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- sequencing
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- CDNAsynthesis
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2.5mMdNTPMix,PCRGrade
Thisready-to-usedNTPMixisamixtureofallfournucleotides(dATP,dCTP,dGTP,dTTP),eachdissolvedinhighlypurifiedwaterataconcentrationof2.5mM,atpH8.3.TwomillilitersoftheMixisenoughfor500standard50µlEconoTaq®andTaqSelect™DNAPolymerasePCRreactions.Freesampleavailable.
10mMdNTPSet,PCRGrade
Thishigh-puritydNTPsetallowsyoutoformulateyourownPCRmix.Eachofallfournucleotides(dATP,dCTP,dGTP,dTTP),isprovidedinaseparatevial(750µleach),dissolvedataconcentrationof10mMinhighlypurifiedwater,pH8.3.
PLEASENOTE
SomeapplicationsinwhichLucigen’sdNTPscanbeusedmaybecoveredbypatentsissuedandapplicableintheUnitedStatesandcertainothercountries.Becausepurchaseofthisproductdoesnotincludealicensetoperformanypatentedapplication,usersofthisproductmayberequiredtoobtainapatentlicensedependingupontheparticularapplicationinwhichtheproductisused.ThePCRprocessisthesubjectofEuropeanPatentNos.201,184and200,262ownedbyHoffman-LaRoche.ThosepatentsexpiredonMarch28,2006.ThecorrespondingPCRprocesspatentsintheUnitedStatesexpiredonMarch29,2005.Itisthesoleresponsibilityofthebuyertoensurethatuseoftheproductdoesnotinfringethepatentrightsofthirdparties.
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The2.5mMdNTPMixisamixtureofallfournucleotides,eachdissolvedinhighlypurifiedwaterataconcentrationof2.5mM,atpH8.3.The10mMdNTPSetprovideseachnucleotideinaseparatevial(750µleach),dissolvedataconcentrationof10mMinhighlypurifiedwater,pH8.3.蚂蚁淘电商平台
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2018-07-16
通善 实时荧光定量PCR服务 实验技术服务基因组DNA提取服务项目材料要求服务价格获得DNA量周期细菌基因组DNA提取对数生长期的新鲜菌液1-2ml50元/样品1-2ug1-2周细胞基因组DNA提取1×106新鲜或冻存的细胞50元/样品≈10ug1-2周血液基因组DNA提取1ml新鲜或液氮冻存的样本50元/样品≈10ug1-2周组织基因组DNA提取100mg新鲜或-20度冻存的样本50元/样品≈10ug1-2周服务项目材料要求服务价格获 查看更多
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ABI7000定量PCR仪,ABIPrism7000是由上海朗赋实业有限公司代理或销售的0品牌的仪器，产品来源于美国。上海朗赋实业有限公司是中国最权威的ABI7000定量PCR仪,ABIPrism7000销售服务商之一，在上海等地方销售ABI7000定量PCR仪,ABIPrism7000已经多年。同时，生物在线为您提供众多企业ABI7000定量PCR仪,ABIPrism7000仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的ABI7000定量PCR仪,ABIPrism7000产品 查看更多
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2018-09-10
多重巢式实时荧光定量PCR呼吸道病毒及甲型流感病毒分型检测试剂是由纽罗西敏生物科技代理或销售的品牌的试剂，产品来源于。纽罗西敏生物科技是中国最权威的多重巢式实时荧光定量PCR呼吸道病毒及甲型流感病毒分型检测试剂试剂销售服务商之一，在杭州等地方销售多重巢式实时荧光定量PCR呼吸道病毒及甲型流感病毒分型检测试剂试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业多重巢式实时荧光定量PCR呼吸道病毒及甲型流感病毒分型检测试剂仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的多重巢式实时荧光定量PCR呼吸道病毒及甲型流感病毒分型检测试 查看更多
