
Overview:
MYLK3(ormyosinlightchainkinase3)playsakeyroleinrateofcross-bridgerecruitmentincardiacmyocytes.MYLK3isupregulatedinfailinghumanmyocardiaandexpressionofMYLK3correlateswiththepulmonaryarterialpressureofpatientswithheartfailure(1).KnockdownofMYLK3withsmallinterferingRNAsinculturedratcardiomyocytesdecreasesMyl2phosphorylationandimpairsepinephrine-inducedactivationofsarcomerereassembly(2).RecombinantmurineMYLK3showsspecificityforMyl2(Mlc2v)andthephosphorylationiscalcium-andcalmodulin-dependent.
GeneAliases:
caMLCK;MLCK,MLCK2,MGC126319,MGC126320
GenbankNumber:
BC109097
References:
1.Chan,J.Y.etal:Identificationofcardiac-specificmyosinlightchainkinase.Circ.Res.2008;102:571-580.2.Seguchi,O.etal:Acardiacmyosinlightchainkinaseregulatessarcomereassemblyinthevertebrateheart.J.Clin.Invest.2007;117:2812-2824
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植物材料 用最精确的方法,称取不超过100mg的植物材料,置于处理过的研钵,加入液氮进行研磨 将研磨得到的粉末,快速转移至无RNase,并经过液氮冷却的2mL离心管(自备),
但是,这样做的前提的,RNA提得要好,浓度要高,这样免得RNA降解到不能用了。因为在有二价阳离子的(DNAseI buffer含有)情况下,RNA在60度以上时必然发生非酶促降解。
想搞清一个问题,如何区别是因为small RNA 引起的调控呢?还是tRNA引起的调控,有没有有效的分离这两种RNA的办法呢?
样品处理:
a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀。
b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
c. 贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。

