
Overview:
KDM4Aorlysine(K)-specificdemethylase4AisamemberoftheJumonjidomain2(JMJD2)familythatencodesaproteincontainingaJmjNdomain,aJmjCdomain,aJD2Hdomain,twoTUDORdomains,andtwoPHD-typezincfingers.KDM4Afunctionsineuchromatintoremovehistonemethylationmarksthatareassociatedwithactivetranscription(1).KDM4Aalsoactasatrimethylation-specificdemethylasethoseconvertingspecifictrimethylatedhistoneresiduestothedimethylatedform,andasatranscriptionalrepressor(2).
GeneAliases:
JMJD2A;JHDM3A;KIAA0677
GenbankNumber:
BC002558
References:
1.Klose,R.J.et.al:ThetranscriptionalrepressorJHDM3AdemethylatestrimethylhistoneH3lysine9andlysine36.Nature442:312-316,2006.2.Whetstine,J.R.et.al:ReversalofhistonelysinetrimethylationbytheJMJD2familyofhistonedemethylases.Cell125:467-481,2006.
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植物材料 用最精确的方法,称取不超过100mg的植物材料,置于处理过的研钵,加入液氮进行研磨 将研磨得到的粉末,快速转移至无RNase,并经过液氮冷却的2mL离心管(自备),
但是,这样做的前提的,RNA提得要好,浓度要高,这样免得RNA降解到不能用了。因为在有二价阳离子的(DNAseI buffer含有)情况下,RNA在60度以上时必然发生非酶促降解。
想搞清一个问题,如何区别是因为small RNA 引起的调控呢?还是tRNA引起的调控,有没有有效的分离这两种RNA的办法呢?
样品处理:
a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀。
b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
c. 贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。

