Details
Viagen DirectPCR® DNA Extraction System is a single-tube system forrapid preparation of DNA from mouse tails, ear pieces, yolk sac, andculture cells. The patent-pending components developed by scientists atViagen Biotech Inc. allow the resulting DNA extracts to be compatiblewith genomic PCR for genotyping. Crude extracts of biological samplesare not compatible with many molecular biology-grade reactions such aspolymerase chain reaction (PCR), in part due to inhibitors contained incrude extracts. The DirectPCR reagents not only mediate the rapid lysisof biological samples but also contain inhibitors that effectivelysuppress the inhibitory activities of crude lysates for PCRamplification, while maximally maintaining the integrity of releasedgenomic DNA. The patent-pending simple procedure completely eliminateany solution transfer or tube-opening steps, providing you withsubstantial extra time.
Brief procedure1. Lyse tails in DirectPCR® Lysis Reagent.2. Incubate for 45 min at 85°C.3. PCR genotyping with 1 μl lysates.
Detailed protocols: Tail, Ear, Yolk Sac, and Cultured cells.
DirectPCR® system offers advantages over conventional protocols that include:·Time saving: Less hands-on time. Crude tail lysates for PCR.·Money saving: Cost-effective reactions. ·Safe: No organic reagents. ·Environmental:Lesswaste (organic reagents, tubes, tips, etc...) ·Reliable and efficient: Virtually 100% success rate with high yields.
DirectPCR Lysis Reagent (cell)
301-C 50ml cultured cells
302-C 100ml cultured cells
Viagen生產快速溶解細胞組織樣品，提供DirectPCRLysisReagents多種樣品，包含老鼠尾巴、耳朵、細胞，卵黃囊genomicDNA，適合各廠牌的PCR酵素快速分析。只需要1µllysates.即可快速執行genotyping分析。
ViaGen生物技术DirectPCR裂解试剂是一条完整的生产线用于快速、方便、可靠地从小鼠尾巴、耳朵、卵黄囊和培养细胞中提取DNA。
世界顶级实验材料供应商viagenbiotech正式授权苏州蚂蚁淘为其中国代理，viagenbiotech在一直是行业的标杆,一直为广大科研客户提供最为优质的产品和服务,苏州蚂蚁淘一直秉承为中国科研客户带来最好的产品，最好的服务，签约viagenbiotech就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们最大的收获viagenbiotech中国代理,viagenbiotech上海代理，viagenbiotech北京代理，viagenbiotech广东代理，viagenbiotech江苏代理viagenbiotech湖北代理,viagenbiotech天津,viagenbiotech黑龙江代理,viagenbiotech内蒙古代理,viagenbiotech吉林代理,viagenbiotech福建代理,viagenbiotech江苏代理,viagenbiotech浙江代理,viagenbiotech四川代理,ViagenBiotechInc.是创新的DNA提取技术和生命科学研究产品的领先供应商。ViagenDirectPCRDNA提取系统是一种单管系统，用于从小鼠尾巴，耳朵片，卵黄囊和培养细胞中快速制备DNA。由ViagenBiotechInc.的科学家开发的正在申请专利的组件允许得到的DNA提取物与用于基因分型的基因组PCR相容。生物样品的粗提取物与许多分子生物学级反应（如聚合酶链反应（PCR））不相容，部分原因是粗提物中含有抑制剂。DirectPCR试剂不仅介导生物样品的快速溶解，而且还含有有效抑制粗裂解物对PCR扩增的抑制活性的抑制剂，同时最大限度地保持了释放的基因组DNA的完整性。该过程完全消除了任何溶液转移或开管步骤，节省了大量的时间和精力。DirectPCR试剂每尾只花费26美分，可以节省任何使用量。Viagenbiotech致力于简便快速提取和制备核酸（DNA/RNA），以批量、快速进行基因分析。公司拥有的专利技术不仅加快样品的裂解，而且降低了粗提物中PCR抑制因素，因而使DNA提取与PCR基因分析完美兼容，样品经一步消化后即可进行PCR扩增，并且保证了基因组的完整性。