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제품특징
□ 특징
● Simple,rapid protocol: 불필요한 incubation 과정이나 ultracentrifugation 없이 30분만에 신속하게 exosome 분리
● Completesolution: exosome 분리에 필요한 모든 구성품을 포함 (pre-clearingcolumn, isolation column,
optimized buffer)
● Highyield: 컬럼 당 최대 2 x1011 개의 exosome 분리 가능
● Highlyspecific: Exosome bindingcompound를 사용하지 않고Capturem™ 기술 방식으로특이적으로 exosome 추출
□ 제품 설명
여러 세포에서 생산되는small extracellular vesicles의 일종인 exosome은 암을 비롯한여러가지 질환에 대한 바이오마커로써 기초 연구 및 제약 분야에서 중요한 연구 대상으로 각광받고 있다. Capturem™Exosome Isolation Kit (Cell Culture)는 기존의 antibodybased isolation 방식이 아닌, proprietary exosome-bindingcompound와 Capturem™ 기술을 결합한 혁신적인 제품으로써, 세포배양액 (cell culture media)으로부터 30분 내에 exosome을 분리할 수 있다.본 제품은 large cellular debris를 제거하기 위한 “ExosomeIoslation Pre-clearing column”과 exosome을 결합하고 분리하기위한 “Capturem™ MaxiPrep Exosome Isolation Columnes (Cell Culture)"를 포함하고 있으며, 이column은 모두 초원심분리기 (ultracentrifuge) 없이, 기존의 benchtop centrifuge에 사용 가능하다. Maxi-prep size (50 ㎖)의 Exosome isolation columns를 이용하기 때문에 한번에 25 ㎖의 cellculture media를 적용할 수 있다. 또한 본 제품은 프로토콜에 최적화된 wash buffer와 elution buffer를 포함하고 있다.
그림 1. Cellular uptake of exosomes in HEK293T cells. Isolated exosomesfrom the Capturem kit, ultracentrifugation, and input CM supernatant werelabeled with PKH26 dye and uptake studies carried out as describedin Methodssection of the technical note.The percentage of total yield required for cellularuptake assay is displayed to provide a comparison of the yield differencesbetween the two methods.
그림 2. Enrichment of exosomalmarkers CD81 and Alix in Capturem-isolated exosomes. Western blotanalysis of CD81 and Alix as per the protocol described in the Methods sectionof the technical note. The band densities were calculated using Image Labsoftware.
그림 3. Quantitativedetermination of yield and mean size of exosome isolated through differentmethods.NTA data showingconcentration (Panel A) and size (Panel B) of precleared CM (input) andisolated exosomes (yield) from HEK293T cells using the Capturem kit, precipitation reagent (Competitor T), and ultracentrifugation. The isolationmethods are described in the Methods section of thetechnical note. The exosomes were isolated from 10 ml of preclearedCM supernatant for each method. The total exosome yield was divided by inputvolume to obtain yield (particle/ml of input).
그림 4. NTA data of isolatedexosomes from HEK293T cells using the Capturem Exosome Isolation Kit (CellCulture). Panel A. Size and particle concentrationdistribution plot of exosomes from HEK293T cells (peak at 95 nm). D90 value isshown. Panel B. Three-dimensional graph illustrating sizeversus intensity (relative frequency of each size range in the eluted sample)versus concentration (particles/ml).
□적용
Isolation ofexosomes for the following downstream applications:
● Genomic analysis by NGS
● Target validation via qPCR
● Proteomic studies using mass spectrometry of digested exosomes lysates
□ 보존
Room temperature
□ 구성품
Capturem™ Maxiprep Exosome Isolation Columns (Cell Culture) | 6 each |
ExosomeIsolation Pre-Clearing Columns | 6 each |
ExosomeIsolation Wash Buffer | 70 ㎖ |
ExosomeIsolation Elution Buffer | 4 ㎖ |
ebiomall.com
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上海好多的供应商的，具体还是看你选择了，其实试剂盒产品都差不多，什么远慕生物，古朵生物...好多的额
用双氧水去除过氧化物酶时，我是自己配的3%双氧水滴到片上而非将片浸入双氧水，这样可否？
用博士德的DAB染色，配制方法为：1mlH20中加入DAB、H2O2、TBS各一滴，我配制的时候发现将DAB加入H20时很容易沉淀，要震荡才能混匀，且将配好的DAB滴到玻片上时，DAB会结为很小块的微颗粒悬浮在液体中但并不染色，是否DAB有问题？
现在打算换中衫的试剂盒，代理商说中衫的试剂盒包括了二抗和DAB，想请教一下该试剂盒的具体内容有些什么？
万分感谢！
