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Abeomics/PD-1 Stable Cell Line/For Profit/14-500ACL

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PD-1 Stable Cell Line is a stably transfected CHO-K1 cell line which expresses human Programmed Cell Death Protein -1 (PD-1, also known as CD279).

Sequence data: hPD-1 (accession numberNP_005009)

MQIPQAPWPVVWAVLQLGWRPGWFLDSPDRPWNPPTFSPALLVVTEGDNATFTCSFSNTS

ESFVLNWYRMSPSNQTDKLAAFPEDRSQPGQDCRFRVTQLPNGRDFHMSVVRARRNDSGT

YLCGAISLAPKAQIKESLRAELRVTERRAEVPTAHPSPSPRPAGQFQTLVVGVVGGLLGS

LVLLVWVLAVICSRAARGTIGARRTGQPLKEDPSAVPVFSVDYGELDFQWREKTPEPPVP

CVPEQTEYATIVFPSGMGTSSPARRGSADGPRSAQPLRPEDGHCSWPL

Content :	Each vial contains 2 ~ 3 x 10^6 cells in 1 ml of 90% FBS + 10% DMSO
Storage condition :	Immediately upon receipt, store in liquid nitrogen.

Application:.

Screen for antibodies of human PD-1 through Flow Cytometry.

Culture conditions:

Cells should be grown at 37^oC with 5%CO₂using DMEM medium (w/ L-Glutamine, 4.5g/L Glucose and Sodium Pyruvate) supplemented with 10% heat-inactivated FBS supplemented with 10% FBS and 1% Pen/Strep, plus 10µg/ml of Blasticidin. (Note: Do not add Blasticidin to the parental CHO-K1 (Part #14500CCL) cell culture!)

It is recommended to quickly thaw the frozen cells upon receipt or from liquid nitrogen in a37^oCwater-bath, transfer to a tube containing 10 ml of growth medium without Blasticidin, spin down cells, resuspend cells in pre-warmed growth medium without Blasticidin, transfer resuspended cells to T25 flask and culture in37^oC-CO₂incubator.

Leave the T25 flask in the incubator for 1~2 days without disturbing or changing the medium until cells completely recover viability and become adherent. Once cells are over 90% adherent, remove growth medium and passage the cells through trypsinization and centrifugation.At first passage, switch to growth medium containing Blasticidin. Cells should be split before they reach complete confluence.

To passage the cells, detach cells from culture vessel with Trypsin/EDTA, add complete growth medium and transfer to a tube, spin down cells, resuspend cells and seed appropriate aliquots of cells suspension into new culture vessels. Subcultivation ration = 1:10 to 1:20 weekly.To achieve satisfactory results, cells should not be passaged over 16 times.

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By use of this product, user agrees to be bound by the terms of this limited use statement.

This product issolely for Internal Research Purposesandnot for Commercial Purposes. Commercial Purposes include, but are not limited to (1) use of the cell line in manufacturing; (2) use of the cell line to provide a service, information or data; (3) use of the cell line for therapeutic, diagnostic or prophylactic purposes; or (4) resale of the cell line whether or not such cell lines are resold for use in research.The buyer cannot sell, give or otherwise transfer this product to a third party.

Commercial License Agreement is available for non-research use if applicable. Please contact Abeomics (info@abeomics.com).

For Research Use Only. Not for use in diagnostic/therapeutics procedures.

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KEMCO 寿技研工业株式会社

2021-08-04

一、标本制作　　可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片，经适当固定或不固定，作免疫荧光染色用。　　二、荧光抗体染色方法查看更多>

pET载体pET 15b A+,pET 16b A+,pET 17b A+

2018-12-26

我就跑胶和转膜谈一点儿自己的体会1、跑胶电泳Buffer重复利用的时候要注意，不能混浊，有时候能用个3－4次，有时候第二次都不行了，事先前预电泳一下，看看气泡的均匀度；Buffer一定要淹查看更多>

颜宁研究组揭示真核电压门控钙离子通道复合物Cav1.1的三维结构

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一些基本概念和基本知识：1 荧光免疫测定技术的概念：将试剂抗原或试剂抗体用荧光素进行标记，试剂与标本中相应的抗体或抗原反应后查看更多>

Antibody/Protein Labeling Kit – FITC | MCE

2021-09-08

Antibody LabelingThin sections of biological material, mounted on specimen grids, can be easily labeled by floating them, section-side down, on small drops of 查看更多>

Colony Formation Assay_

2018-12-26

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Western blotting 的实验心得.ppt 免费在线阅读

