
Overview:
MAPKAPK5isamemberoftheserine/threoninekinasefamilythatrespondstocellularstressandproinflammatorycytokines.MAPKAPK5isactivatedthroughitsphosphorylationbyMAPkinasesincludingMAPK1/ERK,MAPK14/p38-alpha,andMAPK11/p38-beta(1).MAPKAPK5isactivatedinHeLacellsinresponsetocellularstressandproinflammatorycytokines.MAPKAPK5activityisregulatedbyp38-alphaandp38-betabothinvitroandinvivo,andthr-182istheregulatoryphosphorylationsiteofMAPKAPK5(2).Invitro,MAPKAPK5kinasephosphorylatesheatshockproteinHSP27atitsphysiologicallyrelevantsites.
GeneAliases:
PRAK
GenbankNumber:
NM_003668
References:
1.New,L.;Jiang,Y.etal:PRAK,anovelproteinkinaseregulatedbythep38MAPkinase.EMBOJ.17:3372-3384,1998.2.Ni,H.;Wang.etal:MAPKAPK5,anovelmitogen-activatedproteinkinase(MAPK)-activatedproteinkinase,isasubstrateoftheextracellular-regulatedkinase(ERK)andp38kinase.Biochem.Biophys.Res.Commun.243:492-496,1998.
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植物材料 用最精确的方法,称取不超过100mg的植物材料,置于处理过的研钵,加入液氮进行研磨 将研磨得到的粉末,快速转移至无RNase,并经过液氮冷却的2mL离心管(自备),
但是,这样做的前提的,RNA提得要好,浓度要高,这样免得RNA降解到不能用了。因为在有二价阳离子的(DNAseI buffer含有)情况下,RNA在60度以上时必然发生非酶促降解。
想搞清一个问题,如何区别是因为small RNA 引起的调控呢?还是tRNA引起的调控,有没有有效的分离这两种RNA的办法呢?
样品处理:
a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀。
b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
c. 贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。