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2018-12-05
上海英拜生物科技有限公司在发布的microRNA实验85折促销（microRNA靶基因验证，定量PCR，microRNA-Seq，microRNA靶基因分析）供应信息，浏览与microRNA实验85折促销（microRNA靶基因验证，定量PCR，microRNA-Seq，microRNA靶基因分析）相关的产品或在搜索更多与microRNA实验85折促销（microRNA靶基因验证，定量PCR，microRNA-Seq，microRNA靶基因分析）相关的内容。 查看更多
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2021-08-23
枫岭国际有限公司在发布的实时荧光定量PCR仪（Smart-Q）供应信息，浏览与实时荧光定量PCR仪（Smart-Q）相关的产品或在搜索更多与实时荧光定量PCR仪（Smart-Q）相关的内容。 查看更多
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2018-10-20
Biotium 31000 EvaGreen qPCR和HRM荧光定量PCR染料5*1mlBiotium:GelRed(41003)、GelGreen(41005)、Biotium 31000 EvaGreen荧光定量PCR染料5*1mlEvaGreen®是一种... 查看更多
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2018-08-12
常用的管家基因内参照试剂盒(定量PCR)是由上海吉玛制药技术有限公司代理或销售的吉玛品牌的试剂，产品来源于上海。上海吉玛制药技术有限公司是中国最权威的常用的管家基因内参照试剂盒(定量PCR)试剂销售服务商之一，在上海等地方销售常用的管家基因内参照试剂盒(定量PCR)试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业常用的管家基因内参照试剂盒(定量PCR)仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的常用的管家基因内参照试剂盒(定量PCR)产品 查看更多
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2018-12-26
PCR－SSCP法1）提取DNA同前RFLP法2）PCR扩增同前PCR-RFLP，也可加入1μCi32P-dCTP标记产物。3）非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳1．取PCR的扩增产物，加凝胶加样液3μl，95℃加热变性2min，冰浴骤冷。同位素掺入的DNA取1μl稀释10倍，加样3μl。2．取样品用微量加样器加入非变性聚丙烯 查看更多
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2017-07-26
定量PCR（即时聚合酶链锁反应，Real-time Polymerase Chain Reaction，简称 Real-time PCR、即时PCR），又称定量即时聚合酶链锁反应（Quantitative real time polymerase chain reaction，简称 Q-PCR/qPCR/rt-qPCR、定量即时PCR、即时定量PCR），是一种在DNA扩增反应中，以萤光染剂侦测每次聚合酶链锁反应（PCR）循环后产物总量的方法... 查看更多
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2018-07-16
新年新气象，金鸡送福利，2017鸡年“鸡”及向上，然泰携手本公司实验室全体技术服务专业人士，新年大回馈，意想不到的折扣，意想不到的惊喜，还在等什么，为自己的实验室的研究工作置办一次不一样的年货吧! 关于实验室技术服务，上海然泰价格优惠、品种齐全、服务周到，你想要的，我们一定备好产品，尽我们努力的可能说到做到，让你能放心准备自己手头的实验。 酶联免疫(ELISA)技术服务 上海然泰公司——依托复旦大学，集研发、销售、实验室技术服务于一体 查看更多
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2018-07-16
实时荧光定量PCR(RealTime PCR)服务 实时荧光定量PCR(RealTime PCR)服务【相关服务：DNA测序】，DNA测序 8月2日，绿叶制药（02186.HK）母公司绿叶集团宣布收购新加坡基因测序公司Vela Diagnostics。这标志着绿叶集团正式进军精准医疗市场，而该公司的基因测序技术将与绿叶集团现有业务产生协同效应，形成从诊断到治疗的精准医疗全产业服务。绿叶集团人士告诉21世纪经济报道记者：“这家公司生产的设 查看更多
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2018-12-25
3 应用由于FQ-PCR具有高灵敏性，高特异性和高精确性的特点，目前，该项技术已被应用于病原体测定、肿瘤基因检测、免疫分析、基因表达、突变及其多态性的研究等多个领域。3.1 病原体测定由于PCR技术的问世，使得病原体检测能够快速而方便的进行。但由于 查看更多
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【求助】荧光实时定量PCR要购买哪些试剂和材料 PCR技术讨论版 ...123
子乔00KJ112021-08-09
如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要一下试剂和仪器
1.模板提取（一般为RNA）：Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop
