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Abeomics/PD-1 Stable Cell Line/For Profit/14-500ACL

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Abeomics/PD-1 Stable Cell Line/For Profit/14-500ACL

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Abeomics

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PD-1 Stable Cell Line is a stably transfected CHO-K1 cell line which expresses human Programmed Cell Death Protein -1 (PD-1, also known as CD279).

Sequence data: hPD-1 (accession numberNP_005009)

MQIPQAPWPVVWAVLQLGWRPGWFLDSPDRPWNPPTFSPALLVVTEGDNATFTCSFSNTS

ESFVLNWYRMSPSNQTDKLAAFPEDRSQPGQDCRFRVTQLPNGRDFHMSVVRARRNDSGT

YLCGAISLAPKAQIKESLRAELRVTERRAEVPTAHPSPSPRPAGQFQTLVVGVVGGLLGS

LVLLVWVLAVICSRAARGTIGARRTGQPLKEDPSAVPVFSVDYGELDFQWREKTPEPPVP

CVPEQTEYATIVFPSGMGTSSPARRGSADGPRSAQPLRPEDGHCSWPL

Content :	Each vial contains 2 ~ 3 x 10^6 cells in 1 ml of 90% FBS + 10% DMSO
Storage condition :	Immediately upon receipt, store in liquid nitrogen.

Application:.

Screen for antibodies of human PD-1 through Flow Cytometry.

Culture conditions:

Cells should be grown at 37^oC with 5%CO₂using DMEM medium (w/ L-Glutamine, 4.5g/L Glucose and Sodium Pyruvate) supplemented with 10% heat-inactivated FBS supplemented with 10% FBS and 1% Pen/Strep, plus 10µg/ml of Blasticidin. (Note: Do not add Blasticidin to the parental CHO-K1 (Part #14500CCL) cell culture!)

It is recommended to quickly thaw the frozen cells upon receipt or from liquid nitrogen in a37^oCwater-bath, transfer to a tube containing 10 ml of growth medium without Blasticidin, spin down cells, resuspend cells in pre-warmed growth medium without Blasticidin, transfer resuspended cells to T25 flask and culture in37^oC-CO₂incubator.

Leave the T25 flask in the incubator for 1~2 days without disturbing or changing the medium until cells completely recover viability and become adherent. Once cells are over 90% adherent, remove growth medium and passage the cells through trypsinization and centrifugation.At first passage, switch to growth medium containing Blasticidin. Cells should be split before they reach complete confluence.

To passage the cells, detach cells from culture vessel with Trypsin/EDTA, add complete growth medium and transfer to a tube, spin down cells, resuspend cells and seed appropriate aliquots of cells suspension into new culture vessels. Subcultivation ration = 1:10 to 1:20 weekly.To achieve satisfactory results, cells should not be passaged over 16 times.

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By use of this product, user agrees to be bound by the terms of this limited use statement.

This product issolely for Internal Research Purposesandnot for Commercial Purposes. Commercial Purposes include, but are not limited to (1) use of the cell line in manufacturing; (2) use of the cell line to provide a service, information or data; (3) use of the cell line for therapeutic, diagnostic or prophylactic purposes; or (4) resale of the cell line whether or not such cell lines are resold for use in research.The buyer cannot sell, give or otherwise transfer this product to a third party.

Commercial License Agreement is available for non-research use if applicable. Please contact Abeomics (info@abeomics.com).

For Research Use Only. Not for use in diagnostic/therapeutics procedures.

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Grow a 2 ml culture, 24 hr. at 30oC in selective media When culture is ready, use it to inoculate about 55 ml (50 ml plus 5 for O.D.600 readings) of selective 查看更多>

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1、染色过强原因解决办法抗体的浓度过高或抗体孵育时间过长降低抗体滴度（一般指浓缩性抗体）抗体孵育时间：室温1小时或4℃过夜孵育温度过高，孵育温度超过37℃ 一般室温20-28℃ DAB 查看更多>

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SANTA CRUZ公司的免疫组化试剂盒好染色吗？_问答详情_蚂蚁淘,...123

beatingheart2003-09-26

我打算从中山公司定SANTACRUZ公司的mmp-9抗体,但是听师姐说这个公司
的抗体不容易染色,哪为同仁有这方面的经验?另外基因公司卖的cellsignalingtechnology的抗体要1875元,而中山公司卖的这个抗体只有800多,其中差距在哪里?请赐教

