请使用支持JavaScript的浏览器! VitaNavi公司代理生物计划 vitanavitech一级代理,UniqEX Taq and UniqEX Taq LA Mix are available as a ready-to-use 2X mixture for setting up a trouble-free PCR reaction and there is the choice of an inert green dye, used for direct gel loading. All you have to do is to add template, specific primers and 蚂蚁淘商城
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VitaNavi/UniqEX Taq & UniqEX Taq LA Master Mix/VN1401MC
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VitaNavi/UniqEX Taq & UniqEX Taq LA Master Mix/VN1401MC
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UniqEXTaqTM andUniqEXTaqTM LAMix are availableasaready-to-use2XmixtureofDNApolymerase,salts,magnesiumanddNTPsforsettingupatrouble-freePCRreactionandthereisthe choiceofaninertgreendye,usedfordirectgelloADIng.Allyouhavetodoistoaddtemplate,specificprimersandwater, thereby savetime,effortandminimizepipettingerror. 

UniqEXTaqTM andUniqEXTaqTM LAMix are recommendedforallstandardPCRapplications.Itiscomprisedof UniqEXTaqTM orUniqEXTaqTM LA DNAPolymerasethathasbothhot-startandinhibition-resistantfeature,(Clickhere),andanovelbuffersystemthatdeliververyhighyieldPCRamplificationoverawiderangeofPCRtemplates.It hasbeendevelopedtogivemorerobustamplificationthanothercommonly-used mixes,allowingittoperformwellwithchallengingtemplatesandfordirectPCRwithoutDNApurification.

DataSheet:2XUniqEXTaq&UniqEXTaqLAMix 

 VitaNaviTechnolog是华盛顿大学BarnesWayne教授创办的一家专门从事Taq酶及其相关产品研发与销售的生物公司。BarnesWayne教授是国际上著名的Taq酶专家,也是长片段基因PCR扩增技术的发明人和专利所有人(1993,PNAS;U.S.Patent5,436,149)。20多年来,BarnesWayne教授始终致力于PCR聚合酶,研发了系列TaqDNA聚合酶产品,远销全球40多个国家,是目前国际上生产PCR聚合酶的主要供应商之一。美国VitaNaviTechnology公司研发的新型高耐受性DNA聚合酶为基因检测技术带来了根本性的革新,彻底解决了依赖于纯化的核酸DNA为模板进行PCR扩增这一瓶颈问题。 产品简介          Omni酶是从文库中筛选出来的具有极高耐受性的Taq或者Klentaq突变体,可以直接以全血、血清、土壤、牛奶、巧克力或奶酪等材料为模板一步扩增目的基因,避免了繁琐的核酸DNA提取过程  产品特征:1.对全血、血清、血浆、土壤、植物、巧克力、奶酪和牛奶中的抑制因子具极高的耐受性,可直接对样品进行PCR检测,无需DNA分离。2.可以耐受高达40%的全血,20%的血浆或血清。3.可以从人血液中一步扩增疟疾基因。4.Omni酶节省时间、降低成本.5.直接从微量样品中的扩增,避免样品提取而丢失或污染DNA。 


