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Kapa biosystems/KAPA Stranded mRNA-Seq Kits/KK8000/5 mL
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Kapa biosystems/KAPA Stranded mRNA-Seq Kits/KK8000/5 mL
品牌 / 
kapabiosystems
货号 / 
KK8000
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Description:

KAPAPureBeads(5mL)

KAPAStrandedmRNA-SeqKits

Evendifficultmessagesshouldbeunderstood.

KAPAStrandedmRNA-SeqKitsincludealltheenzymesandbuffersrequiredforCDNAlibrarypreparationforIlluminaNext-GenerationSequencing,utilizing100ng–4µgoftotalRNA.KAPAmRNACaptureBeadsareincludedforisolationofpoly(A)-tailedRNA.Kitsprovideprecisemeasurementofstrandorientation(>99%),uniformcoverage,andhigh-confidencemappingofalternatetranscripts,andareoptimizedfortheimprovedcoverageofGC-richandlow-abundancetranscripts.*KitscontainKAPAHiFiforhigh-efficiencyandlow-biaslibraryamplification,aswellasKAPAmRNACaptureBeadsandastreamlined,“with-bead”protocol.

KAPAStrandedRNA-SeqKitsincludealltheenzymesandbuffersrequiredforcDNAlibrarypreparationforIlluminaNext-GenerationSequencing,butdonotcontaintheKAPAmRNACaptureBeads.Kitscanbeusedtopreparelibrariesfrom10–400ngofeitherpoly(A)-selected,ribosomallydepleted,ortotalRNA.

NEW!KAPADual-IndexedAdapterKitsarenowavailable.FormoreinformationonKAPAAdapterKits,scrolldowntotheOrderingsection,ordownloadtheKAPAAdapterandBeadCalculator.

Download AdapterandBeadCalculator

 

*Dataonfile.
ForResearchUseOnly.Notforuseindiagnosticprocedures.

ProductHighlights

Improved coverage of GC-rich transcripts. The 5

Uncoverchallengingtranscripts 

  • ImprovedcoverageofGC-richtranscripts
  • Enhancedidentificationofexonicregions
Improved coverage of low-abundance transcripts. GLTPD1, a lesser-expressed transcript, is covered more comprehensively with the KAPA Stranded mRNA-Seq Kit (green) at 500 ng input total RNA (outlined in red). In comparison, Illumina TruSeq Stranded mRNA Sample Prep Kit (orange) shows coverage gaps, even with higher inputs (4 μg). Data on file.

Detectlow-abundancetranscripts

  • Enablesidentificationoftranscriptsmissedbycompetitorkits,evenwithhighinput*
  • Highuniformityacrossvaryingamountsofsampleinput*
30M),KAPAStrandedmRNA-SeqlibrariesgenerateagreaterpercentageofmappedreadsandlowerduplicationratesthananalogouslibrariespreparedwiththeIlluminaStrandedmRNASamplePrepKitwhilemaintaining99%strandspecificity.Dataonfile.">Highly mapped reads and strand specificity enable sensitive detection of expressed genes. With similar numbers of filter-passed reads (>30M),KAPAStrandedmRNA-SeqlibrariesgenerateagreaterpercentageofmappedreadsandlowerduplicationratesthananalogouslibrariespreparedwiththeIlluminaStrandedmRNASamplePrepKitwhilemaintaining99%strandspecificity.Dataonfile.

Identifymoregenes

  • HigherpercentageofuniquelymappedreadscomparedtoIllumina TruSeq™StrandedmRNASamplePrepKits*
  • Lowerduplicationratesyieldbettercoverage
Minimal positional bias. With intact, high-quality RNA input, 3

Maintainhighcoverageuniformity

  • Minimal5’–3′biasacrosstranscripts
  • Moreuniformdistributionofreadsovereachtranscript

 

*Dataonfile.

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Sample QC

KAPAhgDNAQuantificationandQCKit

Library Amplification

KAPALibraryAmplificationKits

Library Preparation

KAPAHyperPrepKits

Library Quantification

KAPALibraryQuantificationKits

Applications:

Applications
  • Geneexpression
  • Singlenucleotidevariation(SNV)discovery
  • Post-transcriptionalSNVs
  • Fusiongeneidentification
  • Targetedtranscriptome
  • Wholetranscriptome

KitSpecificationsandContents/Storage:

KitSpecificationsandContents/Storage

Kitscanbestoredforupto8 months at-20˚C. KAPAmRNACaptureBeadscanbestoredforupto8months at-4˚C.

