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原题
Identificationofmembranetype-1matrixmetalloproteinaseasatargetofhypoxia-inducIBLefactor-2[alpha]invonHippel-Lindaurenalcellcarcinoma.[Article]
来源
Oncogene.24(6):1043-1052,February3,2005.
AccessionNumber
00006374-200524060-00010.
Author
Petrella,BrendaL1;Lohi,Jouko3;Brinckerhoff,ConstanceE*,1,2
Institution
(1)DepartmentofBiochemistry,NorrisCottonCancerCenter,DartmouthMedicalSchool,Lebanon,NH03756,USA;(2)DepartmentofMedicine,NorrisCottonCancerCenter,DartmouthMedicalSchool,Lebanon,NH03756,USA;(3)DepartmentofPathology,HaartmanInstitute,UniversityofHelsinkiandHelsinkiUniversityCentralHospital,Helsinki,FIN-00014,Finland
摘要原文
Metastaticrenalcellcarcinoma(RCC)resultingfromthehereditarylossofthevonHippel-Lindau(VHL)tumorsuppressorgeneistheleADIngcauseofdeathinVHLpatientsduetothedeleteriouseffectsofthemetastatictumor(s).VHLfunctionsinthedestructionofthealphasubunitsoftheheterodimerictranscriptionfactor,hypoxia-induciblefactor(HIF-1[alpha]andHIF-2[alpha]),innormoxicconditions.WhenVHLfunctionislost,HIF-[alpha]proteinisstABIlized,andtargethypoxia-induciblegenesaretranscribed.Theprocessoftumorinvasionandmetastasisinvolvesthedestructionoftheextracellularmatrix,whichisaccomplishedprimarilybythematrixmetalloproteinase(MMP)familyofenzymes.Here,wedescribeaconnectionbetweenthelossofVHLtumorsuppressorfunctionandtheupregulationofmembranetype-1MMP(MT1-MMP)geneexpressionandprotein.Specifically,MT1-MMPisupregulatedinVHL-/-RCCcellsthroughanincreaseingenetranscription,whichismediatedbythecooperativeeffectsofthetranscriptionfactors,HIF-2andSp1.Further,weidentifyafunctionalHIF-bindingsiteintheproximalpromoterofMT1-MMP.Toourknowledge,thisisthefirstreporttoshowdirectregulationofMT1-MMPbyHIF-2andtoprovideadirectlinkbetweenthelossofVHLtumorsuppressorfunctionandanincreaseinMMPgeneandproteinexpression.
编译
vonHippel-Lindau(VHL)肿瘤抑制基因遗传性丢失引起的转移性肾细胞癌（RCC）在VHL病人中导致死亡的原因是转移性瘤的有害作用。在含氧正常情况下，VHL作用是破坏异二聚转录因子和缺氧诱导因子（HIF-1[a]和HIF-2[a]）的a亚基。当VHL作用丧失后，HIF[a]蛋白变的稳定，并且靶缺氧诱导基因被转录。肿瘤侵入和转移的过程包括细胞外基质的破坏—主要通过基质金属蛋白酶（MMP）家族的酶完成。研究者阐明了VHL肿瘤抑制功能的丧失与I型膜基质金属蛋白酶（MT1—MMP）基因表达和蛋白质之间的联系。基因转录的增加使VHL-/-RCC细胞中MT1—MMP发生向上调节，这一作用是转录因子HIF-2[a]及sp1共同作用的结果。据称，这份论文首次报道HIF-2调节了MT1-MMP，并且提出VHL肿瘤抑制功能与MMP基因表达和蛋白质表达之间具有直接的联系。

病人 女 43岁
入院10天，伴有肩部肌肉刺痛，已有好转，但今天的肝功能常规检查，转氨酶突然从140多升到310多，入院一直有互肝措施，静脉输液。无不良饮食习惯。有慢性浅表性胃炎病史。问，转氨酶突然升高的原因？各项肝炎检查无问题，ct x 光无问题

