Other protein expression and purification systems use engineered protease cleavage sites that produce amino acid extensions and often result in non-specific cleavage within the protein of interest. LifeSensors’ highly active and specific SUMOstar Protease 1 recognizes the tertiary structure of the SUMOstar tag, generating the desired N-terminus and never cleaving within your protein of interest. In addition the SUMOstar system makes purifying your protein affordable and straightforward. By linking a His6 epitope to both the SUMOstar fusion tag and SUMOstar Protease 1, the SUMOstar system allows efficient and rapid purification of untagged protein using immobilized metal affinity chromatography.
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Info
| Fusion tag | His6-SUMOstar |
| Promoter | T7 RNA polymerase |
| Selection marker | Ampicillin |
| Host | E. coli |
| DNA | Circular |
Documents
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2017年11月14日,糖生物实验室在NatureCommunications发表了题为“O-GlcNAcylationofSIRT1enhancesitsdeacetylaseactivityandpromotescytoprotectionunderstress”(《在应激条件下O-GlcNAc修饰促进SIRT1的脱乙酰化酶活性和细胞保护作用》)的最新研究成果(论文链接:https://www.nature.com/articles/s41467-017-01654-6),发现了长寿基因SIRT1活性调控的新机制。
衰老是生命进程中一个不可逆的过程,延年益寿则是人类的一个普遍期望,也是衰老研究的终极目标。SIRT1是一种高度保守的NAD+依赖性的脱乙酰化酶,通过对底物蛋白的脱乙酰化抵抗各种压力应激和修复基因突变,发挥细胞保护作用;SIRT1参与了许多重要的生理和病理过程,如代谢调节、基因组稳定性、代谢应激、衰老等;在多种模式生物中,SIRT1均被证实能延长寿命,并能够通过抑制各种老年性疾病的发生发展发挥延长“健康寿命”的作用。因此,SIRT1是目前最受关注的长寿基因,SIRT1激活剂已成为医药领域研究与开发的前沿和热点。然而,机体对抗衰老时SIRT1激活的分子机制并不十分清楚。
O-GlcNAc糖基化修饰是一种细胞内普遍存在、动态可逆的蛋白质翻译后修饰现象。O-GlcNAc可以通过影响蛋白稳定性、细胞定位和酶活性等调节蛋白质功能并在生理和病理过中发挥重要作用。该研究成果首次发现了SIRT1蛋白具有O-GlcNAc修饰,且修饰位点是549位的丝氨酸。SIRT1的O-GlcNAc修饰增加其与底物蛋白的亲和力并提高SIRT1的脱乙酰化酶活性。进一步研究表明,在应激(氧化应激、代谢应激和基因毒等)条件下,细胞内SIRT1的O-GlcNAc修饰显著增加,并促进其对p53、FOXO3等靶蛋白的脱乙酰化从而发挥细胞保护作用。众所周知,卡路里限制能降低衰老相关疾病的发生和延年益寿。本研究成果表明,卡路里限制能可能通过O-GlcNAc修饰激活SIRT1而起到细胞保护作用,从而揭示了节食延年益寿的一个新的分子机制。综上所述,该研究发现了SIRT1活性调控的新机制,首次证明了O-GlcNAc修饰是SIRT1抵抗应激的分子开关,表明O-GlcNAc修饰可能成为抗衰老和老年性疾病的新靶点,为抗老年性疾病药物和长寿药物的研究开辟了新途径,具有重要的理论意义和明确的应用前景。
该研究成果由糖生物学实验室独立完成,博士研究生韩翠芳、单慧和顾玉超副教授是该论文的共同第一作者,顾玉超副教授和于文功教授是共同通讯作者。该研究由NSFC-山东省海洋科学研究中心联合基金项目(No.U1606403)、青岛海洋科学与技术国家实验室鳌山科技创新计划项目(No.2015ASKJ02)、国家自然科学基金面上项目(No.81272264)等资助。
于文功教授和顾玉超副教授长期从事糖生物学研究,发现了蛋白质的O-GlcNAc糖基化修饰促进肿瘤发生和转移并阐明了其分子机制(CancerRes.2010Aug1;70(15):6344-51;BiochimBiophysActa.2011Apr;1812(4):514-9.)。经过多年的积累,该团队已经建立了系统的O-GlcNAc糖基化修饰研究技术体系,目前正在进行O-GlcNAc修饰对肿瘤和糖尿病等重大疾病发生过程中关键蛋白的调控作用和机制研究,以期阐明相关疾病发生的机制并发现新的治疗靶点。
有谁用碧云天的过氧化氢酶检测试剂盒,在试剂盒的准备工作中,过氧化氢的实际浓度=22.94*A240,我测出来的吸光度是3.3左右,那么乘以22.94就等于76多点,再乘以之前的稀释倍数,大约就是7600mM左右,这样跟说明书中说道的1M相差太多,感觉不对啊,稀释的肯定是没有错的,但是不知道哪里出了错,怀疑说明书就有问题呢,有人做过这个实验吗?能不能准确测出过氧化氢浓度吗?有测过的人帮忙指点一下啊,不知道应该怎么做
蛋白酶分布广泛,主要存在于人和动物消化道中,而消化道通过口与肛门与外界相通,属于外环境或外界环境
(溶菌酶、凝血酶原等)分布在内环境
(消化)酶分布在消化道
如果能分解,那小肠液中的消化酶如何大量共存,如果不能
那它如何识别其他蛋白质物质是不是消化酶?
1、洗碗用的洗洁精,含脂肪酶,能快速水解油脂,还可能含其他酶成分
2、洗头用的洗发水,含脂肪酶,能快速水解油脂,还可能含其他酶成分
3、洗澡用的沐浴露,含脂肪酶,能快速水解油脂,还可能含其他酶成分
4、洗衣用的洗衣粉或洗衣液,含有多种酶,比如脂肪酶、蛋白酶等
除了以上用的频繁外,还有一些可能用到的,
比如某些促进消化的药片,含有脂肪酶、蛋白酶、淀粉酶等
厨房用的嫩肉粉,含有蛋白酶等
DNMT3a,Dnmt3a,DNMT3A三者有何区别呢,在大鼠或者小鼠身上,用来指酶或者基因时,应该如何表达呢?谢谢