Components

mRNA_Component Chart

Specifications

Spec
Description
CompatIBLePlatform
IlluminaHiSeq,NextSeq,MiSeqandGAIIx
StartingMaterial
TotalRNA,mRNA,orribosomaldepletedRNA
InputAmount
StrandedmRNA-SeqKits:100ng–4µgStrandedRNA-SeqKits:10ng–400ng
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2021-08-05
北京北方同正生物技术发展有限公司在发布的2D 样品制备试剂盒供应信息,浏览与2D 样品制备试剂盒相关的产品或在搜索更多与2D 样品制备试剂盒相关的内容。 查看更多>
上海元象医疗器械有限公司在发布的细胞悬液制备试剂盒(组织消化试剂盒)供应信息,浏览与细胞悬液制备试剂盒(组织消化试剂盒)相关的产品或在搜索更多与细胞悬液制备试剂盒(组织消化试剂盒)相关的内容。 查看更多>
上海一研生物科技有限公司在发布的一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒100 次直销供应信息,浏览与一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒100 次直销相关的产品或在搜索更多与一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒100 次直销相关的内容。 查看更多>
2018-08-27
北京益奥柏科贸有限公司在发布的SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(15%)供应信息,浏览与SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(15%)相关的产品或在搜索更多与SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(15%)相关的内容。 查看更多>
1.一次制备,-80度保存,多次使用。 2.操作简单,单溶液制备,除酵母培养的时间外,整个操作只需10分钟。 3.试剂盒含高效转换液,即开即用。 查看更多>
碧云天生产的超级感受态细菌制备试剂盒(Supercompetent Cell Preparation Kit)是一种用于快速制备高转化效率大肠杆菌感受态细菌的试剂盒。超级感受态细菌制备试剂盒是在传统超级感受态细菌制备方法的基础上进行适当改良而成,操作便捷,转化效率高。 使用本试剂盒可以使感受态效率达到108-109cfu/μg质粒。对于小的质粒效率略高,而对于大的质粒则效率略低一些。用本试剂盒制备的超级感受态细菌不仅可以转化质粒,而且非常适合于转化普通的连接产物,特别适合于转化平端连接等需要高转 查看更多>
1. 高效感受态细胞制备试剂盒是在传统高效感受态细胞制备方法的基础上进行适 当改良而成,操作便捷,转化效率高。 2. 使用本试剂盒可以使感受态效率达到108 cfu/μg 质粒。对于小的质粒效率略高,而对于大的质粒则效率略低一些。用本试剂盒制备的高效感受态细胞不仅可以转化质粒,而且非常适合于转化普通的连接产物,特别适合于转化平端连接等需要 高转化效率的情况。 3. 使用本试剂盒操作简单,细菌培养好后仅需60 分钟左右即可完成高效感受态细 胞的制备。 查看更多>
广州市锐博生物科技有限公司在发布的siRNA文库—genOFF™ Human Genome siRNA Premix Library供应信息,浏览与siRNA文库—genOFF™ Human Genome siRNA Premix Library相关的产品或在搜索更多与siRNA文库—genOFF™ Human Genome siRNA Premix Library相关的内容。 查看更多>
北京强欣博瑞生物技术有限公司在发布的CNBr-Sepharose 4B柱制备试剂盒供应信息,浏览与CNBr-Sepharose 4B柱制备试剂盒相关的产品或在搜索更多与CNBr-Sepharose 4B柱制备试剂盒相关的内容。 查看更多>
产品及特点:本裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理,高效快速制备裂殖酵母化学感受态细胞,用于长期冻存以备后续转化的产品,它具有下列特点: 1. 一次制备,-80℃保存,多次使用,免去每次转化都要制备酿酒酵母感受态细胞。 2. 操作简单,单溶液制备,除酵母培养的时间外,整个操作只需要30分钟。 3. 主要用于裂殖酵母S.pombe,其他多种实验用酵母菌株最好选用酵母化学感受态细胞制备试剂。 4. 受体酵母可以不含质粒,也可用于携带有选择性质粒的酵母(如双杂交体系中的酵母)。 查看更多>