3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBR Green Mix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBR Green，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他：除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板（Axygen反应比较好）、移液枪等，暂时就想到这么多。
1.模板提取（一般为RNA）：Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop
3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBR Green Mix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBR Green，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他：除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板（Axygen反应比较好）、移液枪等，暂时就想到这么多。
定量PCR室间质量评价可接受范围的探讨123
国安冠军AH022021-07-20
RNA 定量的程序很多， 比较用了Ribogree,Agilent BioAnalyser,spectrophotometer,Nanodrop and the BioRad Experion 来定量同样的样品。结果显示没有哪两种方法得到同样的分析数据。所以用不同的方法进行定量是不明智的。因此，我们需要用统一套定量分析方法来完成所有RNA样品的评价。
RNA 质量
RNA 质量主要包括RNA的纯度（没有蛋白质和DNA的污染）以及完整性。传统的RNA质量的评价通过分析A260/A280的比值或者对琼脂糖凝胶电泳rRNA的条带的分析。Agilent Bioanalyser/BioRad Experion 微流体毛细电泳系统也是一种较新的分析方法。Agilent的2100也是一种十分好的分析RNA质量的方法，它通过分析18S以及28S rRNA的分析图谱，通过图谱来反应RNA的量和完整性，其完整性通过完整性系数（RIN）来反应。样品的RINs在10-4之间。10代表完整的RNA，4代表没有完整的rRNA带。
由于以上的方法并非100%准确定反应mRNA的完整性，因为他们只是反应rRNA的量来间接测定mRNA的完整性。这里推荐一种方法：采用GAPDH的3’：5’分析法。
我们使用oligo dT进行逆转录，然后对逆转录的cDNA用multiplex荧光定量评价。设计三个taqman探针来定量三种相同大小的扩增产物。探针设计的位点分别位于3’；5’以及中部。扩增产物的之间的比值反应RNA的完整性。如果3’；5’的比值在1，反应较高度完整性，如果高于5说明降解。
QRT-PCR抑制物的组成
QRT-PCR抑制物严重减少了PCR的灵敏度以及热动力学反应，高度的抑制还导致假阴性的结果。
抑制物的来源：生物样品的核酸抽提以及共沉淀中的混合物，盐离子，尿素，血红素，heparin以及IgG.
是否有抑制物的评价体系：
1.通过对目的样品进行梯度稀释进行PCR扩增效率的检测
2.通过内部扩增对照来反应样品处理过程中样本的情况
3.用细菌检测临床样品的抑制
4.通过标准人工合成的扩增进行RT-PCR来反应目标检测物的抑制情况
反转录反应系统
1.RT和PCR单一酶系统
2.RT和PCR分离的酶系统
3.RNA逆转录引物的选择
引物主要有三种：
1.随机引物：随机引物，特别是6nt引物对所有的靶位点不产生十分稳定一致的结果，建议使用15nt的随机引物.
2.oligo-dT：只能用于mRNA完整的样品，特别有polyA .而且对于一些特殊的变异体以及较长的3’UTR的区域比较困难
3.特异引物：最特异最灵敏的方法。特别RNA量足够情况下建议使用此法。
RNA 质量
RNA 质量主要包括RNA的纯度（没有蛋白质和DNA的污染）以及完整性。传统的RNA质量的评价通过分析A260/A280的比值或者对琼脂糖凝胶电泳rRNA的条带的分析。Agilent Bioanalyser/BioRad Experion 微流体毛细电泳系统也是一种较新的分析方法。Agilent的2100也是一种十分好的分析RNA质量的方法，它通过分析18S以及28S rRNA的分析图谱，通过图谱来反应RNA的量和完整性，其完整性通过完整性系数（RIN）来反应。样品的RINs在10-4之间。10代表完整的RNA，4代表没有完整的rRNA带。
由于以上的方法并非100%准确定反应mRNA的完整性，因为他们只是反应rRNA的量来间接测定mRNA的完整性。这里推荐一种方法：采用GAPDH的3’：5’分析法。
我们使用oligo dT进行逆转录，然后对逆转录的cDNA用multiplex荧光定量评价。设计三个taqman探针来定量三种相同大小的扩增产物。探针设计的位点分别位于3’；5’以及中部。扩增产物的之间的比值反应RNA的完整性。如果3’；5’的比值在1，反应较高度完整性，如果高于5说明降解。
QRT-PCR抑制物的组成
QRT-PCR抑制物严重减少了PCR的灵敏度以及热动力学反应，高度的抑制还导致假阴性的结果。
抑制物的来源：生物样品的核酸抽提以及共沉淀中的混合物，盐离子，尿素，血红素，heparin以及IgG.
是否有抑制物的评价体系：
1.通过对目的样品进行梯度稀释进行PCR扩增效率的检测
2.通过内部扩增对照来反应样品处理过程中样本的情况
3.用细菌检测临床样品的抑制
4.通过标准人工合成的扩增进行RT-PCR来反应目标检测物的抑制情况
反转录反应系统
1.RT和PCR单一酶系统
2.RT和PCR分离的酶系统
3.RNA逆转录引物的选择
引物主要有三种：
1.随机引物：随机引物，特别是6nt引物对所有的靶位点不产生十分稳定一致的结果，建议使用15nt的随机引物.