同题，请大神指正

1.反应混合液

0.2MTris-HCl缓冲液pH=8.00.20ml

15mM4-AA溶液0.10ml

0.2%（w/v）苯酚溶液0.10ml

2.0M甲醇溶液0.25ml

50U/mlPOD溶溶液0.10ml

超纯水0.25ml

备注：

*50U/mlPOD溶液：将500U的POD溶于10ml超纯水中并混匀。

2.反应终止液

无水乙醇

3.酶稀释缓冲液

10mMTris-HCl缓冲液pH=8.0

4.说明

（1）4-AA：4-氨基安替比林

（2）POD：辣根过氧化物酶

5.过程

精确称量约20mg样品，加酶稀释缓冲液至总量为20ml，用酶稀释缓冲液稀释，根据需要调节浓度（χ，χ≤0.04mg/ml）

6.实验

1.准确地吸取1.0ml反应混合液到小试管中后，在37℃预孵育。

2.5分钟后，加入50μL酶溶液，并在37℃混合开始反应。在空白对照中，加入50μL酶稀释缓冲液代替酶溶液。

3.在反应开始5分钟后，加入2.0ml反应终止液以终止反应。

4.测量480nm处的吸光度。

吸光度样本溶液：As

空白对照：Ab

△A=（As-Ab）≤0.20Abs

酶与底物相结合,检测他们之间作用力和结合强度的方法都有那些?

酶不同于一般的化学催化剂,有下列特征：
一) 酶具有高度的专一性
(二)酶具有很高的催化效率（高效性） 一般地说,醇催化的反应速度比化学催化剂催化的反应速度要市106-1013 倍
(三)反应条件温和 化学催化剂催化化学反应,一般需要剧烈的反应条什(如：高温、高压、强酸、强碱等),但是,酶催化反应(酶促反应)一般是在常温、常压、中性酸碱度等温和的反应条件下进行的.
(四)酶易变性失活 化学催化剂在一定条件下,会因中毒而失去催化能力；而酶比化学催化剂更加脆弱,更易失去活性.凡是使蛋白质变性的因素(加强酸、强碱、高温等),都能够使酶完全失去活性.
(五)体内酶活性是受调控的 在生物体内,酶活性是受到调节控制的.这是酶区别于化学催化剂的又一个重要的特征.对酶活性调控的方式很多,如：反馈调节、共价修饰调节、酶原激活、别构调节、激素调节等.

我在做小鼠的子宫蜕膜组织，请问下大家，sigma的4型胶原酶工作浓度是多少呢？加多少量合适呢？

谷丙转氨酶（简称ALT）升高在临床是很常见的现象。肝脏是人体最大的解毒器官，该脏器是不是正常，对人体来说是非常重要的。ALT升高肝脏功能出现问题的一个重要指标。在常见的因素里，各类肝炎都可以引起ALT升高，这是由于肝脏受到破坏所造成的。一些药物如抗肿瘤药、抗结核药，都会引起肝脏功能损害。大量喝酒、食用某些食物也会引起肝功能短时间损害。
ALT主要存在于肝细胞浆内，其胞内浓度高于血清中1000-3000倍。只要有1%的肝细胞坏死，就可以使血清酶增高一倍。因此，ALT被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。但它并不具器官专一性，许多疾病都可以引起它的增高。明显升高见于急性病毒性肝炎，中度升高见于慢性肝炎、肝硬化活动期、肝癌、肝脓肿，心梗、心肌炎、心衰等也可轻度升高。因此对ALT升高的评价应密切结合临床。部分ALT升高与脂肪肝、饮用酒精有关。临床常用的保肝药物较多。但有些药物治疗效果可以但容易反复，致使一些肝脏疾病长期不能治愈，大量的肝细胞遭受破坏。如何保护肝细胞，是保护肝脏功能的关键所在。

转氨酶只不过是临床上常用的检查肝脏功能的一项指标，转氨酶的正常与否，并不能代表肝功能的好坏，转氨酶的高低也不是与肝脏功能状态呈比例的,转氨酶”水平的高低几乎不能反应肝脏的功能，转氨酶不过是肝细胞里面的一种成分而已，相比较而言这种成分在肝细胞中的含量比较高，肝细胞一旦遭到打击和破坏，转氨酶就被释放到了血液。而在这个时候，如果损害的肝脏细胞不多，肝脏完全能够正常工作
通常，体检中主要检查的转氨酶是丙氨酸转氨酶(ALT)。1%的肝脏细胞损害，
可以使血中ALT的浓度增加1倍。因此，ALT水平可以比较敏感地监测到肝脏是否受
到损害。