免疫组化超详细步骤 123

能忍自安2017-10-02

我要做泛素在昆虫体内在病毒感染前后表达的区别，准备使用免疫组化的方法，可是我是个新手，查资料来说也是比较乱，说的很多方法，有没有人推荐一个简单实用的方法！说的具体一点，通俗一点！谢谢！

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蹄子0002632017-10-02

浓度进行测试，使每一抗体个体化，找到适合自己实验室的理想工作浓度，既使是即用型的抗体也应如此，不能只简单的按说明书进行染色。（2）抗体孵育时间过长或温度较高：解决办法是，严格执行操作规程，最好随身佩带报时表或报时钟，及时提醒，避免因遗忘而造成时间延长。现在流行的二步法（Polymer）敏感性很高，要求一抗孵育的时间不是传统的1小时，而是30分钟，因此，要根据染色结果进行调整。（3）DAB变质和显色时间太长：DAB最好现用现配，如有沉渣应进行过滤后再用。配制好的DAB不应存放时间太长，因为在没有酶的情况下，过氧化氢也会游离出氧原子与DAB产生反应而降低DAB的效力，未用完的DAB存放在冰箱里几天后再用这种似乎节约的办法是不可取的。DAB的显色最好在显微镜下监控，达到理想的染色程度时立即终止反应。不过当染色片太多时或用染色机时，这样做似乎不现实，但至少应对一些新的或少用的抗体显色时进行监控，避免显色时间过长。（4）组织变干：修复液溢出后未及时补充液体、染色切片太多、动作太慢、忘记滴液、滴液流失等都是造成组织变干的原因。解决的办法是操作要认真仔细，采用DAKO笔或PAP Pen在组织周围画圈，可以有效的避免液体流失，也能提高操作速度。（5）切片在缓冲液或修复液中浸泡时间太长（大于24小时）：原因上不清楚，但现象存在。有的实验室喜欢前一天将切片脱蜡至修复，第二天加抗体进行免疫组化染色，如果将装有切片和修复液的容器放在4?C冰箱过夜，对结果无明显影响，如果放在室温，特别是炎热的夏天，会出现背景着色，因此，不可存放时间太长。（6）一抗变质、质量差的多克隆抗体：注意抗体的有效期，过期的抗体要麽不显色要麽背景着色。用新买的抗体时最好设立阳性对照和用使用过的抗体作比较。

“全自动免疫组织化学染色快速诊断”这句话是什么意思?求解,这个...123

风吹叶落5282017-10-02

简单来说，就是用不同的试剂来染色标记组织，根据反应和显色情况，判断组织细胞的表面抗原、细胞内物质的成分，以明确病理改变、病理类型，协助诊断和治疗。这个东西会用到很多的试剂盒，所以相对来说会比较贵。

石蜡切片组织茜素红钙染色试剂盒产品说明书(中文版) 蛋白质和糖...123

一基生物2021-08-05

石蜡切片组织茜素红钙染色试剂盒产品说明书（中文版）

主要用途

石蜡切片组织茜素红（ALIZARINREDS）钙染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和鳌和技术，使钙离子和茜素红S产生复合物，来分析存档中的石蜡包埋的组织切片中橘红色钙沉积现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于石蜡包埋组织切片的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。

技术背景

茜素红（ALIZARINREDS）是一种蒽醌（anthraquinone）衍生物：9,10-二氢-3,4-二羟基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸单钠盐（9,10-Dihydro-3,4-dihydroxy-9,10-dioxo-2-anthracenesulfonicacidsodiumsalt），又称媒介红3（MordantRed3）或茜素磺酸钠（Sodiumalizarinesulfonate）。其分子式为C14H7NaO7S，分子量为342.25。茜素红和钙离子以鳌和方式形成复合物，用以识别组织细胞的钙盐成分。钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过茜素红染色，产生桔红色沉积，但会受到其它金属元素的干扰。

产品内容

脱蜡液（ReagentA）自备

补水液A（ReagentB）100毫升

补水液B（ReagentC）100毫升

补水液C（ReagentD）100毫升

补水液D（ReagentE）100毫升

清理液（ReagentF）30毫升

染色液（ReagentG）10毫升

产品说明书1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；染色液（ReagentG），避免光照；试剂具有腐蚀性，注意操作安全。有效保证3月