一、Klentaq1/KlentaqLA?实例1:用KelntaqLA扩增大于20kb的大片段基因。??二、高耐受性(Inhibitor-Resistant)聚合酶:OmniTaq/OmniKlentaq产品特征:1.对全血、血清、血浆、土壤、植物、巧克力、奶酪和牛奶中的抑制因子具极高的耐受性,可直接对样品进行PCR检测,无需进行DNA分离纯化。2.可以耐受高达40%的全血,20%的血浆或血清,已应用于多种遗传病的分子诊断和临床检验。3.可用于法医、环境监测、农业、动植物检疫和临床诊断等领域。4.可以从人血液中一步扩增疟疾基因。5.与PCR增强剂结合使用时,其耐受性将进一步提高。6.使用Omni酶不仅节省时间、降低成本,而且实现了从微量样品中的扩增,避免因提取过程所致的DNA丢失或污染。实例2:用OmniTaq(OT)和OmniKlentaq(OKT)从肝素抗凝血液中一步扩增乙肝病毒基因。?实例3:用新突变的Omni酶从富含腐殖酸的人基因组中扩增1.1kb的CCR5基因。?实例4:用新突变的Omni酶从巧克力和黑胡椒中直接扩增基因。?三、热启动聚合酶(Hot-start)聚合酶:CesiumTaq/CesiumKlentaq产品特征:1.CesiumTaq和CesiumKlentaq是一种冷敏感的突变体,在室温条件下聚合酶的活性很低,当升高温度进入PCR循环时聚合酶的活性就全部释放出来,因而具有内置式热启动功能。2.与现有化学修饰或抗体封阻的热启动聚合酶相比,CesiumTaq和CesiumKlentaq的聚合酶活性更高,扩增效果更好。3.CesiumKlentaq具有热启动和高耐受性双重效果。实例5:用CesiumKlentaq扩增基因热启动效果比较?四、PCR增强剂(PCRenhancingcocktails,PEC)产品特征:1.联合使用PEC-1或PEC-2与高耐受性Taq酶(OmniTaqandOmniKlentaq)可以更好的克服样品中各种物质对PCR反应的抑制作用,进一步提高PCR扩增效率,简化PCR操作流程提高。2.PEC有助于从基因组中扩增GC含量高达80%的基因。3.PEC也可用于qPCR(SYBR和Taqmanprobe)。4.新研发的PCR增强剂PEC-3andPEC-4有助于从食品中扩增基因。?实例6:联合使用OmniTaqorOmniKlentaq及PCR增强剂(PEC)从不同类型的牛奶中检测沙门氏杆菌Inv基因。??实例7:联合使用OmniTaqorOmniKlentaq及PCR增强剂(PEC)从人的基因组DNA或全血中直接扩增3个高GC含量的基因。?五、各种特异性一步PCR试剂盒VitaNaviTech公司开发了系列一步法PCR和qPCR试剂盒,可以直接从样品中扩增目的基因。1.DirectBloodPCRKit:从血液中直接扩增目的基因实例8:使用DirectBloodPCRKit从全血中一步扩增CCR5基因

