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Boston Biochem/Taxol/1097/10
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Biological Activity
Antitumor agent; promotes and stabilizes tubulin polymerization, causing cell cycle arrest. Induces autocatalytic activation of caspase-10 in CCRF-HSB-2 cells, triggering apoptosis.Technical Data
M.Wt:
853.92
Formula:
C47H51NO14
Solubility:
Soluble to 25 mM in ethanol and to 100 mM in DMSO with gentle warming
Purity:
≥99%
Storage:
Store at +4°C
CAS No:
33069-62-4
The technical data provided above is for guidance only.For batch specific data refer to the Certificate of Analysis.Tocris products are intended for laboratory research use only, unless stated otherwise.
Background References
- Taxol: a unique antineoplastic agent with significant activity in advanced ovarian epithelial neoplasms.McGuire et al.Ann.Intern.Med., 1989;111:273
- Taxol: a novel investigational antimicrotubule agent.Rowinsky et al.J.Natl.Cancer Inst., 1990;82:1247
- Taxol induces caspase-10-dependent apoptosis.Park et al.J.Biol.Chem., 2004;279:51057
- Characterization of the Tax. binding site on the microtubule.Rao et al.J.Biol.Chem., 1999;274:37990
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Citations for Taxol
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26Citations: Showing 1 - 10
- Programmed cell death factor 4 enhances the chemosensitivity of colorectal cancer cells to Taxol.Authors: Wang Et al.Oncol Lett2019;18:1402
- Nicotine Prevents and Reverses Paclitaxel-Induced Mechanical Allodynia in a Mouse Model of CIPN.Authors: Kyte Et al.J Pharmacol Exp Ther2018;364:110
- Centriole triplet microtubules are required for stable centriole formation and inheritance in human cells.Authors: Wang Et al.Elife2017;6
- The BTK Inhibitor, Ibrutinib (PCI-32765) Overcomes PacT. Resistance in ABCB1 and ABCC10 Overexpressing Cells and Tumors.Authors: ZhangMol Cancer Ther2017;16(6):1021
- Crizotinib, a MET inhibitor, inhibits growth, migration, and invasion of breast cancer cells in vitro and synergizes with chemotherapeutic agents.Authors: AyoubOnco Targets Ther2017;10:4869
- Gene expression profile of sodium channel subunits in the anterior cingulate cortex during experimental paclitaxel-induced neuropathic pain in mice.Authors: MasochaPeerJ2016;4:e2702
- σ1 receptor ligands control a switch between passive and active threat responses.Authors: Rennekamp Et al.Nat Chem Biol2016;12:552
- The small molecule tyrosine kinase inhibitor NVP-BHG712 antagonizes ABCC10-mediated PacT. resistance: a preclinical and pharmacokinetic study.Authors: Kathawala Et al.Oncotarget2015;6:510
- Coadministration of indomet. and MinCyc attenuates established PacT.-induced neuropathic thermal hyperalgesia: Involvement of cannabinoid CB1 receptors.Authors: Parvathy and MasochaProc Natl Acad Sci U S A2015;5:10541
