
Antigen Information
- Q13705
- 93
- ACVR2B
- Human
Assay Format
- Human
- Cell Culture Supernatants
- Plasma
- Serum
- Sandwich-based
- Quantitative
Product Specifications
Introduction
Typical Data
Application Notes
- Activin R2B (ACVR2B Microplate (Item A): 96 well PCR plate coated with anti-Human Activin R2B (ACVR2B
- Wash Buffer I Concentrate (20x) (Item B): 25 ml of 20x concentrated solution
- Standards (Item C): 2 vials of recombinant Human Activin R2B (ACVR2B
- Assay Diluent A (Item D): 30 ml diluent buffer, 0.09% sodium azide as preservative. For Standard/Sample (serum/plasma) diluent
- Assay Diluent B (Item E): 15 ml of 5x concentrated buffer. For Standard/Sample (cell culture medium/urine) diluent
- Detection Affinity Reagent for Activin R2B (ACVR2B (Item F): 2 vials of a 4x concentrated solution of anti-Human Activin R2B (ACVR2B affinity reagent
- IQELISA™ Detection Reagent (Item G): 1.4ml of a 10x concentrated stock
- Primer Solution (Item I): 1.7 ml vial
- PCR Master Mix (Item J): 1.2 ml vial
- PCR Preparation buffer (Item K): 1ml vial of 10x concentrated buffer
- Final Wash Buffer (Item L): 10ml vial of 10x concentrated buffer
- Real-time PCR instrument, Bio-Rad recommended
- Precision pipettes to deliver 2 µl to 1 ml volumes
- Adjustable 1-25 ml pipettes for reagent preparation
- 100 ml and 1 liter graduated cylinders
- Absorbent paper
- Distilled or deionized water
- Log-log graph paper or computer and software for data analysis
- Tubes to prepare standard or sample dilutions
- Heating block or water bath capable of 80°C
- Prepare all reagents, samples and standards as instructed
- Add 25µl standard or sample to each well. Incubate for 2.5 hours at room temperature or overnight at 4°C
- Add 25 µl detection affinity reagent to each well. Incubate 1 hour at room temperature
- Add 25µL of IQELISA™ Detection Reagent to each well. Incubate 1 hour
- Add 15µL Primer solution 10µL of PCR master mix to each well
- Run real-time PCR
Storage/Stability
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我的质粒抽提自DH5a大肠杆菌,用EcoRI37℃酶切2h,之前还用这个酶切条件酶切了其他质粒都会出现拖带,酶量适中没有加过量,电泳上样量在200ng左右,我以为是酶不好了,用了两个牌子的酶,都会这样,我是真不明白,为什么会有这样的拖带,哪位大神可以指教一下,感激不尽!
