ThishighprofileEUtubefeaturesathin-wall,flat,opticalcap.Theglass-grade,opticalareaisverywellsuitedforReal-TimePCR,butitmayalsobeusedforwritingidentificationson.ThisEUtubeisalsosuitedforcentrifugationpurposes.LikeallotherhighprofileEUtubesandstrips,thistubecanbefixatedintheEUMatrix(165051),forsimultaneoususeinthermalcyclingapplications.
Canbeusedinmany0.2mlblockregularandReal-Timethermalcyclers.
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Clickhereforselectiontable eEnzyme是一家美国高质量生物学试剂及检测试剂盒品牌供应商，其与美国国立卫生研究院合作紧密，在全球范围内为广大科研客户提供高品质的产品与技术服务，其主要生产销售高质量的抗体和用于传染病研究的抗体/抗原，细胞因子蛋白，pcr产品等用于分子和细胞生物学研究的生物试剂，产品应用于生物技术研究，制药，药物发现，癌症研究，传染性疾病，微生物和分子诊断等众多生命科学技术领域
eENZYME为科学界生产和销售高质量的生物试剂盒和生物分析试剂盒。与NIH密切合作以保证产品在生命科学研究的多个领域成功地使用。努力提供新颖价廉且有效的工具，使实验更容易成功。产品在科研、生物技术、制药和政府的研究实验室中得到广泛的应用，包括药物发现、癌症研究、传染病研究、微生物学和分子诊断。
【简单介绍】eENZYME生产销售高质量的抗体和用于传染病研究的抗体/抗原，细胞因子蛋白，PCR产品等用于分子和细胞生物学研究的生物试剂，产品应用于生物技术研究，制药，药物发现，癌症研究，传染性疾病，微生物和分子诊断等众多生命科学技术领域。【详细说明】欢迎eENZYMEeENZYME生产销售高质量的抗体和用于传染病研究的抗体/抗原，细胞因子蛋白，PCR产品等用于分子和细胞生物学研究的生物试剂，产品应用于生物技术研究，制药，药物发现，癌症研究，传染性疾病，微生物和分子诊断等众多生命科学技术领域。 Ë ENZYMEis的高品质生物试剂及实验室设备科学界一个制造商和分销商。我们密切合作，与美国国立卫生研究院的社区，以保证我们的产品生命科学研究在广泛领域的成功表现。我们致力于提供创新和具有成本效益的工具，使您更容易取得成功。我们的产品用于在学术，生物技术，制药和政府研究实验室，包括药物发现，癌症研究，传染病研究，微生物学和分子诊断许多不同的应用。公司网站：www.eenzyme.com 目录号描述产品类型应用单位供应商IA-01SW-0100抗HA（A/California/06/09）（甲型H1N1流感）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-011-0100抗H1（H1N1/Pan）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-001-0100抗HA1（A/新喀里多尼亚）（甲型H1N1流感）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-023-0100抗-NP（A/新Caledonia/20/1999）（甲型H1N1流感兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-022-0100抗M2型（H1N1/A/新喀里多尼亚（H1N1））兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004A-0100抗-H3（H3N2）（A/WIS/2005）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗-M1（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004-0100抗HA（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-020-0100抗-NA（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005H-0100抗H5（A/香港Kong/483/97）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005-0100抗HA1（H5N1）（A/Vietnam/1203/2004）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-006-0100抗HA1（H5N1，禽流感）（A/斑头雁/Qinghai/12/05）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-010-0100抗-HA2（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-012-0100抗-M1（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-021-0100抗-NA（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1，人）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-025-0100抗NS1（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗HA1（A/Chicken/NY/29878/91）（H2N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-009-0100抗HA1（A/chicken/HongKong/NT366/03）（H9N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-027-0100抗-NA（A/Chicken/HongKong/NT366/03）（H9N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-007-0100抗HA1（A/duck/Hainan/6/2004）（H6N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-008-0100抗HA1（A/鸡/荷兰/2/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-028-0100抗-NA（A/Chicken/Netherlands/1/03）（H7N7）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-0015-0100抗-H11（A/duck/Yangzhou/906/02）（H11N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0031抗B型流感（NP）的多克隆兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0032抗B型流感（医管局）多克隆兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-013-0100抗-H12（A/pintail/Alaska/102/05）（H12N5）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-014-0100抗-H4（A/environment/Maryland/1101/06）（H4N6）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-018抗-H15（A/Australia/83/00（H15N8））兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-019抗-H16（A/Sweden/99（H16N3））兔多克隆抗体WB等100微克eENZYME目录号描述产品类型应用单位供应商IA-01SW-0100抗HA（A/California/06/09）（甲型H1N1流感）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-011-0100抗H1（H1N1/Pan）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-001-0100抗HA1（A/新喀里多尼亚）（甲型H1N1流感）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-023-0100抗-NP（A/新Caledonia/20/1999）（甲型H1N1流感兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-022-0100抗M2型（H1N1/A/新喀里多尼亚（H1N1））兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004A-0100抗-H3（H3N2）（A/WIS/2005）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗-M1（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004-0100抗HA（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-020-0100抗-NA（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005H-0100抗H5（A/香港Kong/483/97）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005-0100抗HA1（H5N1）（A/Vietnam/1203/2004）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-006-0100抗HA1（H5N1，禽流感）（A/斑头雁/Qinghai/12/05）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-010-0100抗-HA2（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-012-0100抗-M1（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-021-0100抗-NA（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