- Bioactivity characterization of Lactobacillus strains isolated from dairy products.Authors: Haghshenas Et al.Microbiologyopen2015;4:803
- Astrocyte activation in the anterior cingulate cortex and altered glutamatergic gene expression during PacT.-induced neuropathic pain in mice.Authors: MasochaPeerJ2015;3:e1350
- ATP-binding cassette subfamily B member 1 (ABCB1) and subfamily C member 10 (ABCC10) are not primary resistance factors for cabazitaxel.Authors: Kathawala Et al.J Cell Sci2015;34:115
- Biopolymer implants enhance the efficacy of adoptive T-cell therapy.Authors: Stephan Et al.PLoS One2015;33:97
- Transgenic plants as low-cost platform for chemotherapeutic drugs screening.Authors: Vergara Et al.Chin J Cancer2015;16:2174
- Quantitative analysis of microtubule orientation in interdigitated leaf pavement cells.Authors: Akita Et al.Int J Mol Sci2015;10:e1024396
- High-affinity accumulation of a maytansinoid in cells via weak tubulin interaction.Authors: Goldmacher Et al.Plant Signal Behav2015;10:e0117523
- Depletion of the central metabolite NAD leads to oncosis-mediated cell death.Authors: Nagro Et al.Nat Biotechnol2014;289:35182
- p31(comet) inactivates the chemically induced Mad2-dependent spindle assembly checkpoint and leads to resistance to anti-mitotic drugs.Authors: Habu and MatsumotoSci Rep2013;2:562
- Spatiotemporal organization of Aurora-B by APC/CCdh1 after mitosis coordinates cell spreading through FHOD1.Authors: Floyd Et al.EMBO J2013;126:2845
- N-cadherin specifies first asymmetry in developing neurons.Authors: Gärtner Et al.Springerplus2012;31:1893
- Functional characterization of the 19q12 amplicon in grade III breast cancers.Authors: Natrajan Et al.Breast Cancer Res2012;14:R53
- PacT. and CYC3, an aurora kinase A inhibitor, synergise in pancreatic cancer cells but not bone marrow precursor cells.Authors: Lin Et al.Br J Cancer2012;107:1692
- Substance P induces the reversible formation of varicosities in the dendrites of rat brainstem neurons.Authors: Hahm Et al.Brain Res2011;1369:36
- Leading tip drives som. translocation via forward F-actin flow during neuronal migration.Authors: He Et al.J Neurosci2010;30:10885
- Alpha-tocopheryl succinate potentiates the PacT.-induced apoptosis through enforced caspase 8 activation in human H460 lung cancer cells.Authors: Lim Et al.Exp Mol Med2009;41:737
- Potentiation of PacT.-induced apoptosis by the novel cyclin-dependent kinase inhibitor NU6140: a possible role for survivin down-regulation.Authors: Pennati Et al.Mol Cancer Ther2005;4:1328
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Filter by:
Paclitaxel, docetaxel, vincristine, vinblastine, colchicine, cisplatin, and mitoxantrone screen for Human epidermal carcinoma