DirectPCRLysisReagent(MouseTail)100ml快速概述目录号：102-T最多500尾（100ml）在4℃下稳定长达12个月描述ViagenDirectPCRDNAExtractionSystemisasingle-tubesystemforrapidpreparationofDNAfrommousetails,earpieces,yolksac,andculturecells.Thepatent-pendingcomponentsdevelopedbyscientistsatViagenBiotechInc.allowtheresultingDNAextractstobecompatiblewithgenomicPCRforgenotyping.Crudeextractsofbiologicalsamplesarenotcompatiblewithmanymolecularbiology-gradereactionssuchaspolymerasechainreaction(PCR),inpartduetoinhibitorscontainedincrudeextracts.TheDirectPCRreagentsnotonlymediatetherapidlysisofbiologicalsamplesbutalsocontaininhibitorsthateffectivelysuppresstheinhibitoryactivitiesofcrudelysatesforPCRamplification,whilemaximallymaintainingtheintegrityofreleasedgenomicDNA.Thepatent-pendingsimpleprocedurecompletelyeliminateanysolutiontransferortube-openingsteps,providingyouwithsubstancialextratime.Briefprocedure1.LysetailsinDirectPCRLysisReagent.2.Incubatefor45minat85°C.3.PCRgenotypingwith1μllysates.Detailedprotocols:Tail,Ear,YolkSac,andCulturedcells.DirectPCRsystemoffersadvantagesoverconventionalprotocolsthatinclude:Timesaving:Lesshands-ontime.CrudetaillysatesforPCR.Moneysaving:Cost-effectivereactions.Safe:Noorganicreagents.Environmental:Lesswaste(organicreagents,tubes,tips,etc...)Reliableandefficient:Virtually100%successratewithhighyields.DirectPCRLysisReagent(mousetail)101-T50ml(250mousetails).102-T100ml(500mousetails).我们公司最大优势是强大的采购，1：基本什么都能进口，血清，抗体，耗材，还有部分限制进口的，2：货品全，现经营过700多个品牌，基本所有生物试剂耗材都可以进口，特别是冷偏的产品那就更有优势，3：提供加急服务，一般1-2周到货，超过时限加急费全免4：价格公道，绝大部分价格有优势，当然不能保证100%产品都是价格最低,因为价格最低意味着没有服务.5：良好的信誉，大部分客户我们提供货到付款服务，客户包括清华，北大交大复旦，中山等100多所大学，ROCHE，阿斯利康，国药，fisher等500多家公司6：我们独家代理的品牌有：AntibodyResearchCorporation，arcticzymes，Biorelevant，AmberGen,Inc.，clemente-associates，clodronateliposomes，ColumbiaBiosciences，enzymeresearch，GeneBridgesGmbH，Genovis，AmberGen,Inc.BiotechnologyGmbH，HaematologicTechnologiesHTIHaemtech，hookelabs，Immudex，InnovativeResearchofAmerica，inspiralis，ListBiologicalLaboratories,Inc.，lumafluor，Microsurfaces，multiplicom，nanotools，Pel-FreezBiologicals，pentapharm，progen，ProteinArk，QA-Bio,Inc，QA-Bio,IncQuickZymeBiosciences，Teknova，TriLinkBioTechnologies,Inc.，ZyagenLaboratories等7：我们还是invitrogen,qiagen,MidlandBioProductsCorporationam,sigma;neb,roche,merck,rnd,BD,GE,pierce,BioLegend等知名大品牌批发，欢迎合作。
ViagenBiotechInc.isaleadingproviderofinnovativeDNAextractiontechnologiesandproductsforlifescienceresearch.ViagenDirectPCR®DNAExtractionSystemisasingle-tubesystemforrapidpreparationofDNAfrommousetails,earpieces,yolksac,andculturecells. Thepatent-pendingcomponentsdevelopedbyscientistsatViagenBiotechInc.allowtheresultingDNAextractstobecompatiblewithgenomicPCRforgenotyping.Crudeextractsofbiologicalsamplesarenotcompatiblewithmanymolecularbiology-gradereactionssuchaspolymerasechainreaction(PCR),inpartduetoinhibitorscontainedincrudeextracts. TheDirectPCRreagentsnotonlymediatetherapidlysisofbiologicalsamplesbutalsocontaininhibitorsthateffectivelysuppresstheinhibitoryactivitiesofcrudelysatesforPCRamplification,whilemaximallymaintainingtheintegrityofreleasedgenomicDNA.Theprocedurecompletelyeliminatesanysolutiontransferortube-openingsteps,savingasubstantialamountoftimeandeffort.DirectPCRreagentscostonly26centspertail,providingsavingsatanyusagevolume.