2017年11月14日,糖生物实验室在NatureCommunications发表了题为“O-GlcNAcylationofSIRT1enhancesitsdeacetylaseactivityandpromotescytoprotectionunderstress”(《在应激条件下O-GlcNAc修饰促进SIRT1的脱乙酰化酶活性和细胞保护作用》)的最新研究成果(论文链接:https://www.nature.com/articles/s41467-017-01654-6),发现了长寿基因SIRT1活性调控的新机制。
衰老是生命进程中一个不可逆的过程,延年益寿则是人类的一个普遍期望,也是衰老研究的终极目标。SIRT1是一种高度保守的NAD+依赖性的脱乙酰化酶,通过对底物蛋白的脱乙酰化抵抗各种压力应激和修复基因突变,发挥细胞保护作用;SIRT1参与了许多重要的生理和病理过程,如代谢调节、基因组稳定性、代谢应激、衰老等;在多种模式生物中,SIRT1均被证实能延长寿命,并能够通过抑制各种老年性疾病的发生发展发挥延长“健康寿命”的作用。因此,SIRT1是目前最受关注的长寿基因,SIRT1激活剂已成为医药领域研究与开发的前沿和热点。然而,机体对抗衰老时SIRT1激活的分子机制并不十分清楚。
O-GlcNAc糖基化修饰是一种细胞内普遍存在、动态可逆的蛋白质翻译后修饰现象。O-GlcNAc可以通过影响蛋白稳定性、细胞定位和酶活性等调节蛋白质功能并在生理和病理过中发挥重要作用。该研究成果首次发现了SIRT1蛋白具有O-GlcNAc修饰,且修饰位点是549位的丝氨酸。SIRT1的O-GlcNAc修饰增加其与底物蛋白的亲和力并提高SIRT1的脱乙酰化酶活性。进一步研究表明,在应激(氧化应激、代谢应激和基因毒等)条件下,细胞内SIRT1的O-GlcNAc修饰显著增加,并促进其对p53、FOXO3等靶蛋白的脱乙酰化从而发挥细胞保护作用。众所周知,卡路里限制能降低衰老相关疾病的发生和延年益寿。本研究成果表明,卡路里限制能可能通过O-GlcNAc修饰激活SIRT1而起到细胞保护作用,从而揭示了节食延年益寿的一个新的分子机制。综上所述,该研究发现了SIRT1活性调控的新机制,首次证明了O-GlcNAc修饰是SIRT1抵抗应激的分子开关,表明O-GlcNAc修饰可能成为抗衰老和老年性疾病的新靶点,为抗老年性疾病药物和长寿药物的研究开辟了新途径,具有重要的理论意义和明确的应用前景。
该研究成果由糖生物学实验室独立完成,博士研究生韩翠芳、单慧和顾玉超副教授是该论文的共同第一作者,顾玉超副教授和于文功教授是共同通讯作者。该研究由NSFC-山东省海洋科学研究中心联合基金项目(No.U1606403)、青岛海洋科学与技术国家实验室鳌山科技创新计划项目(No.2015ASKJ02)、国家自然科学基金面上项目(No.81272264)等资助。
于文功教授和顾玉超副教授长期从事糖生物学研究,发现了蛋白质的O-GlcNAc糖基化修饰促进肿瘤发生和转移并阐明了其分子机制(CancerRes.2010Aug1;70(15):6344-51;BiochimBiophysActa.2011Apr;1812(4):514-9.)。经过多年的积累,该团队已经建立了系统的O-GlcNAc糖基化修饰研究技术体系,目前正在进行O-GlcNAc修饰对肿瘤和糖尿病等重大疾病发生过程中关键蛋白的调控作用和机制研究,以期阐明相关疾病发生的机制并发现新的治疗靶点。
DNMT3a,Dnmt3a,DNMT3A三者有何区别呢,在大鼠或者小鼠身上,用来指酶或者基因时,应该如何表达呢?谢谢
如果能分解,那小肠液中的消化酶如何大量共存,如果不能
那它如何识别其他蛋白质物质是不是消化酶?
1、洗碗用的洗洁精,含脂肪酶,能快速水解油脂,还可能含其他酶成分
2、洗头用的洗发水,含脂肪酶,能快速水解油脂,还可能含其他酶成分
3、洗澡用的沐浴露,含脂肪酶,能快速水解油脂,还可能含其他酶成分
4、洗衣用的洗衣粉或洗衣液,含有多种酶,比如脂肪酶、蛋白酶等
除了以上用的频繁外,还有一些可能用到的,
比如某些促进消化的药片,含有脂肪酶、蛋白酶、淀粉酶等
厨房用的嫩肉粉,含有蛋白酶等
蛋白酶分布广泛,主要存在于人和动物消化道中,而消化道通过口与肛门与外界相通,属于外环境或外界环境
(溶菌酶、凝血酶原等)分布在内环境
(消化)酶分布在消化道
共价调节酶(covalent regulatory enzyme) 是一类由其它酶对其结构进行可逆共价修饰,使其处于活性和非活性的互变状态,从而调节酶活性。共价调节酶一般都存在相对无活性和有活性两种形式,两种形式之间互变的正、逆向反应由不同的酶催化。磷酸化是可逆共价修饰中最常见的类型。因为信号激酶能作用于很多靶分子,通过磷酸化作用信号能被极大地放大。蛋白激酶的调节作用能被催化水解磷酸基团的蛋白质磷酸酶逆转。通过磷酸化和脱磷酸化作用,使酶在活性形式和非活性形式之间互变。
别构调节:酶分子的非催化部位与某些化合物可逆地非共价结合后发生构象的改变,进而改变酶活性状态,称为酶的别构调节。有些酶分子在空间至少有两个不同的部位,一个为催化部位,一个为调节部位。某些物质可以与这种酶的调节部位相互作用而使酶分子构象发生改变,进而使催化部位受到影响,导致酶的催化活性改变,这种现象称为酶的别构调节,或称别位调节、变构调节
那糖酵解中依赖NAD的酶不是要在线粒体内反应?