By Anonymouson 11/17/2019
Application: Species:Mouse
Human epidermal carcinoma cell line was treated with Paclitaxel, docetaxel,vincristine, vinblastine, colchicine, cisplatin, and mitoxantrone which purchased from Tocris Bioscience.
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2018-12-26
PCR－RFLP法1）提取细胞总DNA方法同前。2）PCR扩增引物的设计1．引物长度一般为15～30bp，G＋C含量应在45％～55％之间。2．应避免连续出现4个以上的单一碱基。3．不能含有自身互补序列。4．两个引物之间不应有多于4个的互补或同源碱基，不然会形成引物二聚体。5．与非特异扩增序列的同源性应小于70％， 查看更多
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2018-12-01
提供商：浩合生物 查看更多
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2021-09-23
上海云序生物科技有限公司在发布的miRNA实时定量PCR供应信息，浏览与miRNA实时定量PCR相关的产品或在搜索更多与miRNA实时定量PCR相关的内容。 查看更多
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2018-08-03
南京诺唯赞生物科技有限公司在发布的【正品直销，售后保障】(Vazyme染料法荧光定量PCR预混液）AceQ qPCR SYBR® Green Master Mix 供应信息，浏览与【正品直销，售后保障】(Vazyme染料法荧光定量PCR预混液）AceQ qPCR SYBR® Green Master Mix 相关的产品或在搜索更多与【正品直销，售后保障】(Vazyme染料法荧光定量PCR预混液）AceQ qPCR SYBR® Green Master Mix 相关的内容。 查看更多
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2018-07-16
新年新气象，金鸡送福利，2017鸡年“鸡”及向上，然泰携手本公司实验室全体技术服务专业人士，新年大回馈，意想不到的折扣，意想不到的惊喜，还在等什么，为自己的实验室的研究工作置办一次不一样的年货吧! 关于实验室技术服务，上海然泰价格优惠、品种齐全、服务周到，你想要的，我们一定备好产品，尽我们努力的可能说到做到，让你能放心准备自己手头的实验。 酶联免疫(ELISA)技术服务 上海然泰公司——依托复旦大学，集研发、销售、实验室技术服务于一体 查看更多
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2018-08-06
LUX 引物用 FAM(6-羧基荧光素）或 JOE(6-羧基-4'，5'-二氯-2'，7'-二甲氧基荧光素）标记。在没有特异模板的反应中，LUX 引物可以对 100 个拷贝或更少的目的基因进行定量，定量范围可以从不足 100 到 107 个拷贝。运用 FAM 和 JOE 标记的引物，提供的检测平台可以同时检测两个基因。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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2018-12-26
PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列。因此，引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与 查看更多
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人Wnt信号通路定量PCR芯片试剂盒是由上海中乔新舟生物科技有限公司代理或销售的sciencell品牌的试剂，产品来源于美国。上海中乔新舟生物科技有限公司是中国最权威的人Wnt信号通路定量PCR芯片试剂盒试剂销售服务商之一，在上海等地方销售人Wnt信号通路定量PCR芯片试剂盒试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业人Wnt信号通路定量PCR芯片试剂盒仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的人Wnt信号通路定量PCR芯片试剂盒产品 查看更多
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2018-11-11
多重实时荧光定量PCR沙眼衣原体/淋病奈瑟菌检测试剂是由纽罗西敏生物科技代理或销售的品牌的试剂，产品来源于。纽罗西敏生物科技是中国最权威的多重实时荧光定量PCR沙眼衣原体/淋病奈瑟菌检测试剂试剂销售服务商之一，在杭州等地方销售多重实时荧光定量PCR沙眼衣原体/淋病奈瑟菌检测试剂试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业多重实时荧光定量PCR沙眼衣原体/淋病奈瑟菌检测试剂仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的多重实时荧光定量PCR沙眼衣原体/淋病奈瑟菌检测试剂产品 查看更多
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2018-07-19
江苏舜天国际集团机械进出口有限公司受招标人委托对下列产品及服务进行国际公开竞争性招标，于2018-07-18在中国国际招标网公告。本次招标采用传统招标方式，现邀请合格投标人参加投标。1、招标条件项目概况:江苏如东高新生物科技有限公司实验设备采购项目资金到位或资金来源落实情况:资金已到位项目已具备招标条件的说明:方案已落实2、招标内容招标项目编号:1802-184007253DSJ/07招标项目名称:全自动荧光定量PCR系统采购项目项目实 查看更多
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2018-11-26