ViagenBiotechInc.是一家为生命科学研究提供DNA提取技术和产品的*供应商。ViagenDirectPCR®DNA提取系统是一种单管系统，用于从小鼠尾巴，耳朵，卵黄囊和培养细胞中快速制备DNA。由ViagenBiotechInc.的科学家开发的正在申请专li的组件使得所得的DNA提取物与基因组PCR相容，可用于基因分型。生物样品的粗提物与许多分子生物学级反应如聚合酶链反应（PCR）不相容，部分原因是粗提物中含有抑制剂。DirectPCR试剂不仅介导生物样品的快速裂解，而且还含有抑制剂，其有效抑制粗裂解物对PCR扩增的抑制活性，同时zui大程度地维持释放的基因组DNA的完整性。该程序完全消除了任何溶液转移或管打开步骤，节省了大量的时间和精力。我们的产品销往学术研究市场，生物技术公司和制药公司。 详细产品列表：Viagen全国代理 产品 货号 规格 价格 102-T 100ml $149.00 101-T 50ml 402-E 50ml $149.00 302-C 100ml $149.00 202-Y 100ml $149.00 505-PKP 100mg $85.00 501-PK 5ml $99.00 602-P 100ml $295.00 21141 1mlvial $59.00 24073 0.5ml $35.00 24073-5 2.5ml $160.00 24075 50μg $35.00 24076 50μg $39.00 24071 50μg $59.00 24072 50μg $49.00
DirectPCRLysisReagent(MouseTail)
DirectPCRLysisReagent(MouseTail)
$85.00
DirectPCRLysisReagent(Ear)
DirectPCRLysisReagent(Cell)
DirectPCRLysisReagent(YolkSac)
ProteinaseKPowder
ProteinaseKSolution(20mg/ml)
E-PrepDNAExtractionReagent
NucleicAcidStainingSolution
100DNAMarker
100DNAMarkerSet
1kbplusDNAMarker
15kbDNAMarker
20bpDNAMarker
50bpplusDNAMarker
ebiomall.com
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一般有ROX Reference Dye和ROX Reference Dye II两种,针对不同的PCR仪.一般ABI PRISM 7000/7700/7900HT和7300 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye,而7500 Real-Time PCR System和7500 Fast Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye II.其它牌子如Thermal Cycler Dice Real Time System、LightCycler 等Real Time PCR扩增仪时不必使用.
检测指标是：各样品的目的基因和管家基因分别进行Realtime PCR反应。PCR产物与 DNA Ladder在2%琼脂糖凝胶电泳，GoldView染色，检测PCR产物是否为单一特异性扩增条带。
原理：
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
在另外的一组管子中，加入已知拷贝数的DNA同时扩增，每个管子中加入的数量是不同的，但是从最小数目到最大数目的这个范围涵盖了样本中DNA拷贝数。
PCR反应完成后，把已知拷贝数DNA的量和PCR荧光Ct值制成标准曲线，再把待测样本的CT值和该标准曲线比对，就可以得到样本中的起始拷贝数了
1.模板提取（一般为RNA）：Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop
3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBR Green Mix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBR Green，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他：除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板（Axygen反应比较好）、移液枪等，暂时就想到这么多。
这样设想的前提是因为，普通Taq酶也具有5‘－3’外切酶活性，如果可以的话，与普通PCR相比，反应体系需要做什么样的改动呢？
用的是ABI的机器。
PCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。
恒温PCR和实时荧光定量PCR的不同，是不同在实时荧光定量PCR的系统中加入了荧光染料（SYBR Green 或Taqman 探针等等）。以SYBR Green为例，这种染料可以结合在双链的DNA上，当PCR不断进行时，每一次退火生成的双链DNA也在增加，荧光染料结合也越多，荧光也越强。在机器中有一个探测荧光的探头，可以定量检测荧光的强度，转换成数值。这样就可以实时记录反映体系中DNA的反应情况。
荧光PCR更有优势，因为荧光PCR灵敏度高于恒温PCR，同样价格也高一些。
还需要反转录用的引物、定量PCR用的一对引物、荧光信号源（荧光染料或荧光标记的探针，看你用什么策略来做定量PCR）
报价要看你需要服务商提供什么服务，如果你只提供实验材料，要求服务商做以上全部工作，只检测一个指标（一个基因的表达水平变化），价格大约每个样品350-500元，多一个指标大约多90元。
一般至少做一组数据两个样品嘛，所以你按1000块一组样品预算吧。