2018-12-26

蛋白提取：１．总蛋白提取（胞膜，胞浆，胞核）：组织匀浆后,15000g, 4度, 20分钟后,取上清.Buffer:NP40 750ul, 脱氧胆酸钠0.5克, SDS 0.1克, 加1*PBS 至100ml. 再加入PMSF(7.4mg/ml) 0.1ml. (现用现加)7.4mg/ml PMSP 查看更多>

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免疫组化的发展简史

2021-07-27

免疫组织化学（Immunohistochemistry）又称免疫细胞化学。它是组织化学的分支，它是用标记的特异性抗体（或抗原）对组织内抗原（或抗体）的分布进行组织和细胞原位检测技术。... 查看更多>

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6. 染色的选择OO. Western Blot哪种染色好？解答：（1）阴离子染料是最常用的，特别是氨基黑，脱色快，背景低检测极限可达到1.5μg，考马虽然与氨基黑有相同的灵敏度，但脱色慢，背景高。丽查看更多>

RPA核酸检测系列eshot第一辑_胜创生物

2021-08-02

一、免疫荧光的标本制作的基本程序同DAB显色的免疫组化，不同点如下：1、免疫荧光不需要使用双氧水处理，封闭和一抗孵育与其它相同查看更多>

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血凝块中DNA的抽提方法123

知识就是命运2021-07-22

我是做肝细胞肝癌和胆管细胞癌的免疫组化。

这是之前的抗体做出来的效果，EDTA修复，1:400的浓度（抗体100微升，0.1mg/ml，价格3000多），效果很好。

后来过期了，就又买了一支（抗体100微升，0.2mg/ml，价格7000多，贵很多），过程一样，EDTA、高压、酶修复，浓度1:200300350400500都试过，4度过夜、封闭等，都试过，就是做不粗来。

现在就是淋巴细胞强阳，肿瘤不阳，谁能帮我看看什么原因。我已经找不到什么理由了

石蜡切片组织茜素红钙染色试剂盒产品说明书(中文版) 蛋白质和糖...123

一基生物2021-08-05

石蜡切片组织茜素红钙染色试剂盒产品说明书（中文版）

主要用途

石蜡切片组织茜素红（ALIZARINREDS）钙染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和鳌和技术，使钙离子和茜素红S产生复合物，来分析存档中的石蜡包埋的组织切片中橘红色钙沉积现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于石蜡包埋组织切片的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。

技术背景

茜素红（ALIZARINREDS）是一种蒽醌（anthraquinone）衍生物：9,10-二氢-3,4-二羟基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸单钠盐（9,10-Dihydro-3,4-dihydroxy-9,10-dioxo-2-anthracenesulfonicacidsodiumsalt），又称媒介红3（MordantRed3）或茜素磺酸钠（Sodiumalizarinesulfonate）。其分子式为C14H7NaO7S，分子量为342.25。茜素红和钙离子以鳌和方式形成复合物，用以识别组织细胞的钙盐成分。钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过茜素红染色，产生桔红色沉积，但会受到其它金属元素的干扰。

产品内容

脱蜡液（ReagentA）自备

补水液A（ReagentB）100毫升

补水液B（ReagentC）100毫升

补水液C（ReagentD）100毫升

补水液D（ReagentE）100毫升

清理液（ReagentF）30毫升

染色液（ReagentG）10毫升

产品说明书1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；染色液（ReagentG），避免光照；试剂具有腐蚀性，注意操作安全。有效保证3月