用户自备

小型染色缸：用于石蜡切片的脱蜡操作

光学显微镜：用于组织细胞染色后观察分析

实验步骤

一、脱蜡处理

1．取出10片待测的石蜡包埋的组织切片（注意：石蜡包埋前，组织切片须用10％甲醛4℃条件下，固定16小时，此步很重要）

2．（选择步骤）放进80℃烘箱，孵育30分钟

3．（选择步骤）室温下静置15分钟

4．按下表依次放进小染色缸里孵育

染色缸

孵育时间

50毫升脱蜡液（ReagentA）

15分钟

50毫升脱蜡液（ReagentA）

15分钟

50毫升脱蜡液（ReagentA）

15分钟

50毫升补水液A（ReagentB）

3分钟

50毫升补水液B（ReagentC）

3分钟

50毫升补水液C（ReagentD）

3分钟

50毫升补水液D（ReagentE）

3分钟

5．小心移去切片上的补水液D（ReagentE）

6．小心加上200微升清理液（ReagentF）在切片上，铺满整个切片样品表面

7．室温下孵育5分钟

8．小心移去切片上的清理液（ReagentF）

二、样本染色处理

1．小心加上200微升染色液（ReagentG），铺满整个切片样品表面

2．室温下孵育2分钟（注意：可以延长至20分钟）；或直至可见桔红色

3．小心移去切片上的染色液（ReagentG）

4．空气中晾干

三、样本澄清处理

1．小心加上200微升补水液B（ReagentC）在切片上，铺满整个切片样品表面

2．小心移去切片上的补水液B（ReagentC）

3．重复实验步骤1和2二次

4．小心加上200微升补水液A（ReagentB）在切片上，铺满整个切片样品表面

5．小心移去切片上的补水液A（ReagentB）

6．重复实验步骤4和5二次

7．小心加上200微升脱蜡液（ReagentA）在切片上，铺满整个切片样品表面

8．小心移去切片上的脱蜡液（ReagentA）

9．重复实验步骤7和8一次

10．放上盖玻片或封片

11．即刻在一般光学显微镜下观察：钙沉积阳性细胞呈现桔红色

注意事项

1．本产品为50次操作

2．操作时，须带手套

3．试剂具有腐蚀性，注意操作安全

4．石蜡包埋前，组织样品须用10％甲醛4℃条件下，固定16小时，否则造成样品支离破碎

5．所有操作在室温下进行

6．试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面

7．样品染色避免过度，肉眼可见桔红色即可终止染色

8．组织细胞染色完成后，即刻进行光学显微镜观察

9．本公司提供系列组织细胞金属元素染色试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定显色清晰

免疫组化一张片子多个样品可以同时染几个不同抗体吗_问答详情_...123

苹果Nq02021-07-25

免疫组化是利用抗原与抗体间的特异结合原理和特殊的标记技术，对组织和细胞内的特定抗原、抗体进行定位、定性、定量的一们技术。我们都是先进行免疫组化，在DAB染色后进行HE染色。既能看到免疫组化的结果，又能看到细胞的形态，CD34+免疫组化染色后是棕色的颗粒，效果很好。
1）做免疫组化的片子最好不要同时做HE染色，因为那样会掩盖阳性着色的结果；而且用苏木素复染细胞核也是淡染，若要在免疫组化的片子上观察形态学的改变，除非有非常典型的表现，一般是有很大的难度的。
2）你是培养的细胞做免疫组化吗？如果是的话，那就每个样本只有一张片子吧？唯一的办法是进行免疫双染，同时做CD34和AFP（甲胎蛋白）。我觉得后者阳性便可以或多或少的获得向肝细胞分化的证据。
3）用HE染色来识别造血干细胞向肝细胞分化，也就是说要看到肝细胞的典型形态学改变后才可以下结论。问题是：早期的肝细胞仅凭形细胞态学观察并不能很容易的被识别。病理大夫看组织切片，重要的是看其组织学结构，对肝细胞也是这样。如果单拿出来一个细胞，还是培养的细胞，染色后真的不容易区分。所以我觉得你设计的用HE染色来确定早期细胞向哪个方向分化不是很有说服力。
4）如果是切片，也就是说每个样本可以有多张切片，那可以在连续切片上分别染CD34和AFP，拍照时选择相同视野，也有一定说服力。但是还是不如双染法更可靠。
5）用双染最大的问题在于：这两者都表达在胞浆中，染色容易相互覆盖。所以在双染的方法选择上你还要再考虑一下，可不可以用免疫荧光双染？这样也很有说服力的

