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Lucigen/MasterAmp™ Extra-Long PCR 2X Premix 8/MHF925H/5 ml
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Lucigen/MasterAmp™ Extra-Long PCR 2X Premix 8/MHF925H/5 ml
品牌 / 
Lucigen
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MHF925H
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OptimizePCRamplificationoflongDNAampliconsupto40kb

  • Epicentre ProductFast,simpleoptimizationstartingwiththecompletekit
  • EasilyamplifyDNAtargetsupto40kblong
  • ReducePCR-inducederrorsintheselongampliconswiththishighfidelityDNApolymerasemix

TheMasterAmp™Extra-LongPCRKitisacompletesystemforsuccessfulandaccurateone-stepamplificationofDNAsequencesupto~40kb.ThekitcontainstheMasterAmp™Extra-LongDNAPolymeraseMix,aswellasnineMasterAmpExtra-LongPCR2XPreMixeswithdNTPs,buffer,andvaryingamountsofMgCl2andtheMasterAmpPCREnhancerwithBetaine.*

Werecommendfirstusingthecompletekit(Cat.No.MHF9220)totestthedifferentMasterMixExtra-Long2XPreMixes(Step1,Fig.1)witheachnewtemplateandprimersettoidentifythebestperformingone.OnePreMixwillamplifyyourlongtemplateandgiveconsistentresultsinallsubsequentamplifications(Step2,Fig.1).OncetheoptimalPreMixisidentifiedcontinuetousethatcombinationofMasterAmpExtra-Long2XPreMixandDNAPolymeraseforallsubsequentamplificationsusingthattemplateDNAandprimerset.

Figure1.TwostepstoreliableandconsistentPCRresults.

STEP1.FindtheoptimalMasterAmp™Extra-LongPCRPreMix.PerformPCRwithyourtemplate,primers,andtheninePreMixes.STEP2.UsethesameMasterAmp™Extra-LongPCRPreMixtoobtainreliable,consistentPCRofthesamesequence.
A.Amplificationofa20-kbregionoflamBDaDNAusingMasterAmp™Extra-LongPCR2XPreMixes(1-9).MasterAmp™Extra-LongPCRPreMix4producedoptimalresults.B.SubsequentPCRofa20-kblambdaDNAregionwiththesameprimerpairandMasterAmp™PreMix4gaveconsistentresults,usingtheoptimalPreMixdeterminedinStep1.

Figure2.Extra-longamplificationoflambdaDNAusingtheMasterAmp™Extra-LongPCRKit.PCRconditionswereoptimizedandMasterAmpPremix4wasselectedforPCRof1ngoflambdaDNAineachsample.Resultswereanalyzedona0.5%agarosegel.Ampliconsizeswere30kb(lane1),35kb(lane2)and40kb(lane3).LaneM,5-KbDNAladder.

*Coveredbyissuedand/orpendingpatents.

MasterAmp™Extra-LongPCRKit;Purchaseofthisproductincludesanimmunityfromsuitunderpatentsspecifiedintheproductinserttouseonlytheamountpurchasedforthepurchaser"sowninternalresearch.Nootherpatentrights(suchas5´NucleaseProcesspatentrights)areconveyedexpressly,byimplication,orbyestoppel.FurtherinformationonpurchasinglicensesmaybeobtainedbycontactingtheDirectorofLicensing,AppliedBiosystems,850LincolnCentreDrive,FosterCity,California94404,USA.