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众所周知,氨基酸和那个密码子,只是通过那个密码子表的对应关系,对应起来的。但是呢,氨基酸和tRNA反密码子,对应又是通过那个氨基酰-tRNA合成酶催化作用产生的,为什么那个酶有那么大的功能呢,有没有那个文献解释?
有人用天根的植物RNA提取试剂盒提取过RNA
提RNA一般注意:提取前材料的保存(新鲜材料,过夜处理的样品),提取中对外源性的RNA酶的清除控制(离心管,PCR管,电泳槽,台面等的无RNA酶化处理),提取后需要-80度保存.其次跑电泳时,注意电泳液最好用新鲜的,核酸染料等诸多因素.
细菌总RNA提取试剂盒( germs islation kit).
对于外源性RNA酶的控制外源RNA酶清除剂,避免使用致癌物DEPC的危险方法就可简单操作清除耗材,台面,仪器等的外源RNA酶的降解作用.
tRNA的种类和功能123
Qzhaotingting2017-10-12
tRNA(又叫转运RNA)约含70~100个核苷酸残基,是分子量最小的RNA,占RNA总量的16%,现已发现有100多种。tRNA的主要生物学功能是转运活化了的氨基酸,参与蛋白质的生物合成。
各种tRNA的一级结构互不相同,但它们的二级结构都呈三叶草形。这种三叶草形结构的主要特征是,含有四个螺旋区、三个环和一个附加叉。四个螺旋区构成四个臂,其中含有3′末端的螺旋区称为氨基酸臂,因为此臂的3′-末端都是C-C-A-OH序列,可与氨基酸连接。三个环分别用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ表示。环Ⅰ含有5,6二氢尿嘧啶,称为二氢尿嘧啶环(DHU环)。环Ⅱ顶端含有由三个碱基组成的反密码子,称为反密码环;反密码子可识别mRNA分子上的密码子,在蛋白质生物合成中起重要的翻译作用。环Ⅲ含有胸苷(T)、假尿苷(ψ)、胞苷(C),称为TψC环;此环可能与结合核糖体有关。tRNA在二级结构的基础上进一步折叠成为倒“L”字母形的三级结构(图3-2-6)。
tRNA分子中稀有碱基的数量是所有核酸分子中比例最高的,这些稀有碱基的来源是转录之后经过加工修饰形成的。
tRNA共有61种,对应61种氨基酸的密码子(64种密码子中,2个是起始密码子,且对应一定氨基酸;3个是终止密码子,不对应氨基酸)
对于多个分子生物学和基因组学应用,从克隆和PCR到基因组测序和芯片分析,DNA纯化都是必经之路。然而,选择最佳的纯化试剂盒却并非易事。例如,在您纯化基因组DNA时,您需要一个试剂盒,能温和地处理核酸,同时又不分离质粒DNA。而且,新一代测序技术对样品的要求颇高,我们也需要一些专门的产品来纯化DNA。在此,我们介绍一些新选择。盐沉淀方法Epicentre(Illumina旗下公司)的MasterPure™CompleteDNAPurificationKit采用一种专利的盐沉淀方法。这一系列试剂盒覆盖各种样品类型,包括血液、固定组织、植物、酵母、昆虫等,在短短30分钟内可带来高产量的核酸,而损失极少。据Epicentre的资深产品经理CristineKinross介绍,有了这些试剂盒,用户在测序或其他分子生物学应用的样品制备之前无需再进行额外的纯化。它们可去除蛋白及其他细胞碎片,而不引入那些必须去除的毒性化合物,从而避免了多次洗涤,并改善核酸产量。Kinross谈道:“利用MasterPure回收核酸的出色纯度让样品可直接进入测序文库的制备。”当然,对于其他应用,包括芯片、qPCR和克隆,它也是适合的。此外,这个试剂盒也能用于RNA的纯化。在获得总的核酸后,经过DNase处理,就能得到总RNA。多种试剂盒Promega提供广泛的核酸纯化试剂盒,采用几种不同的策略。例如,Wizard®GenomicDNAPurificationKit是基于经典的沉淀法,可从全血、组织培养细胞、动物及植物组织、酵母和细菌中提取基因组DNA,灵活高效;而ReliaPrep™系列试剂盒采用柱提法,简单快速。此外,Promega还提供基于磁珠纯化的试剂盒。Promega公司基因组学的全球产品经理EricVincent表示:“尽管溶液的确切组分会有不同,但裂解、结合、洗涤和洗脱的基本过程适用于不同的结合方法(如硅胶或纤维素),不同的纯化形式(纯化柱或磁珠),以及手动和自动纯化操作。”对于一些非常重要的样品类型(如FFPE样品),还需要一些专门的操作或处理。“我们开发了独特的结合/洗涤缓冲液,它们能有效去除抑制下游反应的物质,而优化的系统让研究人员能够捕获少量的核酸并以小体积(不到30μl)洗脱,我们还开发出自动化的解决方案,适合各种试剂和通量,”Vincent说。这些试剂盒提供了完整的解决方案,能够以极小的体积洗脱核酸,同时又避免抑制剂残留在洗脱液中。经过这些试剂盒纯化后,核酸可用于PCR、Sanger测序、新一代测序、芯片等下游分析。经典的硅胶膜QIAGEN的核酸纯化试剂盒依赖DNA与纯化柱上的硅胶膜结合。抑制剂被洗掉,而完整的DNA随后从柱上洗脱,产量高,纯度高,带来更高质量的新一代测序文库。