1，人）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-025-0100抗NS1（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗HA1（A/Chicken/NY/29878/91）（H2N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-009-0100抗HA1（A/chicken/HongKong/NT366/03）（H9N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-027-0100抗-NA（A/Chicken/HongKong/NT366/03）（H9N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-007-0100抗HA1（A/duck/Hainan/6/2004）（H6N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-008-0100抗HA1（A/鸡/荷兰/2/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-028-0100抗-NA（A/Chicken/Netherlands/1/03）（H7N7）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-0015-0100抗-H11（A/duck/Yangzhou/906/02）（H11N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0031抗B型流感（NP）的多克隆兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0032抗B型流感（医管局）多克隆兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-013-0100抗-H12（A/pintail/Alaska/102/05）（H12N5）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-014-0100抗-H4（A/environment/Maryland/1101/06）（H4N6）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-018抗-H15（A/Australia/83/00（H15N8））兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-019抗-H16（A/Sweden/99（H16N3））兔多克隆抗体WB等100微克eENZYME目录号描述产品类型应用单位供应商IA-01SW-0100抗HA（A/California/06/09）（甲型H1N1流感）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-011-0100抗H1（H1N1/Pan）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-001-0100抗HA1（A/新喀里多尼亚）（甲型H1N1流感）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-023-0100抗-NP（A/新Caledonia/20/1999）（甲型H1N1流感兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-022-0100抗M2型（H1N1/A/新喀里多尼亚（H1N1））兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004A-0100抗-H3（H3N2）（A/WIS/2005）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗-M1（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004-0100抗HA（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-020-0100抗-NA（H3N2）[A/Wyoming/3/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005H-0100抗H5（A/香港Kong/483/97）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005-0100抗HA1（H5N1）（A/Vietnam/1203/2004）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-006-0100抗HA1（H5N1，禽流感）（A/斑头雁/Qinghai/12/05）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-010-0100抗-HA2（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-012-0100抗-M1（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-021-0100抗-NA（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1，人）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-025-0100抗NS1（A/Vietnam/1203/2004）（H5N1）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗HA1（A/Chicken/NY/29878/91）（H2N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-009-0100抗HA1（A/chicken/HongKong/NT366/03）（H9N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-027-0100抗-NA（A/Chicken/HongKong/NT366/03）（H9N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-007-0100抗HA1（A/duck/Hainan/6/2004）（H6N2）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-008-0100抗HA1（A/鸡/荷兰/2/03）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-028-0100抗-NA（A/Chicken/Netherlands/1/03）（H7N7）兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-0015-0100抗-H11（A/duck/Yangzhou/906/02）（H11N2）兔多克隆抗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1.模板提取（一般为RNA）：Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop
3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBR Green Mix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBR Green，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他：除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板（Axygen反应比较好）、移液枪等，暂时就想到这么多。
组织用Trizol法提取总RNA浓度、纯度都很好，但逆转录后跑PCR，CT值偏高，内参的在22-27之间，目的基因在30-36之间，不知道是怎么回事，如何来解决，求高手赐教。我用的Takara的试剂盒。
跑到还有半小时的时候，跳出一个对话框：“analysiscannotproceed:notenoughsamplesdefined”，最后做出来的结果有扩增曲线但是没有熔解曲线，请各位大神帮忙解释一下。
两步法，是因为设计引物的时候把退火温度设为酶的工作温度，而且定量PCR的产物都很短，需要的时候都短，所以两步法更方便。三步法的话，花的时间长，不利于快速实验。
RNA 质量
RNA 质量主要包括RNA的纯度（没有蛋白质和DNA的污染）以及完整性。传统的RNA质量的评价通过分析A260/A280的比值或者对琼脂糖凝胶电泳rRNA的条带的分析。Agilent Bioanalyser/BioRad Experion 微流体毛细电泳系统也是一种较新的分析方法。Agilent的2100也是一种十分好的分析RNA质量的方法，它通过分析18S以及28S rRNA的分析图谱，通过图谱来反应RNA的量和完整性，其完整性通过完整性系数（RIN）来反应。样品的RINs在10-4之间。10代表完整的RNA，4代表没有完整的rRNA带。
由于以上的方法并非100%准确定反应mRNA的完整性，因为他们只是反应rRNA的量来间接测定mRNA的完整性。这里推荐一种方法：采用GAPDH的3’：5’分析法。
我们使用oligo dT进行逆转录，然后对逆转录的cDNA用multiplex荧光定量评价。设计三个taqman探针来定量三种相同大小的扩增产物。探针设计的位点分别位于3’；5’以及中部。扩增产物的之间的比值反应RNA的完整性。如果3’；5’的比值在1，反应较高度完整性，如果高于5说明降解。
QRT-PCR抑制物的组成
QRT-PCR抑制物严重减少了PCR的灵敏度以及热动力学反应，高度的抑制还导致假阴性的结果。
抑制物的来源：生物样品的核酸抽提以及共沉淀中的混合物，盐离子，尿素，血红素，heparin以及IgG.
是否有抑制物的评价体系：
1.通过对目的样品进行梯度稀释进行PCR扩增效率的检测
2.通过内部扩增对照来反应样品处理过程中样本的情况
3.用细菌检测临床样品的抑制
4.通过标准人工合成的扩增进行RT-PCR来反应目标检测物的抑制情况
反转录反应系统
1.RT和PCR单一酶系统
2.RT和PCR分离的酶系统
3.RNA逆转录引物的选择
引物主要有三种：
1.随机引物：随机引物，特别是6nt引物对所有的靶位点不产生十分稳定一致的结果，建议使用15nt的随机引物.
2.oligo-dT：只能用于mRNA完整的样品，特别有polyA .而且对于一些特殊的变异体以及较长的3’UTR的区域比较困难
3.特异引物：最特异最灵敏的方法。特别RNA量足够情况下建议使用此法。
如果要测量细胞表面2个受体的比率，最好用流式细胞仪来测量
