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Klen Taq/PCR Enhancer Cocktail 1 GC/6.25 ml (for 500 rxns of 25 ul each)/E610
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Klen Taq/PCR Enhancer Cocktail 1 GC/6.25 ml (for 500 rxns of 25 ul each)/E610
品牌 / 
Klen Taq
货号 / 
E610
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PEC-1GC is particularly recommended for GC-rich targets amplified from purfied DNA, blood treated with heparin, citrate, or EDTA, or plasma treated with heparin.  Please refer to our PEC Comparison Page for more information and for help selecting the right PCR Enhancer Cocktail for your application.

Our family of PEC products are non-betaine based PCR enhancers specifically designed for use with inhibitory templates such as plasma, serum, whole blood, inhibitory food matrixes, plant tissue, polyphenolic samples, humic acid, bile, and feces.  In many cases amplication may be performed without DNA purification. They are highly recommended for use with our inhibiton-resistant Taq and Klentaq mutants. When used with a PEC, our enzymes can tolerate at least 25% plasma, serum, or whole blood, and as high as 80% GC content templates. PECs are efficient in conventional or real-time PCR, both in SYBR Green and TaqMan assays. PECs are compatible with most commercially available DNA polymerases, but they are not recommended for use with AmpliTaq Gold.

Catalog Number
E610
MSDS
File
SDS- PEC 1 GC
Amount
6.25 ml (for 500 rxns of 25 ul each)
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  自1987年秋以来,PCR技术的应用开创性地推动了产前单基因缺陷者及携带者的 诊断。目前PCR还不能用于诊断所有已知缺陷疾病,但极大地扩大了实验诊断学家对 诊断方法的选择。JohnHopkins大学的研究人员表明,在诊断基因缺陷疾病方面PCR技 术具有快速、准确、操作灵活等特点。每项进展的实例在以后 查看更多>
PCR-SSO(ASO)探针法1)常规提取DNA参见RFLP法2)PCR扩增参见PCR-RFLP法3)斑点杂交1.将5~20μl扩增产物,加变性液100~200μl室温处理5~15min。2.在尼龙滤膜(预先用2×SSC浸湿2min)上真空点样,每孔以10×SSPE 200μl冲洗,抽干,80℃干燥2h。3.标记探针 查看更多>
据农业农村部新闻办室消息,从8月初我国首次出现非洲猪瘟疫情开始,全国已经有十多个省份发现过疫情,11月17日最新发布,上海市金山区排查出非洲猪瘟疫情:50头猪发病11头... 查看更多>
  自从1985年PCR技术首次应用于遗传病基因诊断以来,已有近百种遗传病可用PCR 技术进行诊断和产前诊断,利用PCR技术诊断遗传病的途径有五个,①基因突变位点 的直接检出②筛查与遗传病③④有关的点突变③遗传多态性标记连锁分析间接诊断④ 利用cmRNA逆转录为cDNA进行分析或直接分析cmRNA.  传统的 查看更多>
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江苏舜天国际集团机械进出口有限公司受招标人委托对下列产品及服务进行国际公开竞争性招标,于2018-07-18在中国国际招标网公告。本次招标采用传统招标方式,现邀请合格投标人参加投标。1、招标条件项目概况:江苏如东高新生物科技有限公司实验设备采购项目资金到位或资金来源落实情况:资金已到位项目已具备招标条件的说明:方案已落实2、招标内容招标项目编号:1802-184007253DSJ/07招标项目名称:全自动荧光定量PCR系统采购项目项目实 查看更多>
2021-08-25
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STRATAGENE系列荧光定量PCR仪,Mx3000P,Mx3000,Mx3005p,Mx4000p,Mx4000,卤钨灯泡,原装进口寿命:2000小时.代理商价格的五分之一.公司信息:上海智岩科学仪器有限公司上海.浦东.张江高科技园区.蔡伦路780号.药谷大厦全国服务热线:18917896250(聂工)电话:021-58956923(技术部)58956922(销售部)50725310(配件中心)传真:021-50725310网址:w 查看更多>
1 导言小RNA(miRNAs)是一种内源性非编码蛋白的小分子RNA,它们是许多基础的细胞过程中基因表达的主要调节因子,这些过程包括细胞增殖、细胞分化以及细胞凋亡等。miRNA在肿瘤生长过程中也发挥着重要作用。一般来说,miRNA通过控制翻译过程来 查看更多>
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第一次做这方面的实验,这张图的右半个不会选,希望大家帮帮忙

实时荧光定量PCR123
小镜a浣溪沙2017-10-03
实时荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。

检测指标是:各样品的目的基因和管家基因分别进行Realtime PCR反应。PCR产物与 DNA Ladder在2%琼脂糖凝胶电泳,GoldView染色,检测PCR产物是否为单一特异性扩增条带。

原理:

PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
热启动酶的原理与应用 123
夏忻赣鬃22017-10-01
第代热启Taq酶种DNA聚合酶 第代指直接Taq(种细菌)体内提取聚合酶没进行化修饰达更聚合催化效往往需要经酶工程处理聚合酶催化效率更高 热启指种酶反应温度条件该...5715
PCR 测受体太不靠谱,mRNA的量和蛋白量不是线性关系,尤其是受体。

如果要测量细胞表面2个受体的比率,最好用流式细胞仪来测量
如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要一下试剂和仪器
1.模板提取(一般为RNA):Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水

2.模板浓度测定:分光光度计或NanoDrop

3.逆转录:逆转录试剂盒(或者一步法试剂盒),这一步可以用普通PCR做,也可以用水域做。

4.荧光定量PCR试剂:通常有用SYBR Green Mix做的,但是这里建议你用EvaGreen做,灵敏度和平行性都要好于SYBR Green,并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。

5.其他:除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板(Axygen反应比较好)、移液枪等,暂时就想到这么多。
你这个结论并不对。两步法,三步法并没有本质区别,信号的读取都是在每一个延长结束后读取。定量PCR一开始的时候也是三步法的。

两步法,是因为设计引物的时候把退火温度设为酶的工作温度,而且定量PCR的产物都很短,需要的时候都短,所以两步法更方便。三步法的话,花的时间长,不利于快速实验。

QPCR在实验室中已经非常普及,现在整理一些关于QPCR的相关资料上传,希望对大家有所帮助。

荧光定量PCR技术(FQ-PCR,也称为Real-timePCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。



荧光定量PCR技术原理及利用.pdf(1473.28k)
荧光定量PCR123
2017-10-03
这几天一岁的闺女得手足口病,医院让查这个,荧光定量是查什么的?有什么用啊?尽量说的直白一点,完全不懂啊!
荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。|||原理不同:荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光;普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量,一般是紫外光。反应要求:荧光定量对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp;普通定量可以扩增长点的片段。如果不需要检测产物分子量大小,荧光定量可以不进行电泳就对产物进行定量分析,普通pcr必须电泳。结果:荧光定量可以实现精确定量,普通pcr则不行。荧光定量体现可以看到整个扩增过程,可以看到扩增效率,溶解温度,直接得到的标准曲线等,这些是普通pcr无法实现的。|||这个还真不大清楚|||貌似前者是定量,后者属于半定量。|||简单的讲PCR技术最早是用于扩增一段特异的PCR片段,用于克隆、测序等实验,后来也将其用于样本中特异的PCR片段有无或非很粗的相对定量,而荧光定量PCR技术则是为了测定样本中特异的PCR片段相对及绝对量,是一种测定特异的PCR片段含量的方式。如测定病人样本中病原体的含量、实验样本中某一特定的mRNA的含量等。前些年有人讲过普通PCR后,通过电泳也可以进行定量,其实是将PCR产物的定量与PCR样本中模板定量相混了。近两年没有人再讲这类的话了。|||引物设计是sybr定量PCR法的最大难点,机会好的话,设计一对引物就能得到很好的结果,机会不好的话7、8对引物也出不来,我就遇到过这样的问题,我在prime5.0上设计了8对引物,符合实验要求的一对也没有,我把退火温度提高到了68度也没能把引物二聚体搞定,后来我想通了,可能我这对引物把其它序列扩增出来了,而且扩增效率很高(我一个同学设计了十几对才找到一对好用的)。记住primer5.0设计出来的100%好的引物,到了定量PCR上不一定好使,这是我最大的经验。定量pCR的引物对匹配度要求不高,我现在使用的引物就有几个碱基不匹配,但实验结果很好。有一个办法可以帮助我们绕过引物设计这道坎,直接到罗氏网站上专区上找引物。罗氏网站在线有一个引物设计软件,你只要找好你目的基因的种属,输入你的片段序列就可以得到你要的引物。这个软件有很大的好处,他会自动地把你的种属序列背景扣除,最大限度地去除引物二聚体产生的可以。

求助各位大侠,最近做的荧光定量PCR,标准曲线稀释一直不好,请教各位,

采用的标准品是自己提的细胞基因组,浓度最高从125ng/uL,5倍稀释,到最低0.2ng/uL,问题如下:

1.最后一个浓度做出来的扩增曲线重复性非常差,而且与前一个浓度梯度CT值差值约为5左右,稀释过程与前几个浓度时操作一致。

2.待测样品中目标基因若含量高,则重复性尚可,若含量略低,Ct值在30及以上,重复性也很差。


说明,

1、每个标准曲线浓度的稀释操作均一致,涡旋混匀时间>15s

2、所用移液枪无问题,枪头为低吸附枪头

3、操作移液枪无问题

实验不顺,甚是不爽,各位大侠出手解救


Taq DNA聚合酶使用说明书123
姆姆EH172017-10-03
1单位(U)Taq DNA 聚合酶力定义74°C、30钟内性化马哈鱼精DNA作模板/引物10nmol脱氧核苷酸掺入酸容物质所需酶量图" class="ikqb_img_alink">