2.oligo-dT：只能用于mRNA完整的样品，特别有polyA .而且对于一些特殊的变异体以及较长的3’UTR的区域比较困难
3.特异引物：最特异最灵敏的方法。特别RNA量足够情况下建议使用此法。
定量PCR为什么要用两步法而不是普通的三步法123
猴敦残72017-10-03
你这个结论并不对。两步法，三步法并没有本质区别，信号的读取都是在每一个延长结束后读取。定量PCR一开始的时候也是三步法的。
两步法，是因为设计引物的时候把退火温度设为酶的工作温度，而且定量PCR的产物都很短，需要的时候都短，所以两步法更方便。三步法的话，花的时间长，不利于快速实验。
两步法，是因为设计引物的时候把退火温度设为酶的工作温度，而且定量PCR的产物都很短，需要的时候都短，所以两步法更方便。三步法的话，花的时间长，不利于快速实验。
等温扩增是PCR的补充还是代替??来看看他们的优劣势! 123
固始县80tcTG2021-08-11
PCR相关技术问题，可搜索oneshine，在交流专区，有比较全面的技术信息，希望能帮到你
实时定量PCR时用的ROX refence 有什么作用123
旧人旧城丶捈h2021-08-19
ROX Reference Dye,可用于需要Dye的Real Time PCR扩增仪,用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR扩增仪上,用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差.并不是每次都会用到.
一般有ROX Reference Dye和ROX Reference Dye II两种,针对不同的PCR仪.一般ABI PRISM 7000/7700/7900HT和7300 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye,而7500 Real-Time PCR System和7500 Fast Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye II.其它牌子如Thermal Cycler Dice Real Time System、LightCycler 等Real Time PCR扩增仪时不必使用.
一般有ROX Reference Dye和ROX Reference Dye II两种,针对不同的PCR仪.一般ABI PRISM 7000/7700/7900HT和7300 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye,而7500 Real-Time PCR System和7500 Fast Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye II.其它牌子如Thermal Cycler Dice Real Time System、LightCycler 等Real Time PCR扩增仪时不必使用.
Taq DNA聚合酶无5′→3′外切酶活性。_123
魔蝎大帝3602021-07-26
般taq酶没5‘-3’外切性现些酶比TAKARAEx-Taq5‘-3’外切性主要减少错配提高保真率 再PrimerStar 另外pfu酶近用比较保真性介于ExPS间挺用扩增效率没
PCR和实时荧光定量PCR这两种有什么区别？希望能稍微介绍一下这...123
2021-08-03
实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
PCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。
恒温PCR和实时荧光定量PCR的不同，是不同在实时荧光定量PCR的系统中加入了荧光染料（SYBR Green 或Taqman 探针等等）。以SYBR Green为例，这种染料可以结合在双链的DNA上，当PCR不断进行时，每一次退火生成的双链DNA也在增加，荧光染料结合也越多，荧光也越强。在机器中有一个探测荧光的探头，可以定量检测荧光的强度，转换成数值。这样就可以实时记录反映体系中DNA的反应情况。
荧光PCR更有优势，因为荧光PCR灵敏度高于恒温PCR，同样价格也高一些。
PCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。
恒温PCR和实时荧光定量PCR的不同，是不同在实时荧光定量PCR的系统中加入了荧光染料（SYBR Green 或Taqman 探针等等）。以SYBR Green为例，这种染料可以结合在双链的DNA上，当PCR不断进行时，每一次退火生成的双链DNA也在增加，荧光染料结合也越多，荧光也越强。在机器中有一个探测荧光的探头，可以定量检测荧光的强度，转换成数值。这样就可以实时记录反映体系中DNA的反应情况。
荧光PCR更有优势，因为荧光PCR灵敏度高于恒温PCR，同样价格也高一些。