据农业农村部新闻办室消息，从8月初我国首次出现非洲猪瘟疫情开始，全国已经有十多个省份发现过疫情，11月17日最新发布，上海市金山区排查出非洲猪瘟疫情：50头猪发病11头... 查看更多
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2018-07-16
实时荧光定量PCR(RealTime PCR) 实时荧光定量PCR(RealTime PCR)【相关服务：DNA测序】，DNA测序 8月2日，绿叶制药（02186.HK）母公司绿叶集团宣布收购新加坡基因测序公司Vela Diagnostics。这标志着绿叶集团正式进军精准医疗市场，而该公司的基因测序技术将与绿叶集团现有业务产生协同效应，形成从诊断到治疗的精准医疗全产业服务。绿叶集团人士告诉21世纪经济报道记者：“这家公司生产的设备、试剂 查看更多
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怎么看荧光定量PCR的试剂盒好不好123
OneShine往圣生物2021-08-02
一般说来，应选用口碑较好的经过大量客户实验验证的荧光定量PCR试剂盒，因为只有选对了试剂盒才能够做成漂亮的实验结果来，特别是对于一些珍贵的样品更不能因为节约一些蝇头小利而糟蹋了样品本身。OneShineSybrGreenpreMix试剂盒在研发之初就考虑到了一般科研环境中方方面面的影响，例如我们就光照强度、光照时间对本产品的影响做了严苛的实验论证，得到1ml本产品盛装于1.5ml离心管中放置在2000Lux光照强度下可以保存12h，超过12h产品性能则会下降。
OneShineSybrGreenpreMix这款试剂盒除了价格适中外，还主要有以下优点：
1、适用于RealTimePCR反应，可以快速、准确地对目的基因进行定量检测。
2、在2×OneShineSybrGreenpreMix中，预先混有SybrGreen，PCR体系配制时只需入模板、引物、ddH2O即可，操作方便快捷。
3、含有更耐高温并持续稳定的DNAPolymerase，可以维持更多的循环数，提供了选择循环数更大的空间。更大的Ct值选择范围就意味着可以支持微量目的基因检测，检测范围fM-nM。
4、反应的Buffer更适合，使反应的基线更水平，无荧光污染信号。使线性期更陡峭，避免了Ct值的无效浮动。使平台期更平直。也确保了引物与模板能够更特异地结合。
5、SybrGreen更耐高温更足量，确保只要扩增反应在进行，目的DNA双链在增加，就有线性强度的荧光产生。
6、dNTPs更足量，确保反应有更高的平台期荧光信号。
7、Mg2+浓度更适合，确保线性期有爆发式的目的DNA片段合成，提高了线性期反应体系的扩增系数和线性期的长度。
8、更高的仪器适配性，SybrGreen染料可以被各大主流仪器的激发光所激发，产生明亮的荧光信号，有利于仪器对信号的捕捉和处理。
我们的产品与市面上目前常见的一种产品相比较有如下区别：
A公司的产品没有熔解温度，或者熔解温度太高。但是A公司的产品Ct值出现略早，这是因为A公司使用了一种小分子量的DNA聚合酶，这种酶与模板和引物的结合较快和较松散，但是扩增的效率和扩增的特异性就不能保证了，类似于温水煮青蛙不温不火的；这种酶还有一个弱点就是不耐冻融。我们使用的是Taq酶，是一种分子量较大的DNA聚合酶，这种酶与模板和引物结合比较慢，但是慢工出细活，这种酶的特异性较好，一旦激活便呈现爆发式的扩增，类似于不鸣则已一鸣惊人。我们产品熔解温度是A公司不可比拟的，线性范围和斜率也是A公司不可比拟的。详见下图：
实时荧光定量pcr内参是什么东西123
yunshui19862021-07-27
怎么知道自己要买哪个内参
荧光定量pcr123
韦小西西2021-07-23
做了三个基因，一个是p38,第二个是glut，第三个是内参，分为四组，对照组，低中高组，每组四个副孔，这个扩增曲线怎么样？不太懂看曲线
荧光定量PCR之绝对定量分析——标准曲线的绘制123
逍遥PVej32017-10-03
用已知浓度的DNA样本（通常是质粒）梯度稀释成一系列的样本。做实验的时候，这些标准品和待测样本加在同样一块96孔盘的不同孔内。一起做PCR。
标准品的荧光强度和已知的浓度作图，可以得到一条标准曲线。而待测样本的荧光强度测出以后，就可以在标准曲线上算出样本浓度了。
标准品的荧光强度和已知的浓度作图，可以得到一条标准曲线。而待测样本的荧光强度测出以后，就可以在标准曲线上算出样本浓度了。
实时定量PCR时用的ROX refence 有什么作用123
旧人旧城丶捈h2021-08-19
ROX Reference Dye,可用于需要Dye的Real Time PCR扩增仪,用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR扩增仪上,用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差.并不是每次都会用到.
一般有ROX Reference Dye和ROX Reference Dye II两种,针对不同的PCR仪.一般ABI PRISM 7000/7700/7900HT和7300 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye,而7500 Real-Time PCR System和7500 Fast Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye II.其它牌子如Thermal Cycler Dice Real Time System、LightCycler 等Real Time PCR扩增仪时不必使用.
一般有ROX Reference Dye和ROX Reference Dye II两种,针对不同的PCR仪.一般ABI PRISM 7000/7700/7900HT和7300 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye,而7500 Real-Time PCR System和7500 Fast Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye II.其它牌子如Thermal Cycler Dice Real Time System、LightCycler 等Real Time PCR扩增仪时不必使用.