用户自备

小型染色缸：用于石蜡切片的脱蜡操作

光学显微镜：用于组织细胞染色后观察分析

实验步骤

一、脱蜡处理

1．取出10片待测的石蜡包埋的组织切片（注意：石蜡包埋前，组织切片须用10％甲醛4℃条件下，固定16小时，此步很重要）

2．（选择步骤）放进80℃烘箱，孵育30分钟

3．（选择步骤）室温下静置15分钟

4．按下表依次放进小染色缸里孵育

染色缸

孵育时间

50毫升脱蜡液（ReagentA）

15分钟

50毫升脱蜡液（ReagentA）

15分钟

50毫升脱蜡液（ReagentA）

15分钟

50毫升补水液A（ReagentB）

3分钟

50毫升补水液B（ReagentC）

3分钟

50毫升补水液C（ReagentD）

3分钟

50毫升补水液D（ReagentE）

3分钟

5．小心移去切片上的补水液D（ReagentE）

6．小心加上200微升清理液（ReagentF）在切片上，铺满整个切片样品表面

7．室温下孵育5分钟

8．小心移去切片上的清理液（ReagentF）

二、样本染色处理

1．小心加上200微升染色液（ReagentG），铺满整个切片样品表面

2．室温下孵育2分钟（注意：可以延长至20分钟）；或直至可见桔红色

3．小心移去切片上的染色液（ReagentG）

4．空气中晾干

三、样本澄清处理

1．小心加上200微升补水液B（ReagentC）在切片上，铺满整个切片样品表面

2．小心移去切片上的补水液B（ReagentC）

3．重复实验步骤1和2二次

4．小心加上200微升补水液A（ReagentB）在切片上，铺满整个切片样品表面

5．小心移去切片上的补水液A（ReagentB）

6．重复实验步骤4和5二次

7．小心加上200微升脱蜡液（ReagentA）在切片上，铺满整个切片样品表面

8．小心移去切片上的脱蜡液（ReagentA）

9．重复实验步骤7和8一次

10．放上盖玻片或封片

11．即刻在一般光学显微镜下观察：钙沉积阳性细胞呈现桔红色

注意事项

1．本产品为50次操作

2．操作时，须带手套

3．试剂具有腐蚀性，注意操作安全

4．石蜡包埋前，组织样品须用10％甲醛4℃条件下，固定16小时，否则造成样品支离破碎

5．所有操作在室温下进行

6．试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面

7．样品染色避免过度，肉眼可见桔红色即可终止染色

8．组织细胞染色完成后，即刻进行光学显微镜观察

9．本公司提供系列组织细胞金属元素染色试剂产品

质量标准

1．本产品经鉴定性能稳定

2．本产品经鉴定显色清晰

免疫组化是什么意思?__123

2017-10-02

做免疫组化的意思是什么？

免疫组化一张片子多个样品可以同时染几个不同抗体吗_问答详情_...123

苹果Nq02021-07-25

免疫组化是利用抗原与抗体间的特异结合原理和特殊的标记技术，对组织和细胞内的特定抗原、抗体进行定位、定性、定量的一们技术。我们都是先进行免疫组化，在DAB染色后进行HE染色。既能看到免疫组化的结果，又能看到细胞的形态，CD34+免疫组化染色后是棕色的颗粒，效果很好。
1）做免疫组化的片子最好不要同时做HE染色，因为那样会掩盖阳性着色的结果；而且用苏木素复染细胞核也是淡染，若要在免疫组化的片子上观察形态学的改变，除非有非常典型的表现，一般是有很大的难度的。
2）你是培养的细胞做免疫组化吗？如果是的话，那就每个样本只有一张片子吧？唯一的办法是进行免疫双染，同时做CD34和AFP（甲胎蛋白）。我觉得后者阳性便可以或多或少的获得向肝细胞分化的证据。
3）用HE染色来识别造血干细胞向肝细胞分化，也就是说要看到肝细胞的典型形态学改变后才可以下结论。问题是：早期的肝细胞仅凭形细胞态学观察并不能很容易的被识别。病理大夫看组织切片，重要的是看其组织学结构，对肝细胞也是这样。如果单拿出来一个细胞，还是培养的细胞，染色后真的不容易区分。所以我觉得你设计的用HE染色来确定早期细胞向哪个方向分化不是很有说服力。
4）如果是切片，也就是说每个样本可以有多张切片，那可以在连续切片上分别染CD34和AFP，拍照时选择相同视野，也有一定说服力。但是还是不如双染法更可靠。
5）用双染最大的问题在于：这两者都表达在胞浆中，染色容易相互覆盖。所以在双染的方法选择上你还要再考虑一下，可不可以用免疫荧光双染？这样也很有说服力的

ChIN简介页:Crompton Corporation (精细化学品, 聚合物 ...123

机器皮蛋112号2017-10-02

油红O可能行不通的

【求助】ALP染色试剂盒和茜素红哪家公司的比较好? 经验共享分析测 ...123

干嘛要学医2017-04-08

ALP试剂盒和ALP染色试剂盒是一样的吗？ALP染色和茜素红染色用什么拍照？

关于免疫组化,请各位帮忙看一下是染色是胞染还是核染? 实验动物...123

北上回家2021-07-30

本人对软骨石蜡切片做了MMP-13的免疫组化染色，首次做，无法判断染色部位，请各位帮忙看一下

骨髓神经组织定向干细胞的分离培养鉴定123

bigheadzhou2021-08-07

我是第一次做免疫组化，之前从未接触过，求各位老师推荐一下能用于小鼠的nestin抗体和β-tubli...