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PCR-SSCP法1)提取DNA同前RFLP法2)PCR扩增同前PCR-RFLP,也可加入1μCi32P-dCTP标记产物。3)非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳1.取PCR的扩增产物,加凝胶加样液3μl,95℃加热变性2min,冰浴骤冷。同位素掺入的DNA取1μl稀释10倍,加样3μl。2.取样品用微量加样器加入非变性聚丙烯 查看更多>
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分子生物学是在生物化学基础上发展起来的,以研究核酸和蛋白质结构、功能等生命本质的学科,在核酸、蛋白质分子水平研究发病、诊断、治疗和预后的机制。其中基因工程(基因技术,基因重组)是目前分子生物学研究热点,这些技术可以改造或扩增基因和基因产物,使微量的研究对象达到分析水平 查看更多>
定量PCR(即时聚合酶链锁反应,Real-time Polymerase Chain Reaction,简称 Real-time PCR、即时PCR),又称定量即时聚合酶链锁反应(Quantitative real time polymerase chain reaction,简称 Q-PCR/qPCR/rt-qPCR、定量即时PCR、即时定量PCR),是一种在DNA扩增反应中,以萤光染剂侦测每次聚合酶链锁反应(PCR)循环后产物总量的方法... 查看更多>
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One of responses to increased blood pressure is cardiac hypertrophy through increased size of ventricular myocardial cells leading to increased thickness of th 查看更多>
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荧光定量PCR是400什么意思
荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。|||原理不同:荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光;普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量,一般是紫外光。反应要求:荧光定量对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp;普通定量可以扩增长点的片段。如果不需要检测产物分子量大小,荧光定量可以不进行电泳就对产物进行定量分析,普通pcr必须电泳。结果:荧光定量可以实现精确定量,普通pcr则不行。荧光定量体现可以看到整个扩增过程,可以看到扩增效率,溶解温度,直接得到的标准曲线等,这些是普通pcr无法实现的。|||这个还真不大清楚|||貌似前者是定量,后者属于半定量。|||简单的讲PCR技术最早是用于扩增一段特异的PCR片段,用于克隆、测序等实验,后来也将其用于样本中特异的PCR片段有无或非很粗的相对定量,而荧光定量PCR技术则是为了测定样本中特异的PCR片段相对及绝对量,是一种测定特异的PCR片段含量的方式。如测定病人样本中病原体的含量、实验样本中某一特定的mRNA的含量等。前些年有人讲过普通PCR后,通过电泳也可以进行定量,其实是将PCR产物的定量与PCR样本中模板定量相混了。近两年没有人再讲这类的话了。|||引物设计是sybr定量PCR法的最大难点,机会好的话,设计一对引物就能得到很好的结果,机会不好的话7、8对引物也出不来,我就遇到过这样的问题,我在prime5.0上设计了8对引物,符合实验要求的一对也没有,我把退火温度提高到了68度也没能把引物二聚体搞定,后来我想通了,可能我这对引物把其它序列扩增出来了,而且扩增效率很高(我一个同学设计了十几对才找到一对好用的)。记住primer5.0设计出来的100%好的引物,到了定量PCR上不一定好使,这是我最大的经验。定量pCR的引物对匹配度要求不高,我现在使用的引物就有几个碱基不匹配,但实验结果很好。有一个办法可以帮助我们绕过引物设计这道坎,直接到罗氏网站上专区上找引物。罗氏网站在线有一个引物设计软件,你只要找好你目的基因的种属,输入你的片段序列就可以得到你要的引物。这个软件有很大的好处,他会自动地把你的种属序列背景扣除,最大限度地去除引物二聚体产生的可以。
定量PCR方法及数据分析123
有木有3803722021-08-06
你所说的PCR应该就是最常规的PCR,以DNA为模板,通过上下游引物,实现DNA的扩增RT-PCR一般情况下是指反转录PCR(reversetranscription),尽管有些资料上说实时荧光定量PCR也(realtimefluores-cencequantitativePCR)也简称RT-PCR,但是我觉得这是不对的,不推荐。基本操作过程是将所提取的RNA进行反转录,然后将所获得的cDNA作为模板,设计引物进行扩增,是一种检测基因表达的常用方法。实时荧光定量PCR也就是Real-TimePCR,原理有点多,请自行百度百科,其最大的作用是检测样品中的初始DNA浓度。至于三者的关系,RT-PCR和实时定量PCR应该都属于PCR,在RNA实验中,这二者都会应用到。例如你要比较2个组织中的某基因的表达差异,首先你要提取2个组织的总RNA,然后通过RT-PCR检测该基因是否在2个组织中有表达,然后通过实时定量PCR测定该基因在2个组织中的表达量是否具有显著性差异。
怎么看荧光定量PCR的试剂盒好不好123
OneShine往圣生物2021-08-02

一般说来,应选用口碑较好的经过大量客户实验验证的荧光定量PCR试剂盒,因为只有选对了试剂盒才能够做成漂亮的实验结果来,特别是对于一些珍贵的样品更不能因为节约一些蝇头小利而糟蹋了样品本身。OneShineSybrGreenpreMix试剂盒在研发之初就考虑到了一般科研环境中方方面面的影响,例如我们就光照强度、光照时间对本产品的影响做了严苛的实验论证,得到1ml本产品盛装于1.5ml离心管中放置在2000Lux光照强度下可以保存12h,超过12h产品性能则会下降。

OneShineSybrGreenpreMix这款试剂盒除了价格适中外,还主要有以下优点:

1、适用于RealTimePCR反应,可以快速、准确地对目的基因进行定量检测。

2、在2×OneShineSybrGreenpreMix中,预先混有SybrGreen,PCR体系配制时只需入模板、引物、ddH2O即可,操作方便快捷。

3、含有更耐高温并持续稳定的DNAPolymerase,可以维持更多的循环数,提供了选择循环数更大的空间。更大的Ct值选择范围就意味着可以支持微量目的基因检测,检测范围fM-nM。