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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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PCR-SSCP法1)提取DNA同前RFLP法2)PCR扩增同前PCR-RFLP,也可加入1μCi32P-dCTP标记产物。3)非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳1.取PCR的扩增产物,加凝胶加样液3μl,95℃加热变性2min,冰浴骤冷。同位素掺入的DNA取1μl稀释10倍,加样3μl。2.取样品用微量加样器加入非变性聚丙烯 查看更多>
2017-10-23
复旦大学定量PCR国际招标公告(1)0613-174023073720/02 查看更多>
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Biotium 31000 EvaGreen qPCR和HRM荧光定量PCR染料5*1mlBiotium:GelRed(41003)、GelGreen(41005)、Biotium 31000 EvaGreen荧光定量PCR染料5*1mlEvaGreen®是一种... 查看更多>
PCR产物的电泳检测时间  一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性,不出现扩增条带  PCR反 查看更多>
1 导言小RNA(miRNAs)是一种内源性非编码蛋白的小分子RNA,它们是许多基础的细胞过程中基因表达的主要调节因子,这些过程包括细胞增殖、细胞分化以及细胞凋亡等。miRNA在肿瘤生长过程中也发挥着重要作用。一般来说,miRNA通过控制翻译过程来 查看更多>
上海英拜生物科技有限公司在发布的microRNA实验85折促销(microRNA靶基因验证,定量PCR,microRNA-Seq,microRNA靶基因分析)供应信息,浏览与microRNA实验85折促销(microRNA靶基因验证,定量PCR,microRNA-Seq,microRNA靶基因分析)相关的产品或在搜索更多与microRNA实验85折促销(microRNA靶基因验证,定量PCR,microRNA-Seq,microRNA靶基因分析)相关的内容。 查看更多>
One of responses to increased blood pressure is cardiac hypertrophy through increased size of ventricular myocardial cells leading to increased thickness of th 查看更多>
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2021-08-25
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普通的PCR大多数是定性实验,而实时荧光定量PCR则定量和定性都可以做。应用领域也不一样,普通PCR一般应用于基因组克隆、DNA测序、RNA反转录等,而实时荧光定量PCR一般应用于mRNA表达量分析、绝对定量、蛋白表达、SNP分析、阴阳性解析等领域。不是定量PCR比PCR好,而是两者应用与不同的领域,起到了不同的作用。
荧光定量PCR较普通PCR不同的一点就是可以实时检测PCR扩增产物,从而可进行绝对定量或者相对定量。
Taq聚合酶 123
嘟嘴伦02662017-10-03
Taq酶水栖热菌 Thermus Aquaticus ( Taq )离具热稳定性DNA聚合酶般用Taq酶rTaq酶LTaq酶两类LTaq酶保真性更强耐热性比rTaq酶图" class="ikqb_img_alink">
半定量RT-PCR与定量RT-PCR的区别是半定量RT-PCR操作简便,可快速推测样品中特异mRNA的相对数量;而定量RT-PCB可实时定量,较半定RT-PCB更准确。

半定量反转录-聚合酶链反应(semi-quantitative reverse transcription and polymerase Chain reaction ,SqRT-PCR)是近年来常用的一种简捷、特异的定量RNA测定方法,通过mRNA反转录成cDNA,再进行PCR扩增,并测定PCR产物的数量,可以推测样品中特异mRNA的相对数量。
定量RT-PCR(quantitative reverse transcription and polymerase Chain reaction ,qRT-PCR)是在用一步法或两步法,在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

半定量RT-PCR需要跑电泳,根据条带亮度的强弱来判断模板拷贝数的高低或者是表达量的高低,而定量RT-PCR则无需电泳可以实时监测整个PCR的全程并且由给出的Ct值及Standard Curve来判断gene拷贝数的高低。
所谓Ct值,就是最先出现超过阈值信号的那个循环数。或者说是到了第几个循环才出现超过阈值的信号。

C代表的是cycle,循环数目,T代表的是threshold,阈值。

所以表达量越少的话,需要越多的循环才能扩增出来。也就是CT值越高
般taq酶没5‘-3’外切性现些酶比TAKARAEx-Taq5‘-3’外切性主要减少错配提高保真率 再PrimerStar 另外pfu酶近用比较保真性介于ExPS间挺用扩增效率没
荧光定量PCR123
2017-10-03
这几天一岁的闺女得手足口病,医院让查这个,荧光定量是查什么的?有什么用啊?尽量说的直白一点,完全不懂啊!
本人之前尝试过用普通的Taq酶扩增2kb的条带,但是老是扩不出来。:(我想问一下各位老师有没有试过用普通的Taq酶扩长片断呢?另外还有个问题就是要是我用PrimeSTARTMHSDNApolymerase可以扩出长片断吗?谢谢。
普通的PCR大多数是定性实验,而实时荧光定量PCR则定量和定性都可以做。应用领域也不一样,普通PCR一般应用于基因组克隆、DNA测序、RNA反转录等,而实时荧光定量PCR一般应用于mRNA表达量分析、绝对定量、蛋白表达、SNP分析、阴阳性解析等领域。不是定量PCR比PCR好,而是两者应用与不同的领域,起到了不同的作用。
荧光定量PCR较普通PCR不同的一点就是可以实时检测PCR扩增产物,从而可进行绝对定量或者相对定量。

有大神做过人外周血全血miRNA的提取及后续PCR实验的吗?目前课题实验遇到瓶颈,求助大神!!!是否miRNA的PCR验证在全血做不出?必须要用血浆或者血清?目前血浆、血清也有部分样本。。。。有大神指条明路吗?

realtimeRT-PCR,测了模板CDNA浓度1800ng/ml,纯度在1.96左右,但是检测内参GAPDH,CT值都有30多,目的基因的CT更大了。请问问题在哪里,CT值大不就是因为模板量不够吗,可是现在这个浓度显然是充足的,怎么解释?

各位战友

我实验室用的是Therimosci公司的SYBR试剂盒,说明书上要求DNA的量<500ng

但是测得CDNA浓度都在1000-2000多ng/ul

我第一次没注意500ng的问题就直接加了2ulcDNA结果CT值非常高

如果按500ng算,加的就不到1ul的量了,这样CT不是更高了嘛这样加对吗??

荧光定量PCR是400什么意思