【求助】受体在细胞膜上是固定的数量吗？为什么有的论文可以用定...123
2021-08-21
PCR 测受体太不靠谱，mRNA的量和蛋白量不是线性关系，尤其是受体。
如果要测量细胞表面2个受体的比率，最好用流式细胞仪来测量
如果要测量细胞表面2个受体的比率，最好用流式细胞仪来测量
乙肝荧光定量pcr检测要多少钱_即问即答_家庭医生在线即问即答123
136328440802021-08-10
定量检测包括总RNA提取和纯化、（可能还需要做mRNA提取和纯化）、RT、定量PCR
还需要反转录用的引物、定量PCR用的一对引物、荧光信号源（荧光染料或荧光标记的探针，看你用什么策略来做定量PCR）
报价要看你需要服务商提供什么服务，如果你只提供实验材料，要求服务商做以上全部工作，只检测一个指标（一个基因的表达水平变化），价格大约每个样品350-500元，多一个指标大约多90元。
一般至少做一组数据两个样品嘛，所以你按1000块一组样品预算吧。
还需要反转录用的引物、定量PCR用的一对引物、荧光信号源（荧光染料或荧光标记的探针，看你用什么策略来做定量PCR）
报价要看你需要服务商提供什么服务，如果你只提供实验材料，要求服务商做以上全部工作，只检测一个指标（一个基因的表达水平变化），价格大约每个样品350-500元，多一个指标大约多90元。
一般至少做一组数据两个样品嘛，所以你按1000块一组样品预算吧。
荧光定量PCR与普通PCR相比有哪些不同?.生意经求助 123
布美男00182021-08-20
荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。|||原理不同：荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光；普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量，一般是紫外光。反应要求：荧光定量对扩增片段有较高的要求，一般为100-300bp；普通定量可以扩增长点的片段。如果不需要检测产物分子量大小，荧光定量可以不进行电泳就对产物进行定量分析，普通pcr必须电泳。结果：荧光定量可以实现精确定量，普通pcr则不行。荧光定量体现可以看到整个扩增过程，可以看到扩增效率，溶解温度，直接得到的标准曲线等，这些是普通pcr无法实现的。|||这个还真不大清楚|||貌似前者是定量，后者属于半定量。|||简单的讲PCR技术最早是用于扩增一段特异的PCR片段，用于克隆、测序等实验，后来也将其用于样本中特异的PCR片段有无或非很粗的相对定量，而荧光定量PCR技术则是为了测定样本中特异的PCR片段相对及绝对量，是一种测定特异的PCR片段含量的方式。如测定病人样本中病原体的含量、实验样本中某一特定的mRNA的含量等。前些年有人讲过普通PCR后，通过电泳也可以进行定量，其实是将PCR产物的定量与PCR样本中模板定量相混了。近两年没有人再讲这类的话了。|||引物设计是sybr定量PCR法的最大难点，机会好的话，设计一对引物就能得到很好的结果，机会不好的话7、8对引物也出不来，我就遇到过这样的问题，我在prime5.0上设计了8对引物，符合实验要求的一对也没有，我把退火温度提高到了68度也没能把引物二聚体搞定，后来我想通了，可能我这对引物把其它序列扩增出来了，而且扩增效率很高（我一个同学设计了十几对才找到一对好用的）。记住primer5.0设计出来的100%好的引物，到了定量PCR上不一定好使，这是我最大的经验。定量pCR的引物对匹配度要求不高，我现在使用的引物就有几个碱基不匹配，但实验结果很好。有一个办法可以帮助我们绕过引物设计这道坎，直接到罗氏网站上专区上找引物。罗氏网站在线有一个引物设计软件，你只要找好你目的基因的种属，输入你的片段序列就可以得到你要的引物。这个软件有很大的好处，他会自动地把你的种属序列背景扣除，最大限度地去除引物二聚体产生的可以。
pcr ct值越高是否说明表达越低,ct值越高说明表达也低,是吗？最后结...123
hnrtn4aO932017-10-03
所谓Ct值，就是最先出现超过阈值信号的那个循环数。或者说是到了第几个循环才出现超过阈值的信号。
C代表的是cycle，循环数目，T代表的是threshold,阈值。
所以表达量越少的话，需要越多的循环才能扩增出来。也就是CT值越高
C代表的是cycle，循环数目，T代表的是threshold,阈值。
所以表达量越少的话，需要越多的循环才能扩增出来。也就是CT值越高
【求助】实时荧光定量PCR CT值偏大的原因是什么? 核酸基因技术...123
kenna2017-08-19
组织用Trizol法提取总RNA浓度、纯度都很好，但逆转录后跑PCR，CT值偏高，内参的在22-27之间，目的基因在30-36之间，不知道是怎么回事，如何来解决，求高手赐教。我用的Takara的试剂盒。
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