转氨酶水平在0—40之间是正常的。如果超出正常范围，医生会建议再查一次
，排除由于实验室设备故障和操作错误等因素造成误差的可能。如果转氨酶水平还
高，多半是由病毒性肝炎或其他肝病所致。但要确定是不是病毒性肝炎，还需要做
其他检查，结合病史、症状、体征等全面分析。

即使确认是病毒性肝炎，也不能简单地以ALT升高的程度来判断病情，因为对
于重型肝炎，可能由于存活的肝细胞比较少，释放到血液中的转氨酶很少，ALT反
而随病情的恶化而降低。

转氨酶高不都是肝炎

ALT的升高只表示肝脏可能受到了损害。除了肝炎，其他很多疾病都能引起转
氨酶增高。主要还有以下情况：

首先，人体内许多组织都含有转氨酶，比如心肌炎和心肌梗死都可能使天冬氨
酸转氨酶升高。

其次，如果有胆结石等胆道梗阻性疾病，可能因为淤胆而使血中转氨酶水平升
高。

此外，对于一些看起来没什么大病的人来说，还有可能因为长期酗酒导致酒精
肝，或饮食结构不合理导致脂肪肝，造成转氨酶高。

劳累也可能让转氨酶升高

对于健康人来说，转氨酶水平在正常范围内升高或降低，并不意味着肝脏出了
问题，因为转氨酶非常敏感，健康人在一天之内的不同时间检查，转氨酶水平都有
可能产生波动。
另外，健康人的转氨酶水平也有可能暂时超出正常范围。剧烈运动、过于劳累
或者近期吃过油腻食物，都可能使转氨酶暂时偏高。如果在检查转氨酶前一晚加班
工作，没睡好觉，或是体检前早餐时吃了油炸的东西，检查结果可能就会超出正常
范围。一个人刚刚在操场上跑了几圈，就立刻检查他的转氨酶水平，结果也可能会
高出正常范围。
如果是由于这些情况导致转氨酶升高，只要好好休息，过一段时间后再做检查
，就会发现转氨酶水平恢复正常了。
还有一种会造成转氨酶升高的情况是生病时吃了会损伤肝脏的药物，比如红霉素、四环素、安眠药、解热镇痛药、避孕药，还有半夏、槟榔、青黛等中药。在停用这些药物后，转氨酶水平会很快恢复正常。
总之，如果发现自己转氨酶高了，不要过于紧张，不要担心自己患了严重的肝脏疾病，但是也一定要给予足够的重视，好好休息，及时接受
正规复查和治疗。展开

不可以。
酶只是催化剂，其本身无法直接氧化它。
酶是具有生物催化功能的生物大分子，即生物催化剂，它能够加快生化反应的速度，但是不改变反应的方向和产物。其只能用于改变各类生化反应的速度，但并不是生化反应本身。只是催化剂的一种。
所以NADPH氧化酶只是促进了NADPH的氧化过程，无法直接氧化NADPH。

根据辅酶Q10资料整理-蚂蚁淘论坛3楼的辅酶Q10英文教材其中一部分的整理。

相关疾病：胸腔积液结核病有个患者胸水中的乳脱是1245U/l,血清是213U/l，想请教，血清和胸水中的乳脱有关系吗？

请问谁做过Pfu酶扩硫代化修饰的引物的? 能交流一下吗?能不能推荐一些性价比高的Pfu酶啊?

原代培养中脱氧核糖核酸酶到底是起什么作用
相同点：都能以DNA为模板，从5'向3'进行核苷酸或脱氧核苷酸的聚合反应。
不同点
1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP；DNA聚合酶底物是dNTP。
2、RNA聚合酶作用不需要引物，而DNA聚合酶作用需要引物。
3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能，而DNA聚合酶没有，当需要解开双链的时候要解旋酶和拓扑异构酶的帮助。
4、RNA聚合酶只具有5‘到3’端的聚合酶活性，而DNA聚合酶不仅有5‘到3’端的聚合酶活性，还具有3‘到5’端的外切酶活性。保证DNA复制时候校对，所以复制的忠实性高于转录的。
5、RNA聚合酶通常作用于转录过程；DNA聚合酶通常作用于DNA复制过程