4、反应的Buffer更适合,使反应的基线更水平,无荧光污染信号。使线性期更陡峭,避免了Ct值的无效浮动。使平台期更平直。也确保了引物与模板能够更特异地结合。

5、SybrGreen更耐高温更足量,确保只要扩增反应在进行,目的DNA双链在增加,就有线性强度的荧光产生。

6、dNTPs更足量,确保反应有更高的平台期荧光信号。

7、Mg2+浓度更适合,确保线性期有爆发式的目的DNA片段合成,提高了线性期反应体系的扩增系数和线性期的长度。

8、更高的仪器适配性,SybrGreen染料可以被各大主流仪器的激发光所激发,产生明亮的荧光信号,有利于仪器对信号的捕捉和处理。

我们的产品与市面上目前常见的一种产品相比较有如下区别:

A公司的产品没有熔解温度,或者熔解温度太高。但是A公司的产品Ct值出现略早,这是因为A公司使用了一种小分子量的DNA聚合酶,这种酶与模板和引物的结合较快和较松散,但是扩增的效率和扩增的特异性就不能保证了,类似于温水煮青蛙不温不火的;这种酶还有一个弱点就是不耐冻融。我们使用的是Taq酶,是一种分子量较大的DNA聚合酶,这种酶与模板和引物结合比较慢,但是慢工出细活,这种酶的特异性较好,一旦激活便呈现爆发式的扩增,类似于不鸣则已一鸣惊人。我们产品熔解温度是A公司不可比拟的,线性范围和斜率也是A公司不可比拟的。详见下图:


用已知浓度的DNA样本(通常是质粒)梯度稀释成一系列的样本。做实验的时候,这些标准品和待测样本加在同样一块96孔盘的不同孔内。一起做PCR。

标准品的荧光强度和已知的浓度作图,可以得到一条标准曲线。而待测样本的荧光强度测出以后,就可以在标准曲线上算出样本浓度了。
般taq酶没5‘-3’外切性现些酶比TAKARAEx-Taq5‘-3’外切性主要减少错配提高保真率 再PrimerStar 另外pfu酶近用比较保真性介于ExPS间挺用扩增效率没
荧光定量pcr123
韦小西西2021-07-23
做了三个基因,一个是p38,第二个是glut,第三个是内参,分为四组,对照组,低中高组,每组四个副孔,这个扩增曲线怎么样?不太懂看曲线
我明年就毕业了,可是论文还没投,快急的不行了,做的实时荧光绝对定量PCR,跑标曲带样用的Bio-RadIQ5机子,可是结果出来不知道分析的是哪个指标(ct,ctmean,sq,sqmean,logsq),不会处理数据,求高人指点啊,拜托了拜托了,好人好报啊
看你的预算了,国产的便宜,进口的贵。
国产的有上海宏石,枫岭,中山达安基因,上海科华生物,大约10-15万。
进口的有ABI公司的大约45万,罗氏诊断的大约40万,Bio-Rad的大约30万。
定量检测包括总RNA提取和纯化、(可能还需要做mRNA提取和纯化)、RT、定量PCR
还需要反转录用的引物、定量PCR用的一对引物、荧光信号源(荧光染料或荧光标记的探针,看你用什么策略来做定量PCR)
报价要看你需要服务商提供什么服务,如果你只提供实验材料,要求服务商做以上全部工作,只检测一个指标(一个基因的表达水平变化),价格大约每个样品350-500元,多一个指标大约多90元。
一般至少做一组数据两个样品嘛,所以你按1000块一组样品预算吧。
厚百搜查:Taq DNA Polymerase(5u/μl)500U 1091171000U,5000U快速型Fast Taq DNA Polymerase(5 U/μl)都厚百面查查看图" class="ikqb_img_alink">图" class="ikqb_img_alink">希望能帮啥疑问欢迎追问厚百holdbio提供试剂、耗材等全面实验室用品及实验技术服务科研整体服务(课题设计-实验-SCI)
你这个结论并不对。两步法,三步法并没有本质区别,信号的读取都是在每一个延长结束后读取。定量PCR一开始的时候也是三步法的。

两步法,是因为设计引物的时候把退火温度设为酶的工作温度,而且定量PCR的产物都很短,需要的时候都短,所以两步法更方便。三步法的话,花的时间长,不利于快速实验。