免疫组化检查多少钱?__123

游客军团ra2017-10-02

免疫组化根据所做的指标的个数收费，比如做10个就收10个免疫组化，每个收费40-160元左右（每个省的定价不一样）。

免疫组化湿盒是干什么用的? 123

2021-07-21

两个作用。一是保湿。在BSA封闭之后，加一抗，一般是37°C一小时，或者室温2小时，或者4°C过夜。无论怎样，时间都比较长，抗体容易干掉，干掉之后染色或者荧光就标不出了。所以，加入一抗之后，放入一个可以密封的盒子里，再放一些湿的滤纸或者海绵，可以有效的防止片子干掉。二抗同理。二是避光。有些二抗上面的发光剂需要避光，否则荧光容易淬灭。湿盒一般是用不透明的材料做的，盖上盖子之后可以保证一个暗室环境。湿盒可以自己做的。一般的小的铝饭盒都可以，放点海绵滤纸棉花什么的进去，用的时候加点水就行=）

免疫组织化学sp法和pv法的区别_123

时夏CD58EZ2021-08-11

一·第二代聚合酶两步法（ PV，En Vision) PV－9000是2001年投入美国市场的，它是将二抗抗体分子的单价Fab段与酶聚合在一起，与一抗结合后，直接用底物进行显色的方法。此方法由于简单、快速、敏感性强且避免了内源性生物素所造成的背景染色，以有逐渐取代其他免疫酶组织化学检测方法的趋势。 PV法操作流程 1石蜡切片脱蜡至PBS。 2 0.3％H2O2甲醇液或3％H2O2室温孵育20min。 3 抗原修复。 4滴加适当稀释的一抗370C 60min或40C过夜。 5 PBS洗涤。 6 酶标记二抗370C 30min或室温60min。 7 DAB(0.04%)显色（镜检控制），水洗、复染、封片二·sp法是一抗＋生物素化二抗＋HRP标记的链霉卵白素（HRP标记的亲和素）一般的sp法步骤啊,具体如下： 1.烤片，68℃，20分钟, 2. 常规二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水；二甲苯I 20min --二甲苯II 20 min--100%酒精I 10min --100%II 10min --95% 5min-- 80% 5min-- 70% 5min 3.阻断灭活内源性过氧化物酶：3%H2O2 37℃孵育10min，PBS冲洗3X5min； 4. 抗原修复:置0.01M枸橼酸缓冲液（PH 6.0）中用煮沸（95℃，15－20min），自然冷却20min 以上，再用冷水冲洗缸子，加快冷却至室温，PBS冲洗3X5min。 5. 正常羊血清工作液封闭，37℃10 min，倾去勿洗. 6. 滴加一抗4℃ 冰箱孵育过夜，PBS冲洗3X5min（用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照）；滴加生物素标记二抗, 37℃孵育30min, PBS冲洗3X5min; 7. 滴加辣根过氧化物酶标记的链霉素卵白素工作液，37℃孵育30min, PBS冲洗3X5min; 8. DAB/ H2O2反应染色，自来水充分冲洗后，苏木素复染，常规脱水，透明，干燥，封片。三·检测试剂盒灵敏度高而极易控制背景的检测系统试剂盒是最为理想也是免疫组化染色优劣的关键，根据免疫组化技术发展至今PV系列及SP试剂盒更优于其它试剂盒。检测系统应与一抗来源相匹配，否则检不出目的物。如一抗是鼠单或多抗的，二抗就应该是羊或兔抗鼠的。四·建议选SP，亦可根据实验室习惯及在组织中的表达情况来定

免疫组化染色示:HER2(0)是什么意思_寻医问药网_xywy.com123

希尔德丶742021-07-26

HER2阴性这是一个啊免疫指标，这种指标如果强阳性的话可以应用一种靶向药物。可以提高化疗的有效率，对肿瘤治疗效果比较好，现在如果乳腺癌免疫组化三个加号。都是推荐应用该要的。也阴性的患者，不见因为。因为收益率非常低

骨髓神经组织定向干细胞的分离培养鉴定123

bigheadzhou2021-08-07

我是第一次做免疫组化，之前从未接触过，求各位老师推荐一下能用于小鼠的nestin抗体和β-tubli...