivedmacrophage,骨髓衍生性巨噬细胞)和体内接种的小鼠中,半胱天冬酶-12缺乏都不能增加半胱天冬酶-1激活。剔除半胱天冬酶-12也不会增强炎性体途径释放出成熟的IL-1β和IL-18。他们的发现表明不论半胱天冬酶-11的表达状态如何,半胱天冬酶-12都不会作为半胱天冬酶-1激活的生理学上负显性调节物,因而也不会作为炎性体的生理学上负显性调节物。
我的质粒抽提自DH5a大肠杆菌,用EcoRI37℃酶切2h,之前还用这个酶切条件酶切了其他质粒都会出现拖带,酶量适中没有加过量,电泳上样量在200ng左右,我以为是酶不好了,用了两个牌子的酶,都会这样,我是真不明白,为什么会有这样的拖带,哪位大神可以指教一下,感激不尽!



