
Overview:
MEKK2(alsoknownasmitogen-activatedproteinkinase(MAPK)kinasekinase2)isamajorupstreamactivatoroftheJNK/MAPKcascade(1).MEKK2canmediateinvitrophosphorylationofMKK4andMKK7whicharekeyMAPKsthatactivateJNK.Inaddition,MEKK2immunoprecipitatesactivatedJUNinanIL1-dependentmanner.RheumatoidarthritisandosteoarthritissynovialtissuesshowhighlevelsofMEKK2indicatingthatitmaybeanimportantactivatoroftheJNKpathwayinarthritis(2).EndogenousMEKK2islocalizedmainlyinthecytosolofunstimulatedcells.
GeneAliases:
MAP3K2,MEKK2B
GenbankNumber:
NM_006609
References:
1.Blank,J.L.etal:Molecularcloningofmitogen-activatedprotein/ERKkinasekinases(MEKK)2and3:regulationofsequentialphosphorylationpathwaysinvolvingmitogen-activatedproteinkinaseandc-Junkinase.J.Biol.Chem.271:5361-5368,1996.2.Hammaker,D.R.;Boyle,D.L.;Chabaud-Riou,M.;Firestein,G.S.:Regulationofc-JunN-terminalkinasebyMEKK-2andmitogen-activatedproteinkinasekinasekinasesinrheumatoidarthritis.J.Immun.172:1612-1618,2004.
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植物材料 用最精确的方法,称取不超过100mg的植物材料,置于处理过的研钵,加入液氮进行研磨 将研磨得到的粉末,快速转移至无RNase,并经过液氮冷却的2mL离心管(自备),
但是,这样做的前提的,RNA提得要好,浓度要高,这样免得RNA降解到不能用了。因为在有二价阳离子的(DNAseI buffer含有)情况下,RNA在60度以上时必然发生非酶促降解。
想搞清一个问题,如何区别是因为small RNA 引起的调控呢?还是tRNA引起的调控,有没有有效的分离这两种RNA的办法呢?
样品处理:
a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀。
b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
c. 贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。