MarcoPolidori-QIAGEN样本制备的全球产品经理-认为,在处理极少量的样品或困难的样品如FFPE时,高产量就变得格外关键。FFPE样品所产生的DNA可能会出现“随机胞嘧啶脱氨”事件,这会导致人为的单核苷酸多态性(SNP)。不过,QIAGEN的GeneReadDNAFFPEKit能够去除脱氨的胞嘧啶,避免在NGS实验中产生错误的结果。此产品尚未正式推出,若有兴趣试用,可填写资料。“我们的大部分试剂盒都已在NGS应用中得以证明,从循环肿瘤DNA的全基因组测序到微生物组,”Polidori谈道。这些试剂盒能让用户从各种样品中获得高质量的DNA,避免FFPE样品出现C-T的假象,并在很短的时间内带来高分子量的DNA。MagAttractHMWDNAkit就能够利用简单的磁珠操作,实现100-200kbDNA的纯化。整个纯化过程温和去除污染物及抑制剂,并具有极高的产量和纯度。离液盐Sigma-Aldrich公司提供GenElute™MammalianGenomicDNAPurificationKit,这是基于离液盐试剂的产品。在含有离液盐的溶液中,样品被裂解,以确保大分子的彻底变性。添加乙醇,让DNA与硅胶膜结合。污染物被洗掉,而DNA被洗脱在Tris缓冲液中。通过专为分离基因组DNA而选择的硅胶膜,此试剂盒让用户能够从各种样品中纯化高质量的DNA,包括培养的细胞、组织(包括鼠尾)、新鲜的全血或白细胞。据介绍,此试剂盒综合了硅胶膜结合和微量离心形式的好处,避免了昂贵的树脂、乙醇沉淀以及有害的有机物,如苯酚、氯仿。更重要的是,它纯化所得的DNA可应用于限制性内切酶消化、PCR、Southernblot、测序等。(作者:JamesNetterwald/生物通编译)
是否需要纯化,还需进一步检测才能确定
1、测浓度和纯度,是否达标
2、跑电泳看条带是否与测的数据相互印证
如果上述两点满足,就不需要纯化,否则需要进一步纯化。
不过根据经验,一般都不需要,我们实验室用的是GNT系列的试剂盒,提取结果就直接进入下游实验了,效果挺稳定
质粒是真核细胞细胞核外或原核生物拟核区外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器(主要指线粒体和叶绿体)中和细菌细胞拟核区以外的环状脱氧核糖核酸(DNA)分子.现在习惯上用来专指细菌(大肠杆菌)、酵母菌和放线菌等生物中细胞核或拟核中的DNA以外的DNA分子.
小鼠没有叶绿体,你可以直接参照小鼠线粒体的提取方法进行提取.
RNA提取试剂盒很多家都有 都不错 楼主可以看看呢本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。
细菌RNA试剂盒提完后有DNA污染,去除DNA的方法:做普通pcr,看看条带对不对。DNase I 处理,酚氯仿抽,然后isopropanol沉淀,DEPC水溶。 不需专门灭火,因为在反转录前有一个步骤是加热变性。一般是75度5min 后面取不超过40%反转录体积的RNA用于反转录,但反转录前最好检测一下RNA质量,免得浪费反转录酶。
但是,这样做的前提的,RNA提得要好,浓度要高,这样免得RNA降解到不能用了。因为在有二价阳离子的(DNAseI buffer含有)情况下,RNA在60度以上时必然发生非酶促降解。
【求助】rna提取疑问123
woodyqlee2021-08-05
各位大侠好,我想做有关CDNA文库构建的东西,但是不知道改用何种方法提取mRNA,现在好像流行用trazol提RNA,但是不知道提取出来的RNA质量如何,能不能保证其中的没有剪切之前的mRNA的内含子不被降解?如果不行,那用什么办法好?多谢了。
另外还有,提完RNA后用RNase-freeDNase处理RNA会不会影响RNA的质量?
油罐车:又称流动加油车、电脑税控加油车、引油槽车、装油车、运油车、拉油车、石油运输车、食用油运输车,主要用作石油的衍生品(汽油、柴油、原油、润滑油及煤焦油等油品)的运输和储藏。根据不同的用途和使用环境有多种加油或运油功能,具有吸油、泵油,多种油分装、分放等功能。运油车专用部分由罐体、取力器、传动轴、齿轮油泵、管网系统等部件组成。 管网系统由油泵、三通四位球阀、双向球阀、滤网、管道组成。
一般都是无色透明的,因为最后溶解的时候主要是用DEPC水等溶液,如果提取出来的溶液显其他颜色比如黄色,可能是提取过程中没有去除好上清液,或者是有PCR抑制剂,主要看你提取的是什么物种,用什么提取方法或试剂盒
看实验目的,如果是做基因克隆之类、定量PCR什么的,RNA、DNA都必须要分开提,如果只是定性看看,可以在一起提。如果样本不是太难得,还是分开提去比较好本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。
各位大哥大姐,我要构建文库,要分离mRNA,因为是第一次做,所以很多都不清楚,请问哪种从总RNA中分离mRNA的试剂盒比较好用一点?能否推荐一下?:?)