荧光定量PCR与普通PCR相比有哪些不同?.生意经求助 123
布美男00182021-08-20
荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。|||原理不同：荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光；普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量，一般是紫外光。反应要求：荧光定量对扩增片段有较高的要求，一般为100-300bp；普通定量可以扩增长点的片段。如果不需要检测产物分子量大小，荧光定量可以不进行电泳就对产物进行定量分析，普通pcr必须电泳。结果：荧光定量可以实现精确定量，普通pcr则不行。荧光定量体现可以看到整个扩增过程，可以看到扩增效率，溶解温度，直接得到的标准曲线等，这些是普通pcr无法实现的。|||这个还真不大清楚|||貌似前者是定量，后者属于半定量。|||简单的讲PCR技术最早是用于扩增一段特异的PCR片段，用于克隆、测序等实验，后来也将其用于样本中特异的PCR片段有无或非很粗的相对定量，而荧光定量PCR技术则是为了测定样本中特异的PCR片段相对及绝对量，是一种测定特异的PCR片段含量的方式。如测定病人样本中病原体的含量、实验样本中某一特定的mRNA的含量等。前些年有人讲过普通PCR后，通过电泳也可以进行定量，其实是将PCR产物的定量与PCR样本中模板定量相混了。近两年没有人再讲这类的话了。|||引物设计是sybr定量PCR法的最大难点，机会好的话，设计一对引物就能得到很好的结果，机会不好的话7、8对引物也出不来，我就遇到过这样的问题，我在prime5.0上设计了8对引物，符合实验要求的一对也没有，我把退火温度提高到了68度也没能把引物二聚体搞定，后来我想通了，可能我这对引物把其它序列扩增出来了，而且扩增效率很高（我一个同学设计了十几对才找到一对好用的）。记住primer5.0设计出来的100%好的引物，到了定量PCR上不一定好使，这是我最大的经验。定量pCR的引物对匹配度要求不高，我现在使用的引物就有几个碱基不匹配，但实验结果很好。有一个办法可以帮助我们绕过引物设计这道坎，直接到罗氏网站上专区上找引物。罗氏网站在线有一个引物设计软件，你只要找好你目的基因的种属，输入你的片段序列就可以得到你要的引物。这个软件有很大的好处，他会自动地把你的种属序列背景扣除，最大限度地去除引物二聚体产生的可以。
荧光定量PCR中,起始拷贝数是什么?怎么来的?123
天空飘飞的云2021-08-16
这个指的就是样本中原有目标DNA的数量。
在另外的一组管子中，加入已知拷贝数的DNA同时扩增，每个管子中加入的数量是不同的，但是从最小数目到最大数目的这个范围涵盖了样本中DNA拷贝数。
PCR反应完成后，把已知拷贝数DNA的量和PCR荧光Ct值制成标准曲线，再把待测样本的CT值和该标准曲线比对，就可以得到样本中的起始拷贝数了
在另外的一组管子中，加入已知拷贝数的DNA同时扩增，每个管子中加入的数量是不同的，但是从最小数目到最大数目的这个范围涵盖了样本中DNA拷贝数。
PCR反应完成后，把已知拷贝数DNA的量和PCR荧光Ct值制成标准曲线，再把待测样本的CT值和该标准曲线比对，就可以得到样本中的起始拷贝数了
实时荧光定量PCR123
小镜a浣溪沙2017-10-03
实时荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术，它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。
检测指标是：各样品的目的基因和管家基因分别进行Realtime PCR反应。PCR产物与 DNA Ladder在2%琼脂糖凝胶电泳，GoldView染色，检测PCR产物是否为单一特异性扩增条带。
原理：
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
检测指标是：各样品的目的基因和管家基因分别进行Realtime PCR反应。PCR产物与 DNA Ladder在2%琼脂糖凝胶电泳，GoldView染色，检测PCR产物是否为单一特异性扩增条带。
原理：
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
【求助】实时荧光定量PCR CT值偏大的原因是什么? 核酸基因技术...123
kenna2017-08-19
组织用Trizol法提取总RNA浓度、纯度都很好，但逆转录后跑PCR，CT值偏高，内参的在22-27之间，目的基因在30-36之间，不知道是怎么回事，如何来解决，求高手赐教。我用的Takara的试剂盒。
【求助】荧光实时定量PCR要购买哪些试剂和材料 PCR技术讨论版 ...123
子乔00KJ112021-08-09
如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要一下试剂和仪器
1.模板提取（一般为RNA）：Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop
3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBR Green Mix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBR Green，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他：除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板（Axygen反应比较好）、移液枪等，暂时就想到这么多。
1.模板提取（一般为RNA）：Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop
3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBR Green Mix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBR Green，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他：除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板（Axygen反应比较好）、移液枪等，暂时就想到这么多。
实时荧光定量PCR仪是什么,它的作用有哪些 今日头条 电子发烧友网123
syj47392017-10-03
实时荧光定量PCR即
Real time PCR(也称实时定量PCR)
定量PCR已经从基于凝胶的低通量分析发展到高通量的荧光分析技术，即实时定量PCR。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点。实时定量PCR (real-time quantitative PCR)是指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来即时测定特异性产物的量，并据此推断目的基因的初始量，不需要取出PCR产物进行分离。目前实时定量PCR作为一个极有效的实验方法，已被广泛地应用于分子生物学研究的各个领域。
实时荧光定量PCR 技术的主要应用：
1. DNA 或RNA 的绝对定量分析：包括病原微生物或病毒含量的检测,转基因动植物转基因拷贝数的检测，RNAi 基因失活率的检测等
2. 基因表达差异分析：例如比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异(如药物处理、物理处理、化学处理等 )，特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA 芯片或差显结果的确证
3. 基因分型：例如SNP 检测，甲基化检测等
Realtime PCR 常用的两种方法分别为：Sybr green（荧光染料掺入法） 和Taqman probe （探针法）
SYBR green
在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
此方法适用：
1、灵敏度高：使用SYBR可使荧光效果增强到1000倍以上
2、通用性好,不需要设计探针,方法简便,省时,价格低廉。
3、通用型方法，在国内外科研中普遍使用。
4、高通量大规模的定量PCR检测
5、专一性要求不高的定量PCR检测。
Taqman Probe
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步
此方法适用：
1、具有高适应性和可靠性，实验结果稳定重复性好，特异性更高。
2、适用于扩增序列专一的体系的检测。
3、样品中靶基因含量过低的定量PCR检测。
4、靶基因的特异序列较短，无论怎样优化引物设计条件都不能解决。
5、存在与靶基因同源的序列，在PCR中容易出现非特异性扩增，对特异性要求较高的定量。
6、广泛用于人类传染病的诊断和病原定量,在动物病原体基因的检测,畜禽产品的检验检疫,生物制品的鉴定。
Real time PCR(也称实时定量PCR)
定量PCR已经从基于凝胶的低通量分析发展到高通量的荧光分析技术，即实时定量PCR。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点。实时定量PCR (real-time quantitative PCR)是指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来即时测定特异性产物的量，并据此推断目的基因的初始量，不需要取出PCR产物进行分离。目前实时定量PCR作为一个极有效的实验方法，已被广泛地应用于分子生物学研究的各个领域。
实时荧光定量PCR 技术的主要应用：
1. DNA 或RNA 的绝对定量分析：包括病原微生物或病毒含量的检测,转基因动植物转基因拷贝数的检测，RNAi 基因失活率的检测等
2. 基因表达差异分析：例如比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异(如药物处理、物理处理、化学处理等 )，特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA 芯片或差显结果的确证
3. 基因分型：例如SNP 检测，甲基化检测等
Realtime PCR 常用的两种方法分别为：Sybr green（荧光染料掺入法） 和Taqman probe （探针法）
SYBR green
在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
此方法适用：
1、灵敏度高：使用SYBR可使荧光效果增强到1000倍以上
2、通用性好,不需要设计探针,方法简便,省时,价格低廉。
3、通用型方法，在国内外科研中普遍使用。
4、高通量大规模的定量PCR检测
5、专一性要求不高的定量PCR检测。
Taqman Probe
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步
此方法适用：
1、具有高适应性和可靠性，实验结果稳定重复性好，特异性更高。
2、适用于扩增序列专一的体系的检测。
3、样品中靶基因含量过低的定量PCR检测。
4、靶基因的特异序列较短，无论怎样优化引物设计条件都不能解决。
5、存在与靶基因同源的序列，在PCR中容易出现非特异性扩增，对特异性要求较高的定量。
6、广泛用于人类传染病的诊断和病原定量,在动物病原体基因的检测,畜禽产品的检验检疫,生物制品的鉴定。
qPCR过程中有关RNA的问题123
cneagle662021-08-18
请教园友：
一般做mRNA表达的时候，需要注意提取的RNA中是否有DNA污染，或者通过设计跨内含子的引物来解决。那么，检测MmiRNA的时候，需要注意RNA中DNA污染的问题么？
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